养胃颗粒中NF-κB靶标介导的治疗胃溃疡成分的筛选与评价研究

目的筛选养胃颗粒中影响NF-κB靶标治疗胃溃疡的化学成分,并建立基于上述成分的质量评价方法。方法采用NF-κB质粒转染的RAW264.7细胞株,给药、孵育后使用PCR进行扩增和表达,测定荧光值以评价各化学成分对NF-κB靶标的影响;再以筛选所得成分为指标,采用LC-MS法进行多指标含量测定研究,色谱柱为Agilent SB C18(100 mm×2.1 mm,2.7μm),使用0.1%甲酸-乙腈作为流动相,梯度洗脱,ESI模式同时进行正负离子扫描,离子对为毛蕊异黄酮葡萄糖苷786/425,三七皂苷R1为945/925,共测定10批养胃颗粒。结果养胃颗粒的7个成分中,毛蕊异黄酮葡萄糖苷和三七皂苷R1具有较好的NF-κB靶标激动活性,在10批颗粒中,毛蕊异黄酮葡萄糖苷的平均含量为0.834 mg/g,三七皂苷R1的平均含量为0.512 mg/g。结论养胃颗粒中,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、三七皂苷R1是通过NF-κB靶标治疗胃溃疡的活性成分,本研究以上述成分为指标建立LC-MS质量评价方法,具有准确、高效、贴近功效主治的特点。     

高效液相色谱法测定胃炎颗粒中的去甲异波尔定和橙皮苷

目的 建立同时测定胃炎颗粒中两种指标性成分的方法,用于胃炎颗粒成品的质量控制和评价;方法 使用高效液相色谱法,对胃炎颗粒成品中去甲异波尔定和橙皮苷进行同时测定;色谱柱选择Waters XBridge C18(250×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2％甲酸,梯度洗脱,程序为:0～15 min,10％～2...     

桂龙凝胶膏剂抗风湿活性成分的筛选及质量控制研究

目的:观察桂龙凝胶膏剂对大鼠血清中NF-κB、TNF-α、IL-1β浓度的影响,筛选出调控作用最为显著的化合物并进行质量标准研究.方法:制备大鼠类风湿性关节炎(RA)模型,分别给予相同治疗量的桂龙凝胶膏剂和不同单体化合物溶液,取血,采用Western-Blot法和酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠血清中NF-κB、TNF-α、IL-1β水平,根据不同组别上述指标的变化,确定桂龙凝胶膏剂中起调控作用的成分.质量标准研究采用HPLC法,以Agilent Eclipse XDB C18为色谱柱,以乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)为流动相,流速1.0mL/min,柱温25℃,检测波长:235nm.结果:血清指标测定结果表明,乌头碱、新乌头碱和桂皮醛对NF-κB、TNF-α、IL-1β水平影响最为显著;质量标准研究中,三种成分分离度符合要求,方法精密度、准确度、稳定性和回收率良好,10批桂龙凝胶膏剂样品含量测定结果显示,三种有效成分含量的RSD分别为4.60%、3.54%和8.80%.结论:本研究通过测定NF-κB、TNF-α、IL-1β水平,更有针对性地对桂龙凝胶膏剂中与功效相关的活性成分进行筛选和质量控制,为基于活性成分导向的质量标准和指纹图谱研究提供了参考.     

HPLC法同时测定通脉方中三种活性成分

目的 建立基于HPLC法的通脉方中三种化合物的同时测定方法,为活性导向的中药质量控制奠定基础.方法 采用高效液相色谱法,以Agilent Eclipse XDB C18为色谱柱,以乙腈(A)-0.05%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,梯度程序为:0~10min,5%~15% A;10~20min,15%~20% A;20~40min,20%~30% B;40~50min,30%~40% A;50~60min,40%~5% A;流速1.0mL·min-1,柱温26℃,检测波长:254nm.结果 ,毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量在24.19~38.06μg·mL-1、水仙苷在108.08~153.59μg·mL-1、巴马汀在19.52~31.51μg·mL-1之间,线性范围r2在0.9991~0.9993之间,精密度0.14%~0.17%,稳定性0.001%~0.010%,回收率97.82%~103.65%,10批通脉方供试品的HPLC指纹图谱相似度为0.87.结论 该方法快速、高效、准确,针对性强,能够基于功效主治对通脉方进行质量评价研究.     

中药代替或部分代替激素治疗的探讨

目的 激素在门诊中被广泛应用,产生治疗作用的同时也带来许多严重的副作用.因此考虑是否可以用中药代替或部分代替激素治疗及对抗其副作用,以达治疗目的 并缩短病程,提高患者的生活质量.方法 通过收集和分析应用激素治疗的门诊患者的处方,以及全程跟踪1～2例门诊应用激素治疗的患者配合中药以及中医疗法的治疗过程;结果了解门诊中激素的使用比例,及根据跟踪病历药历比较单用激素和激素联用中药两者之间的优劣;结论中药能够部分代替激素治疗.     

桔梗皂苷D的大鼠血浆药代动力学研究

目的:研究桔梗皂苷D在大鼠体内的运动过程。方法:动物实验选用SD大鼠,口服给以桔梗水提液,在24h内按时间点取血;药代动力学研究以桔梗皂苷D为检测指标,采用高效液相色谱法,使用PhenomenexC18色谱柱(100×4.6mm,5μm),乙腈:0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,进样量10μL,柱温30Ⅳ,检测波长203nm。结果:桔梗皂苷D的药代动力学参数为,T_(max)=0.69±0.44,C_(max)=21.819±1.16,AUC_((0-τ))=44.132±0.67,MRT=2.00±0.75,CL=228±0.80。结论:桔梗皂苷D的口服达峰时间较快,生物利用度较低,但已达到发挥提高其它药物疗效所需浓度。     

高效毛细管电泳测定全蝎中牛磺酸的含量

目的:对全蝎中的牛磺酸进行含量测定,以建立活性导向的指纹图谱。方法:采用高效毛细管电泳(HPCE)法,使用熔融硅胶毛细管柱(75μm i.d.,总长50cm,有效长度40cm),以10mmoL硼酸钠(pH9.0)为缓冲液,以牛磺酸为指标,对全蝎20%乙醇超声提取液进行含量测定并分析各批次药材中该成分的含量。结果:方法线性、精密度、准确度和样品稳定性良好;6批全蝎药材中,牛磺酸的平均含量为7.783mg/g。结论:该方法快速、准确、高效,可作为全蝎的质量控制方法。     

UHPLC-MS法测定淫羊藿中两种抗阿尔茨海默症活性成分

目的:对淫羊藿提取液中两种抗阿尔茨海默症(AD)成分进行LC-MS含量测定,建立基于活性成分的质量控制方法.方法:对淫羊藿提取液进行UHPLC-MS分析,色谱柱为Agilent SB C18(2.1mm×100mm,2.7μm)柱,流动相采用乙腈-5mmol乙酸胺水溶液(40:60,v/v),测定淫羊藿苷和2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,采用ESI离子源,检测离子对分别为677/369和405/243.结果:10批淫羊藿药材中,淫羊藿苷的平均含量为0.6407mg/g,2,3,4,5-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷平均含量为0.3512mg/g.结论:该方法快速、灵敏、准确,适宜用于对淫羊藿进行活性导向的多指标质量控制.     

柴胡标准汤剂的制备及其质量评价研究

目的:寻找柴胡标准汤剂的最佳制备方法。方法:通过优化制备过程中的各关键参数,如溶剂/物料比、提取时间、提取温度等参数,同时建立柴胡标准汤剂含量测定方法及特征图谱,以柴胡皂苷A含量及特征谱图峰数、峰面积等参数为指标,筛选出最优制备工艺。结果:采用溶剂/物料比为20:1的水为提取溶剂,提取温度120°C,煎煮时间60min×2次,并采用冷冻干燥时,所得柴胡标准汤剂含量及特征图谱最优。结论:本研究所采用方法准确、全面、高效,能够快速筛选出最优的柴胡标准汤剂制备方法并给出可量化的质量评价信息。