应用siRNA敲低TPM3基因表达后对大鼠胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响

目的：探究原肌球蛋白3（tropomyosin alpha-3 chain,TPM3）在大鼠胰腺癌细胞中对其侵袭转移能力的影响并初步阐述其可能的分子机制。方法：（1）将70只大鼠随机分为手术组40只[将7,12-二甲基苯并蒽（7,12-dimethyl-1,2-benzanthracene,DMBA]植入大鼠胰腺被膜下后荷包缝合被膜）,假手术组15只（只对胰腺进行荷包缝合而后关腹,不置入DMBA）,阴性对照组15只（不做任何处理）,建立大鼠胰腺癌模型。（2）通过组织免疫组化染色的方法对差异蛋白TPM3进行验证。（3）通过机械分离和酶阶段消化法分离胰腺癌组织的方法获取大鼠胰腺癌细胞,体外传代培养获得纯度较高的细胞后,应用siRNA敲低大鼠胰腺癌细胞中TPM3基因的表达;通过RT-PCR技术检测其沉默效果。（4）通过Transwell实验和平板克隆实验分别对细胞的侵袭、迁移能力及生长增殖能力进行观察。结果：（1）经病理验证模型组有37.83%（14/37）形成胰腺癌,证明大鼠胰腺癌模型建立成功。（2）免疫组化验证胰腺癌组织中TPM3阳性率（92.8%）明显高于正常胰腺组织（6.7%）。（3）RT-PCR结果显示,转染TPM3-siRNA的细胞中TPM3的表达量（0.31±0.02）明显低于其余各组,脂质体组（0.45±0.02）,阴性对照组（0.45±0.02）,空白对照组（0.43±0.02）（P＜0.05）,其余各组之间TPM3表达量差异无统计学意义（P ＞0.05）。（4）转染TPM3-siRNA的细胞其侵袭[（161.63±4.94）个]、迁移能力[（206.87±4.21）个]及生长增殖能力[（51.5±2.327）个]较对照组明显降低[分别为（39.7±1.40）个,（67.27±1.76）个,（5.900±0.767）个]（P＜0.05）。结论：体外化学合成的TPM3-siRNA可有效的抑制大鼠胰腺细胞TPM3的表达,TPM3表达降低后其侵袭能力、迁移能力及生长增殖能力下降。     

Ⅲ Ⅳ型肝门胆管癌扩大肝切除临床疗效分析*

目的:探讨扩大肝切除对Bismuth-Corlette Ⅲ、Ⅳ型肝门胆管癌的临床疗效。方法:回顾性分析蚌埠医学院第一附属医院2008年1 月至2015年5 月61例Bismuth-Corlette Ⅲ、Ⅳ型肝门部胆管癌患者的临床资料。其中扩大肝切除组行半肝及以上肝切除和（或）联合尾状叶切除术22例;局限肝切除组行肝门区不规则肝切除术39例。结果:扩大肝切除组患者相比局限肝切除组手术时间长、术中出血量多。扩大肝切除组患者并发症发生率低于局限肝切除组患者;扩大肝切除组无围手术期死亡患者,局限肝切除组有2 例围手术期死亡患者;扩大肝切除组R 0 切除21例,R 0 切除率为95.5%（21/ 22）,局限肝切除组R 0 切除20例,R 0 切除率为51.3%（20/ 39）,差异具有统计学意义（P < 0.05）;扩大肝切除组1、3、5 年生存率分别是77.27% 、36.36% 、13.64% ;局限肝切除组1、3、5 年生存率分别是69.23% 、20.51% 、1.64% ,差异具有统计学意义（P < 0.05）。 结论:Bismuth-Corlette Ⅲ、Ⅳ型肝门部胆管癌扩大肝切除可以有效提高患者的R 0 切除率和生存率,改善患者的预后。      

沉默信息调节因子2在胆管癌中的表达及其对可切除胆管癌患者预后的预测价值

目的:探究沉默信息调节因子2(SIRT2)在胆管癌组织中的表达、潜在作用机制及临床意义,并构建可切除胆管癌患者生存预测模型。方法:首先,通过癌症基因图谱和基因表达综合数据库分析SIRT2在胆管癌组织与正常组织中的表达差异,并通过基因集富集分析（GSEA）探讨SIRT2在胆管癌中的潜在机制;其次,免疫组织化学染色检测研究者队列胆管癌组织中SIRT2的表达,并分析SIRT2表达与胆管癌患者临床病理特征和预后的关系。最后,基于COX回归分析结果构建胆管癌术后患者预后列线图预测模型,使用校准曲线及时间依赖性的受试者工作特征曲线（ROC）对列线图模型进行评价,并与美国癌症联合委员会（AJCC）第八版TNM分期预测效果进行比较。结果:公共数据库中SIRT2 mRNA在胆管癌组织中显著过表达,免疫组织化学染色发现SIRT2蛋白在胆管癌组织中表达高于癌旁组织（均P<0.05）。GSEA结果显示,SIRT2高表达可能影响了多种代谢相关信号通路,如脂肪酸代谢、氧化磷酸化、氨基酸代谢等。SIRT2表达与血清三酰甘油水平、肿瘤大小、淋巴结是否转移相关（均P<0.05）。生存分析结果显示,SIRT2...     

肝门区域性血流阻断在肝肿瘤切除手术中的应用

目的:探讨肝门区域性血流阻断在肝肿瘤切除术中的应用价值。方法:回顾性分析因肝肿瘤行肝切除术54例病人的临床资料,根据术中肝脏血流阻断技术不同,将54例因肝肿瘤行肝切除术病人分为2组,A组24例病人接受肝门区域性血流阻断术治疗,B组30例病人接受Pringle肝门血流阻断术治疗。结果:2组病人手术时间、术中出血量、肝门血流阻断时间和术后24 h腹腔引流量差异均有统计学意义（P<0.05～P<0.01）。术后第3、7天,A组丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、总胆红素和C反应蛋白水平均低于B组（P<0.05~P<0.01）。2组并发症的发生率差异无统计学意义（P>0.05）。2组均无围手术期死亡病例。结论:肝门区域性血流阻断技术可明显减少肝肿瘤切除术中的出血量,有效减轻肝功能损害及肝缺血-再灌注损伤,是肝肿瘤切除术中较为合理的控制肝脏出血的方法。     

肝门部胆管癌不同术前胆道引流方式的选择

目的:对比经皮肝内胆管引流术(percutaneous transhepatic biliary drainage,PTBD)与经内镜胆道引流(endoscopic biliary drainage,EBD)两种减黄方式在肝门部胆管癌术前的安全性及有效性。方法:对2004年1月至2017年6月蚌埠医学院第一附属医院106例肝门部胆管癌术前胆道引流的临床资料进行回顾性分析,其中PTBD组62例,EBD组44例。结果:两组患者间术前基本资料无显著差异,PTBD组首次操作成功率58.1%,EBD组首次操作成功率56.8%,两组间术前引流时长无明显差异,操作引起的胆管炎及胰腺炎EBD组明显高于PTBD组(54.5%比22.6%,p0.001),PTBD组中2位患者在肝门部胆管癌根治术后发生肿瘤细胞管道种植。结论:肝门部胆管癌术前行EBD较PTBD有较高的胆管炎及胰腺炎发生率,但PTBD可引起沿肿瘤种植。     

联合尾状叶切除在Ⅲ型肝门胆管癌的临床疗效分析

目的:评价联合尾状叶切除在手术治疗型肝门部胆管癌的作用与对生存的影响。方法:回顾性分析2002年1月至2017年6月蚌医一附院肝胆外科进行手术治疗的Ⅲ型肝门胆管癌患者。患者分为联合尾状叶切除组及未联合尾状叶切除组。结果:共127例患者纳入研究,其中,57例未行联合尾状叶切除(44.9%),70例联合尾状叶切除(55.1%)。联合尾状叶切除组术前中位胆红素水平明显高于对照组(P=0.017),联合尾状叶切除组患者中位总生存期(OS)显著高于对照组(64.0 vs 34.6个月),两组有显著性差异(p=0.010)。多因素分析显示,淋巴结转移阳性(P=0.025)和出现临床症状(P0.001)为影响中位OS的危险因素。结论:联合尾状叶切除术可使Ⅲ型肝门部胆管癌中位OS的明显提高,其他影响中位OS的因素还包括淋巴结转移阳性和出现临床症状。     

腹腔镜在胰腺外科的应用现状及进展

正自1987年法国Mouret医生成功施行腹腔镜胆囊切除术(1apamscopic cholecystectomy,LC),腹腔镜手术因具有切口小、视野清、出血少、术后康复快、并发症少等优点,已广泛应用丁临床,肝胆、脾脏、胃肠甚至甲状腺手术均得以在内镜下完成。上世纪90年代早期,LC已成为胆囊切除的金标准,但在胰腺外科领域,腹腔镜技术除用于活检外尚无治疗意义,主要是由于胰腺周围解剖复杂、手术难度大、术后并发症多等原因,使得腹腔镜技术在胰腺外科发展相对缓慢。近