异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤肥大时骨架蛋白的变化及意义

目的复制异丙肾上腺素(isoproteronol,Iso)致大鼠心肌损伤及肥大模型,观察细胞骨架蛋白微管蛋白(tubulin)、结蛋白(desmin)变化特点,探讨心肌支持蛋白在心肌肥厚过程中的关系和变化规律,为抑制心室肥厚的发生和发展提供实验依据。方法①将雄性Wistar大白鼠随机分成对照组和损伤肥大组(Iso组)。Iso组皮下多点注射中等剂量Iso,建立大鼠损伤、代偿性肥厚模型。②光镜观察心肌组织的病理变化。③RT-PCR法检测tubulin、desminmRAN表达。④免疫组化法检测tubulin、desmin蛋白表达。结果光镜下Iso组心肌组织有明显的损伤肥大及纤维化,tubulinmRNA(0.9252±0.3765)和desminmRNA(1.2453±0.5326)表达与对照组(0.6846±0.2372)和(0.7142±0.1416)比较明显升高,差异有统计学意义(t=2.3258,P<0.05;t=4.0972,P<0.01)。Iso组tubulin(0.75±0.32)和desmin(0.85±0.29)蛋白表达与对照组(0.56±0.25)和(0.64±0.31)比较,差异也有统计学意义(t=2.5627,P<0.05;t=2.7544,P<0.01)。结论Iso致大鼠心肌损伤肥大时,tubulin、desmin无论在蛋白水平,还是在基因水平都增加,提示异丙基肾上腺素对大鼠心肌tubulin、desmin蛋白水平和基因水平的影响是平行、一致的。     

克山病患者心肌组织细胞凋亡及结构蛋白Desmin异常表达的研究

目的探讨细胞凋亡及结构蛋白Ｄｅｓｍｉｎ异常表达与亚急型、慢型克山病的关系。方法应用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）及免疫组化技术在亚急型和慢型克山病患者心肌石蜡包埋组织切片上进行细胞凋亡及Ｄｅｓｍｉｎ双重荧光染色,并应用共聚焦显微镜观察结果。结果克山病患者心肌组织中可见结构蛋白Ｄｅｓｍｉｎ的异常荧光染色及细胞凋亡,有Ｄｅｓｍｉｎ荧光染色变浅甚至消失,慢型克山病多表现为染色增强,或呈团状聚集于心肌细胞中间,或呈块状附于细胞膜下。凋亡细胞多见于有Ｄｅｓｍｉｎ异常改变的心肌细胞、浸润的炎细胞、血管内皮细胞及一些间质细胞。结论细胞凋亡与结构蛋白Ｄｅｓｍｉｎ异常参与克山病的发生与发展。     

子宫颈鳞状细胞癌组织中细胞凋亡及相关调控基因蛋白的表达

目的：通过对细胞凋亡及部分相关蛋白表达进行检测,探讨子宫颈鳞状细胞癌组织中凋亡细胞的调控机制。方法：应用原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和双重免疫荧光染色技术对正常子宫颈及不同分化程度的鳞状细胞癌组织中凋亡细胞和Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２、ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白表达进行检测,利用共聚焦显微镜观察结果。结果：ＴＵＮＥＬ法检测发现,每例标本均有不同程度的细胞凋亡,但数量及分布区域不完全相同,低分化鳞状细胞癌凋亡细     

子宫颈鳞状细胞癌细胞外间质改变的免疫荧光抗体法研究

目的：通过对细胞外间质 ECM 成分进行检测，探讨间质重构与子宫颈鳞状细胞癌侵袭性生长及播散的关系。方法：应用双重免疫荧光染色技术和激光共聚焦显微镜观察，对正常人及不同分化程度的子宫颈鳞状细胞癌患者的子宫颈石蜡包埋组织切片纤维结合素 FN、层粘连蛋白 LN 及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白的表达进行检测。结果：正常子宫颈组织中，ECM内可见结构致密的Ⅰ、Ⅲ型胶原和细条索状的FN蛋白表达，Ⅳ型胶原和LN蛋白主要呈线状分布于基底膜内。子宫颈鳞状细胞癌组织中，Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原降解，尤以后者为著，表现为Ⅰ、Ⅲ型胶原结构稀疏，排列紊乱，基底膜内Ⅳ型胶原的线状荧光减弱、断裂甚至缺失，间质和癌细胞浆内FN和LN蛋白表达增多，胶原的降解和FN、LN表达与癌细胞分化程度负相关。结论：子宫颈鳞状细胞癌，间质胶原降解，基底膜断裂，FN及LN表达增多，ECM重构，其程度与癌细胞分化程度呈负相关。     

子宫颈鳞状细胞癌细胞外间质改变的免疫荧光抗体法研究

目的：通过对细胞外间质（ＥＣＭ）成分进行检测,探讨间质重构与子宫颈鳞状细胞癌侵袭性生长及播散的关系。方法：应用双重免疫荧光染色技术和激光共聚焦显微镜观察,对正常人及不同分化程度的子宫颈鳞状细胞癌患者的子宫颈石蜡包埋组织切片纤维结合素（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白的表达进行检测。结果：正常子宫颈组织中,ＥＣＭ内可见结构致密的Ⅰ、Ⅲ型胶原和细条索状的ＦＮ蛋白表达,Ⅳ型胶原和ＬＮ蛋白     

NO与小鼠病毒性心肌炎心肌损伤的关系

目的 嗜鼠心肌Ｃｏｘａｃｋｉｅ Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）可诱导ＢＬＡＢ／Ｃ小鼠病毒性心肌炎（ＶＭＣ）。探讨自由基一氧化氮（ＮＯ）与ＶＭＣ心肌损伤的关系。方法 给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种０．１ｍｌ１００ＴＣＤ５０ＣＶＢ３ｍ,感染后分批断脊处死小鼠。应用双重荧光染色技术、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和共聚焦显微镜对小鼠心肿中细胞凋亡、ＮＯ相关合成酶（ＮＯＳ１、ＮＯＳ２和ＮＯＳ３）及其降解产物（Ｎｉｔｒｏ     

小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡相关蛋白的表达

目的 探讨嗜鼠心肌Ｃｏｘｓａｃｋｉｅ Ｂ３病毒（ＣＶＢ３ｍ）诱导的ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠病毒性心肌炎（ＶＭＣ）细胞凋亡的机制。方法 给ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠腹腔接种０．１ｍｌ１００ＴＣＤ５０ＣＶＢ３ｍ，感染后批断脊处死小鼠，应用双重荧光染色技术、原位末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和共聚焦显微镜对小鼠心肌细胞凋亡及部分相关蛋白表达进行检测。结果 ＣＶＢ３ｍ可诱发小鼠ＶＭＣ。感染病毒后９～１２ｄ病变达到高峰，检出率达１     

收缩和骨骼蛋白在培养LAM细胞的免疫组化学研究

目的 从形态学上判定淋巴管肌脂瘤病（Ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｌｅｏｍｙｏａｓｔｏｓｉｓ,ＬＡＭ）细胞与平滑肌细胞的关联性。方法 用荧光抗体染色法和激光共焦显微镜观察收缩蛋白在ＬＡＭ细胞的分布。结果 α平滑肌肌动蛋白（α－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ａｃｉｔｎ,α－ＳＭＡ）、平滑肌肌球蛋白重键（ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ｍｙｏｓｉｎ ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎｓ,ＳＭＨＣ）、结蛋白（ｄｅｓｍｉｎ）和非肌性