姜黄素对骨髓瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及其机制研究

 目的：探讨姜黄素对骨髓瘤细胞迁移侵袭能力的影响及其机制。方法：shRNA表达质粒沉默含IQ模序的RasGTP酶活化蛋白1(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)后转染RPMI8226细胞,Western blotting法检测RPMI8226-shIQGAP1组、RPMI8226-shRNA阴性对照组和未转染RPMI8226组细胞IQGAP1表达;不同浓度姜黄素作用于各组细胞后,Transwell迁移实验和Matrigel侵袭实验检测细胞的迁移及侵袭力,RT-PCR法检测姜黄素作用后IQGAP1 mRNA的表达,Western blotting检测姜黄素对各组细胞IQGAP1蛋白表达的影响。结果：使用shRNA表达质粒沉默IQGAP1后,RPMI8226细胞IQGAP1表达减少;RPMI8226-shIQGAP1组较RPMI8226-shRNA 阴性对照组和未转染RPMI8226 组细胞迁移及侵袭力下降,姜黄素可降低RPMI8226-shRNA 阴性对照组和未转染RPMI8226组细胞迁移及侵袭力,无浓度相关性,不同浓度的姜黄素对RPMI8226-shIQGAP1组作用后细胞的迁移及侵袭力无明显变化。对于RPMI8226-shRNA阴性对照组及未转染RPMI8226组,姜黄素作用后IQGAP1 mRNA及蛋白的表达下降。结论：姜黄素通过抑制IQGAP1的表达降低骨髓瘤细胞的迁移力和侵袭力。     

重组腺相关病毒介导的人凝血因子Ⅸ基因在人／鼠结肠癌上皮细胞中的表达

目的：探讨重组腺相关病毒／人凝血因子Ⅸ基因（rAAV-2／hFⅨ）在人／鼠结肠癌上皮细胞（SW480／C26细胞株）中的表达。方法：重组腺相关病毒／绿色荧光蛋白（rAAV-2／GFP）感染SW480／C26细胞，在荧光显微镜下观察GFP的表达，计算转染率。rAAV-2／hFⅨ感染SW480／C26细胞，检测hFⅨ基因、FⅨAg量及hFⅨ活性的表达。结果：SW480细胞株／C26细胞株GFP48hr阳性率分别为（57．0±8．5）％和（48．0±5．7）％；转导组14d和21d均可见外源hFⅨ的cDNA片断。SW480细胞转导了rAAV-2／hFⅨ后在第2天和第21天ELISA法测hFⅨ抗原量分别为（98．0±4．3）和（30．9±6．5）ng·10^6cell^-1·24h^-1。未转导组为（2．7±0．1）ng·10^6cell^-1·24h^-1。C26细胞转导了rAAV-2／hFⅨ后在第2天测hFⅨ抗原量为（78±5．12）ng·10^6cell^-1·24h^-1。未转导组为（2．9±0．1）ng·10^6cell^-1·24h^-1。hFⅨ活性与hFⅨ抗原浓度明显相关。较对照组亦显著增高。结论：rAAV-2／GFP能有效地转导SW480／C26细胞。rAAV-2／hFⅨ能有效地转导SW480／C26细胞并表达具有凝血活性的功能蛋白hFⅨ。     

177例首发于淋巴结外非霍奇金淋巴瘤的临床分析

目的分析177例首发于淋巴结外非霍奇金淋巴瘤的临床特点,以加深对该病的认识.方法收集177例患者首发于淋巴结外非霍奇金淋巴瘤类型、临床表现、实验室检查、治疗情况等方面的数据,并评估其预后.结果全身各脏器均可发生PENL,发病率依部位不同.平均生存期与治疗方法密切相关.结论临床医师应重视对该病的认识、诊断与治疗.     

层流床预防初治急性白血病患者医院感染的成本效益分析

目的研究层流床预防初治急性白血病患者医院感染的成本效益,为层流床临床推广应用提供理论参考。方法采用队列研究方法,将67例初治急性白血病患者分为观察组和对照组;观察组患者入住层流床,对照组患者住普通病室接受常规护理与治疗;追踪观察2组患者的住院天数、医院感染次数及部位、住院医疗费用、直接非医疗费用和间接费用等;运用计量经济分析方法,分析患者疾病经济负担以及层流床的效益成本比。结果观察组患者感染率、感染次数以及住院天数均显著低于对照组的患者;观察组的医院感染率为64.7%,对照组为90.9%(P=0.01);观察组的呼吸道感染发生率低于对照组(P=0.009);观察组的住院日(45.5±10.6)d较对照组的住院日(51.2±7.5)d缩短(P=0.015);住层流床患者的疾病经济负担比对照组患者降低了1.29万元,实施层流床的效益成本比为1.24。结论初治急性白血病患者入住层流床,不仅可以产生良好的临床效果,而且节约费用。     

CD19-CART治疗复发难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤的有效性及安全性

目的：探讨CD19-嵌合抗原受体T细胞（CART）治疗复发难治性B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）的有效性及安全性。方法：评估2017年4月至2018年10月接受CD19-CART治疗的10例B-NHL患者的近期、远期随访疗效及不良反应。结果：10例患者均为复发、难治性淋巴瘤。10例患者输注CD19-CART后，总完全缓解（CR）率为30%，部分缓解（PR）率为40%，总有效率为70%。全部患者外周血中均检测到CD19-CART细胞的体内增殖，持续约3个月后快速下降。中位随访时间为9（1～24）个月。所有患者中位生存期（OS）为（10.5±4.0）个月，中位无进展生存期（PFS）为（4.6±3.9）个月。共8例患者输注CART后发生不同程度的细胞因子释放综合征（CRS），其中5例为1级CRS，2例为2级CRS，仅1例发生4级CRS及神经毒性。2例使用IL-6受体单克隆抗体-托珠单抗，其中1例联合使用糖皮质激素。除1例4级CRS患者输注后第18天因神经毒性死亡外，其余患者CRS均得到有效控制。结论：针对B-NHL的CD19-CART疗法取得了一定的疗效，其可作为复发难治患者的挽救治疗，且不良反应可控。及时地监测及管理输注期的不良反应有助于防止不可控结局的发生。     

慢性肾功能衰竭并发急性胰腺炎23例临床分析

目的探讨慢性肾功能衰竭并发急性胰腺炎时的临床特点及发病机制。方法回顾分析中南大学湘雅二院1998-01~2004-05共23例患者的临床资料。结果慢性肾功能衰竭并发急性胰腺炎时,部分患者临床表现不典型;患者系统并发症及病死率高,预后差。结论临床医师应重视对该病的认识、诊断与治疗,并应进一步加强对该病发病机制的研究。     

多发性骨髓瘤患者继发败血症的危险因素分析

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者化疗后败血症的危险因素,以期临床早期预防。方法选择1997年1月-2012年10月血液科住院的MM患者,其中败血症患者42例为研究组,另从同期住院无败血症的MM患者中随机抽取57例作为对照组,对继发败血症的危险因素进行分析,采用法国生物梅里埃公司VITEK-AMS60全自动分析仪进行菌种鉴定,采用GNS-120药敏卡进行最低抑菌浓度(MIC)测定,采用SPSS16.0软件对数据进行处理。结果败血症患者发热42例、畏寒31例、寒颤23例,分布率分别为100.00%、73.81%、54.76%;单因素分析显示,血清白蛋白<30g/L、肾功能不全、骨髓瘤未缓解、血清β-微球蛋白≥3.5mg/L与MM患者败血症发病显著相关(P<0.001);多因素logistic回归分析显示,血清白蛋白<30g/L(OR=3.621)、肾功能不全(OR=3.075)与多发性骨髓瘤患者败血症发病呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);而骨髓瘤达缓解状态(CR/PR)(OR=0.074)与MM患者败血症发病呈负相关(P<0.05);败血症患者共分离出42株病原菌,革兰阳性菌12株,占28.57%,革兰阴性菌25株占59.53%,真菌5株占11.90%。结论血清白蛋白<30g/L、肾功能不全是MM患者发生败血症的重要因素,而骨髓瘤达缓解状态是MM患者发生败血症的保护因素,医师应关注MM患者发生败血症的危险因素,早期给予积极治疗。     

丙戊酸钠对RPMI8226和U266细胞增殖及IL-6/JAK/STAT信号通路的影响

 目的：探讨丙戊酸钠(valproic acid sodium, VPA)对人骨髓瘤RPMI8226和U266细胞增殖及IL-6/JAK/STAT信号通路的作用。方法： RPMI8226和U266细胞经不同浓度VPA处理12及24 h后进行实验,MTT法检测VPA对细胞增殖的影响,流式细胞术检测VPA处理后的细胞周期及凋亡率,ELISA法检测培养细胞上清IL-6的浓度,半定量RT-PCR检测VPA作用后RPMI8226和U266细胞中STAT3、STAT5、Bcl-xL、Mcl-1、c-Myc、CCND1和VEGF mRNA表达水平。Western blotting检测JAK2和STAT5总蛋白及磷酸化蛋白表达水平。结果：(1) 10、20及40 μmol/L VPA处理RPMI8226和U266细胞12 h及24 h后,细胞存活率值显著下降,与各对照组比较均有显著差异（P<0.05）,各对照组之间无显著差异。(2) VPA处理RPMI8226和U266细胞 24 h后,G1/G0期细胞增多,S期细胞减少,细胞凋亡率增加,且凋亡率与VPA的作用剂量相关。(3) VPA处理RPMI8226和U266细胞24 h后,上清IL-6浓度与VPA浓度呈负相关。(4) RPMI8226和U266细胞组在40 μmol/L VPA处理后其STAT3、STAT5、Bcl-xL、Mcl-1、c-Myc、CCND1和VEGF mRNA表达减低,与未处理组比较有显著差异。(5) 与对照组比较,VPA处理组p-JAK2、JAK2、p-STAT5和STAT5蛋白表达均显著降低。结论：(1) VPA对多发性骨髓瘤细胞有体外抑制作用; (2) VPA对骨髓瘤细胞株的体外抑制可能是通过调节IL-6/JAK/STAT信号通路来实现的。     

深静脉血栓形成:54例临床分析

目的探讨深静脉血栓(DVT)发生的危险因素及预防。方法回顾分析了我院2002年1月～2004年7月收治的下肢DVT 54例。结果42例患者有明确的发病危险因素，50例病人经彩色多普勒诊断，1例经手术治疗，余抗凝溶栓治疗，均治愈或好转出院。结论导致DVT的危险因素很多，预防危险因素和早期诊治是治疗成功与否的关键。     

白藜芦醇诱导K562／AO2凋亡与mdr1基因表达的关系

目的研究白藜芦醇（Res）体外对K562／AO2增殖及凋亡的影响，并探讨与耐药基因mdr1表达的关系。方法用噻唑蓝比色法（MTT）检测对照组、不同剂量Res组（25～200μmol／L）作用48h后K562／AO2增殖率，用流式细胞仪检测各组凋亡率，并用逆转录-聚合链反应（RT—PCR）法检测各组mdr1 mRNA的表达。结果Res体外对人K562／AO2细胞有显著增殖抑制及凋亡诱导作用，Res组（25μmol／L、50μmol／L、100μmol／L、200μmol／L）作用48h后其凋亡率均显著高于对照组（P〈0．05）；mdr1 mRNA表达相对强度均显著低于对照组（P〈0．05），且随浓度增加而表达减弱。结论Res体外能诱导K562／AO2细胞的凋亡，且呈一定的浓度依赖性，其作用机制可能与逆转mdr1 mRNA基因表达有关。