CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植自发性免疫耐受状态中的作用

目的 探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植免疫耐受状态中的作用。方法 进行小鼠原位肝脏移植,诱导出移植免疫耐受后,向受体注射抗CD25抗体（PC61）以去除CD4^＋CD25^＋T细胞,检测受体内CD4^＋CD25^＋T细胞数量及叉状头／翅膀状螺旋转录因子（Foxp3）的表达以确定CD4^＋CD25^＋T细胞完全被清除,同时观察受体生存时间。结果与同种同系小鼠肝脏移植结果相似,同种异系肝脏移植小鼠的生存时间亦均超过70d。移植免疫耐受诱导后,PC61不同注射方案均能完全去除受体小鼠肝脏、脾脏及血液中的CD4^＋CD25^＋T细胞,且移植肝脏中Foxp3mRNA的表达也明显降低,表明完全去除了CD4^＋CD25。调节性T细胞,但肝脏移植动物生存时间并未受到影响。结论CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对于小鼠肝脏移植自发性免疫耐受的维持并非必需。     

外源性IL-2对小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞影响的实验研究

目的：探讨IL-2对CD4＋CD25＋调节性T细胞（Tregs）的增殖及功能的影响。方法：提取B6小鼠脾脏细胞,流式细胞仪分离CD4＋CD25＋Tregs,将新鲜分离的CD4＋CD25＋Tregs与抗CD3单克隆抗体、同种同系抗原递呈细胞（APCs）及外源性IL-2共同培养,测定其增殖活性;并检测体外扩增后的CD4＋CD25＋Tregs的免疫抑制活性及其Foxp3的表达。结果：与外源性IL-2共同培养的CD4＋CD25＋Tregs增殖程度强烈,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;体外扩增的CD4＋CD25＋Tregs抑制CD4＋CD25-T细胞增殖活性的能力与新鲜分离的CD4＋CD25＋Tregs相似（P〉0.05）。体外扩增的CD4＋CD25＋Tregs的Foxp3表达与新鲜分离的CD4＋CD25＋Tregs亦相似（P〉0.05）。结论：外源性IL-2能够消除CD4＋CD25＋Tregs的无反应状态,且体外扩增的CD4＋CD25＋Tregs保持了其抑制活性。     

CD4+CD25+调节性T细胞对小鼠肝脏移植自发性免疫耐受的影响

目的 研究CD4+CD25+调节性T细胞在诱导自发性肝脏免疫耐受中的作用.方法 向受体和供体注射抗CD25抗体(PC61)后进行小鼠原位肝脏移植,观测其生存时间.术后20～30 d切取移植肝脏行HE染色,同时观察CD4+CD25+T细胞对CD4+T细胞和CD8+T细胞功能的影响.结果 去除受体而不是供体小鼠的CD4+CD25+T细胞可以导致肝移植排斥反应.而且,去除CD4+CD25+T细胞使移植物的白细胞浸润明显增多,组织损伤加重.同时,去除CD4+CD25+T细胞导致CD4+T细胞的增殖活性和CD8+T细胞的细胞毒活性明显增强.结论 受体来源的CD4+CD25+调节性T细胞在小鼠肝脏移植免疫耐受诱导中起重要作用.

Abstract：

Objective To examine the contribution of CD4+ CD25+ regulatory T cells to liver transplant tolerance. Methods After injection of anti-CD25 monoclonal antibody (mAb, PC61), mouse orthotopic liver transplantation was performed and survivals were determined. The paraffin-embedded sections of hepatic allografts were cut and stained with hematoxylin and eosin (HE). Furthermore, the effect of CD4+ CD25+ regulatory T cells on proliferative response of CD4+ T cells and cytotoxicity of CD8+ T cells was examined by depleting these regulatory T cells. Results Depletion of these cells in the recipients but not in the donors before liver transplantation caused rejection. Histological analyses of hepatic allografts with PC61 treatment showed extensive leukocyte infiltration and tissue destruction, whereas those in the control group showed minimal changes. Moreover, elimination of CD4+CD25+ T cells resulted in the enhancement of both proliferative response of CD4+ T cells and cytotoxicity of CD8+ T cells against donor-type alloantigen. Conclusions These results suggest that CD4+CD25+ regulatory T cells were important for tolerance induction to hepatic allografts.     

肿瘤残余在肝癌微波消融治疗后出现的原因及防治

目的:探讨微波消融术后肿瘤残余的原因及防治措施.方法:回顾性总结了中国医科大学附属第四医院2004-10/2010-06 465例(796个肿瘤结节)肝癌患者行微波消融治疗的临床资料,分析了48例患者微波消融术后肿瘤残余的原因.结果:436例患者(754个肿瘤结节)获得有效复查资料,其中48例(48/436,11.01...     

一种改良的吻合法小鼠腹腔异位心脏移植模型

目的应用一种新的吻合法建立小鼠腹腔异位心脏移植模型,提高移植手术的成功率及移植物存活率,减少手术并发症。方法供体心脏异位移植于受体腹腔,将供体心脏升主动脉和肺动脉分别与受体腹主动脉和肝下下腔静脉吻合。不单独对供体肺门组织进行结扎,也不结扎受体腰静脉,不将受体腹主动脉与下腔静脉分离,而是一并游离并阻断。结果本研究进行手术229例,手术成功率为97.82%(224/229)。同种同系移植物存活时间均在6个月以上。并发症发生情况:主动脉血栓2例(0.87%),下腔静脉血栓1例(0.44%),心脏扭转4例(1.75%),出血4例(1.75%),下肢麻痹2例(0.87%),肠梗阻1例(0.44%),无麻醉意外发生。结论改良的小鼠腹腔异位心脏移植术简单可靠,较其他方法节省了手术时间并减少了出血的可能,为移植免疫学研究提供了一种实用的方法。     

CXC趋化因子受体6在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义

目的 研究CXC趋化因子受体6(CXCR6)在同种异体小鼠心脏移植中的表达及CXC趋化因子配体16(CXCL16)与CXCR6相互作用对移植物存活时间的影响.方法 以野生型Balb/c小鼠(H-2d)为供者(同种移植组),或以野生型C57BL/6小鼠(H-2b)为供者(同系移植组),以野生型C57BL/6小鼠为受者分别行小鼠腹腔异位心脏移植.测定同系和同种移植组小鼠移植心脏CXCR6mRNA的表达,并测定受者脾脏CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达.另制作小鼠同种异位心脏移植模型(Balb/c小鼠为供者,C57BL/6小鼠为受者),将其分为实验组和对照组,实验组受者移植当天至发生排斥反应时腹腔注射抗CXCL16抗体,对照组受者同期注射对照抗体.记录两组移植心脏存活时间.进行CD8+T淋巴细胞的细胞毒试验,即用Balb/c小鼠脾细胞免疫C57BL/6小鼠后,获取C57BL/6小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞,将Balb/c小鼠脾细胞与C57BL/6小鼠CD8+T淋巴细胞混合培养,分别加入抗CXCL16抗体、小鼠IgG(对照抗体)和抗CD40L抗体.结果 同种移植组移植心脏中CXCR6 mRNA的表达以及脾脏CD8+T淋巴细胞上CXCR6的表达均高于同系移植组和正常对照组.抗CXCL16抗体对CD8+T淋巴细胞的细胞毒活性无影响.与对照组相比较,实验组小鼠移植心脏存活时间并未明显延长.结论 小鼠心脏移植排斥反应中CD8+T淋巴细胞CXCR6的表达上升,阻断CXCL16/CXCR6相互作用并不能延长移植心脏的存活时间.     

新型冠状病毒肺炎患者肝功能损伤的危险因素分析

背景肝功能损伤情况在新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease-2019,COVID-19)患者中较为常见,具体原因不甚清楚.本研就回顾性分析COVID-19患者的临床资料,探讨肝功能损伤的危险因素,期望为新型冠状病毒感染相关的肝功能损伤的防治提供理论依据.目的本研究旨在探讨COVID-19患者肝功能损伤的相关危险因素.方法整理2020-02-04/2020-02-29日于武汉火神山医院诊治的100例COVID-19患者的临床病历资料.分析性别、年龄、基础疾病、饮食情况和入院前服药情况等临床参数与各项肝功能指标表达的关系.结果在100例新型冠状病毒肺炎患者中, 54例为男性,其平均年龄为59.89岁±13.07岁.新型冠状病毒肺炎的常见临床症状为发热(81%)、咳嗽(64%)、乏力(52%).在100例患者中, 38例患者观察到肝功能的异常,包括28例有丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)升高,10例有天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)升高,20例有谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyltransferase,γ-GGT)升高,7例有碱性磷酸酶升高, 6例有总胆红素升高, 15例有乳酸脱氢酶升高.男性患者更易出现ALT (P0.001)、AST (P=0.006)和γ-GGT(P 0.001)的升高.入院前抗病毒药或中成药应用与COVID-19患者的各项肝功能指标之间无统计学意义.结论男性新冠病毒性肺炎患者更易出现肝功能损伤.     

CD4+CD25+调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植自发性免疫耐受状态中的作用

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞在维持小鼠肝脏移植免疫耐受状态中的作用.方法 进行小鼠原位肝脏移植,诱导出移植免疫耐受后,向受体注射抗CD25抗体(PC61)以去除CD4+CD25+T细胞,检测受体内CD4+CD25+T细胞数量及叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)的表达以确定CD4+CD25+T细胞完全被清除,同时观察受体生存时间.结果 与同种同系小鼠肝脏移植结果 相似,同种异系肝脏移植小鼠的生存时间亦均超过70 d.移植免疫耐受诱导后,PC61不同注射方案均能完全去除受体小鼠肝脏、脾脏及血液中的CD4+CD25+T细胞,且移植肝脏中Foxp3 mRNA的表达也明显降低,表明完全去除了CD4+CD25+调节性T细胞,但肝脏移植动物生存时间并未受到影响.结论 CD4+CD25+调节性T细胞对于小鼠肝脏移植自发性免疫耐受的维持并非必需.     

继发性甲状旁腺功能亢进患者术后高浓度补钙静脉通路选择的研究

目的探索继发性甲状旁腺功能亢进患者术后静脉高浓度补钙的最佳输液途径。方法收集2016年1月至2019年10月医院收治的手术治疗后需静脉补钙的406例继发性甲状旁腺功能亢进患者的临床资料,按输液途径不同分为3组,A组经非动静脉内瘘端前臂静脉留置针输液(98例),B组非动静脉内瘘端经外周静脉穿刺中心静脉置管输液(43例),C组经颈外静脉留置针输液(265例),观察不同组间患者的输液不良反应、护理操作依从性及护理满意度。结果A、B两组患者出现不同程度输液不良反应,C组患者未出现输液不良反应(P<0.01或P<0.05);3组患者在输液疼痛、依从性、满意度方面有显著差异性(P<0.01)。结论继发性甲状旁腺功能亢进患者术后采用颈外静脉留置针方式静脉高浓度补钙,输液不良反应轻,患者依从性和满意度高,值得推广。     

阻断CD40-CD40配体共刺激信号诱导的移植免疫耐受对树突状细胞的影响

目的:探讨阻断CD40-CD40配体共刺激信号诱导移植免疫耐受对树突状细胞功能的影响。方法:将抗CD40配体抗体(MR-1)应用于小鼠心脏移植受体以诱导移植免疫耐受,使用磁珠细胞提取装置从排斥及免疫耐受受体中提取树突状细胞。使用流式细胞仪测定树突状细胞表面分子CD40、CD80及CD86的表达。于体外以LPS再刺激树突状细胞,并使用ELISA法测定上清中的细胞因子IL-10和IL-12的水平。同时采用混合淋巴细胞反应(MLR)测定了树突状细胞的刺激性及免疫调节能力。结果:免疫耐受受体的树突状细胞表达低水平的共刺激分子CD40、CD80及CD86,同时分泌高水平的IL-10和低水平的IL-12。而且这些树突状细胞具有较弱的刺激性,并能抑制脾细胞的增殖。结论:阻断CD40-CD40配体共刺激信号可以产生免疫耐受状态,在这样的免疫耐受受体中诱导出未成熟表型的IL-10highIL-12low树突状细胞,这些细胞具有免疫调节活性。