生物节律相关基因 Cry1与肝癌的相关性探讨

目的研究生物节律相关基因Cry1与肝癌发生发展的相关性.方法逆转录PCR、Northern blot和免疫组织化学方法检测Cry1在各种肿瘤细胞系、人正常组织及人肝癌与配对的癌旁组织中的表达.构建Cry1重组的真核表达质粒并转染肝癌细胞SMMC-7721.生长曲线和软琼脂克隆形成试验检测Cry1过表达的SMMC-7721细胞的体外增殖速度.逆转录PCR检测与Cry1相互作用的生物节律基因在Cry1过表达的SMMC-7721中的表达.结果Cry1在人各种正常组织中均有不同程度的表达.Cry1在人肝癌癌旁组织中的表达水平高于癌组织中的表达.过表达Cry1对SMMC-7721细胞的体外增殖没有明显影响.结论生物节律相关基因Cry1与肝癌发生发展可能有一定的相关性.     

酵母LAG1同源的人类长寿保障新基因LASS2的克隆和功能研究

目的　分离和克隆肝癌相关基因。方法　我们用高通量功能筛选和RACE(rapidamplificationofcDNAends)方法从人肝cDNA文库中克隆到一个与酵母长寿保障基因LAG1高度同源的人类新基因LASS2 (homosapienslongevityassurancehomologue 2ofyeastLAG1)。结果　LASS2在正常人肝组织和肾组织中高表达 ,其表达谱不同于早先在人中克隆到的另一个与酵母LAG1高度同源的人类长寿保障基因LAG1Hs- 1。放射杂交基因定位显示LASS2位于人类染色体 1q11,酵母双杂交和GST结合实验发现LASS2蛋白能与细胞中的几个膜相关受体或转运体相互作用 ;另外 ,LASS2在体外对人肝癌细胞的克隆形成具有抑制作用 ,提示该基因可能参与细胞的生长调控。结论　LASS2是一个新的肝癌相关基因。     

Ⅲ型胶原在人和大鼠肝纤维化中的意义

为了深入研究Ⅲ型胶原在纤维化中的意义，本工作应用核酸分子杂交和免疫组化技术，对人体慢性肝病和大鼠肝纤维化模型（早期）肝组织中Ⅲ型胶原蛋白不同阶段的表达产物（前胶原ｍＲＮＡ、前胶原端肽和胶原蛋白）作定性、定量和定位检测，同时对Ⅰ型胶原作相应观察，兼以结蛋白和α－平滑肌肌动蛋白分别作为贮脂细胞和肌成纤维细胞的标记。结果显示肝纤维化早期和活动期主要是Ⅲ型胶原合成增多，并证明间质细胞特别是炎症活动区窦旁贮脂细胞及其相关细胞是肝纤维化时主要的胶原生成细胞。     

抗人脑胶质瘤单克隆抗体SZ—39重链可变区基因的克隆与序列分析

从抗人脑胶质瘤单克隆抗体杂交瘤细胞中抽提总RNA，经逆转录-聚合酶链反应（RT－PCR）直接扩增出348bp的重链可变区（VH）CcNA片断，经核着酸序列分析研究，证实已获得了单抗SZ－39重链可变区基因。从而为今后进一步制备基因工程抗体打下了基础。     

人乳腺癌雌激素受体依赖性的测定

正常乳腺的生长发育,受多肽类激素和甾体类激素的调节和控制。乳腺细胞癌变后,有的可以完全或部分丧失雌激素受体(E_2R),此时不再成为受激素控制的靶细胞,即所谓“自主型”或“非激素依赖性肿瘤”,但还有半数以上的乳腺癌可以保留数量不等的E_2R,仍受激素环境的     

糖化血红蛋白和血糖及血脂联合检测在2型糖尿病诊治中的意义

目的探讨2型糖尿病糖化血红蛋白(HbA1c)及葡萄糖(GLU)与血脂异常之间的关系,为临床诊断治疗糖尿病血脂异常提供依据。方法 200例2型糖尿病患者及120名健康体检者的空腹HBA1c、GLU、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)各指标进行统计分析。结果 2型糖尿病患者组HbA1c、GLU、TG、LDL-C、TC均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),HDL-C与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HbA1c及血糖与血脂各项目呈一定相关性,监测HbA1c在反映糖尿病控制的同时,也可间接反映糖尿病患者血脂代谢紊乱的控制程度。     

肝素和PDGF对人肾小球系膜细胞基质合成和分泌的影响

探讨肝素和血小板源性生长因子对体外培养的人肾小球系膜细胞胶原合成和分泌以及纤维蛋白，α１型胶原ｍＲＮＡ表达的影响。方法：应用＾３Ｈ－脯氨酸掺入，胶原酶消化法测定胶原含量；采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ法检测ＦＮ，α１型胶原ｍＲＮＡ。结果：对照组，肝素组及ＰＤＧＦ组细胞内胶原含量分别为（１．２５０±０．５０１）％，（０．８０９±０．１６１）％和（２．６９０±０．５９７）％而其培养液中的含量分别为（１     

大鼠肝纤维化Ito细胞纤维连接蛋白受体α5β1的表达

目的研究纤维连接蛋白受体α５β１在大鼠肝纤维化中的作用。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交及免疫组化方法观察大鼠实验性纤维化肝组织和离体Ｉｔｏ细胞纤维连接蛋白（ＦＮ）及其受体α５β１表达的变化。结果（１）α５β１主要分布于血窦壁的内皮细胞和部分结蛋白（ＤＭ）阳性细胞（Ｉｔｏ细胞）。实验组ＤＭ阳性细胞α５β１表达增强，１０周时达高峰。ＦＮ的变化与之同步。（２）实验组肝组织ＦＮ、α５和β１ｍＲＮＡ含量增高，峰值在第６周；离体Ｉｔｏ细胞三种ｍＲＮＡ含量实验组高于对照组。结论结果提示：Ｉｔｏ细胞表达α５β１，肝纤维化时Ｉｔｏ细胞的激活，可导致ＦＮ、α５和β１ｍＲＮＡ表达增强，应用Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ印迹杂交技术检测ＦＮ及其受体ｍＲＮＡ的表达，从基因水平了解Ｉｔｏ细胞激活和增生状态，能更敏感地反映肝纤维化的发展倾向。     

CPGL的基因结构及其与肝癌相关性的研究

目的 克隆carboxypeptidase of glutamate like(CPGL)全长cDNA，初步探讨它在肝癌发生发展中的作用。方法 通过5’-RACE方法和RT-PCR验证，确定(CPGL)全长序列，根据其全长与人类基因组的比较进而确定基因的染色体定位和其外显子、内含子；应用Western Blot方法检测CPGL在肝癌组织和癌旁组织中的表达；细胞克隆形成及生长曲线检测CPGL对肝癌细胞生长的影响。结果 CPGL全长2616bp，编码475个氨基酸的蛋白，染色体定位于18q22.3，蛋白产物定位于细胞质中，Western Blot结果发现CPGL在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织。将CPGL转染肝癌细胞系SMMC7721发现其具有抑制生长的作用。同源比较发现CPGL含有M20蛋白酶家族的保守功能域。结论 上述发现表明CPGL是具有潜在抑癌作用的基因。