从心论治方改善ApoE--/--小鼠动脉粥样硬化及上调ACE2蛋白表达

目的 探讨从心论治方（CXLZF）对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化（AS）损伤的作用机制。方法 采用高脂饮食喂养ApoE-/-小鼠12周建立AS模型,随机分为模型组,CXLZF低（4.5 g·kg-1·d-1）、中（9 g·kg-1·d-1）、高（18 g·kg-1·d-1）剂量组,辛伐他汀（5 mg·kg-1·d-1） 组,同时以普通饮食喂养C57BL/6小鼠作为对照组,6只/组。各组小鼠给予相应药物灌胃,对照组、模型组灌胃等体积生理盐水,干预12周。分别采用油红O、Masson、HE染色法观察斑块及肝脏病变情况,检测血脂、血糖及肝功指标;Western blotting法检测血管紧张素转换酶2（ACE2）、E-选择素（E-selectin）蛋白表达,免疫荧光法对ACE2蛋白表达进行定位。在体外,以CXLZF灌胃SD大鼠制作含药血清、生理盐水灌胃大鼠制作对照血清后,采用100 μg/m L ox-LDL干预人脐静脉内皮细胞（HUVECs）建立细胞损伤模型,CXLZF含药血清（5%、10%、20%）干预人脐静脉内皮细胞,对照组、模型组细胞给予10%对照血清。检测细胞ACE2表达。结果 CXLZF低、中、高剂量干预均有效缩小AS小鼠主动脉斑块面积,增加斑块稳定性;同时,CXLZF干预显著降低AS小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平（P<0.05）,高剂量组降脂效果最佳;CXLZF干预还可降低AS小鼠血清天门冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶含量（P<0.05）、改善肝脏脂肪变性。CXLZF干预显著上调AS小鼠主动脉ACE2、下调E-selectin表达（P<0.05）。细胞实验中,CXLZF含药血清（5%、10%、20%）显著上调氧化低密度脂蛋白干预人脐静脉内皮细胞的ACE2表达（P<0.05）。结论 CXLZF可有效减轻小鼠AS损伤,可能与调控ACE2蛋白有关。     

定心方Ⅳ上调ACE2减轻人脐静脉内皮细胞损伤机制

目的 研究由黄连、丹参、酸枣仁、灵芝组成的定心方Ⅳ(Dingxin Recipe Ⅳ，DXR Ⅳ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的作用机制。方法 正常培养HUVECs并随机分为5组，分别予以空白血清及定心方Ⅳ含药血清5%、10%、20%进行预处理4 h，再采用50μg·mL^-1 ox-LDL诱导细胞损伤。采用CCK-8法观察HUVECs增殖情况；Western Blotting和q PCR法检测血管紧张素转换酶2(ACE2)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和E选择素(E-selectin)等蛋白和基因的表达；ELISA法检测细胞上清中白细胞介素6(IL-6)水平。采用miR-421 mimics干预细胞，分别检测相关蛋白及基因表达情况。结果 定心方Ⅳ中剂量组可抑制IL-6分泌(P<0.01)；同时，定心方Ⅳ可促进血管紧张素(1-7)、ACE2基因表达，抑制E-selectin、VCAM-1、MMP-9、ICAM-1、miR-421基因表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001)；...