甘草素在体外不同种属肝微粒体中的代谢差异研究

目的对甘草苷的苷元甘草素在体外不同种属肝微粒体中的代谢差异进行比较研究,为甘草苷的进一步研究开发提供参考依据。方法甘草素与不同种属,包括大鼠、小鼠、人、犬及猴的肝微粒体进行孵育,比较其代谢稳定性和代谢转化情况。代谢稳定性通过底物消除法分析甘草素的剩余底物浓度水平随时间的变化,计算体外消除半衰期(t1/2)。进一步对甘草素在肝微粒体孵育后生成的代谢产物谱以及代谢途径进行分析。结果在I相肝微粒体孵育体系中,甘草素在5个种属肝微粒体中发生代谢的t1/2依次为大鼠小鼠人猴犬;在II相肝微粒体孵育体系中,甘草素代谢都非常快,除小鼠外,均在5 min内下降50%以上。甘草素与人肝微粒体进行II相孵育产生的代谢产物谱和猴的相同,其余种属则与人有明显不同。结论甘草素在猴肝微粒体中的代谢稳定性和代谢产物谱均与人最相似,其次为犬肝微粒体,大鼠和小鼠则与人存在明显差异。在进一步的临床前药代和毒理研究中可选用猴或犬作为模型动物。     

配戴RGPCL后水平彗差的变化及其与瞳孔中心位移的关系

目的分析RGPCL配戴前后,全眼球和角膜像差的变化情况以及与瞳孔中心位移之间的关系。方法前瞻性病例自身对照研究。21例志愿者（42眼）,平均年龄（26.7±4.1）岁,平均屈光度（-3.59±1.36）D,散光度（-0.67±0.24）D;用鹰视角膜地形图测量瞳孔中心相对于角膜中心的偏移量、瞳孔直径以及角膜像差,鹰视波前像差仪测量裸眼的全眼球像差。然后由同一名视光师给予验配美尼康RGPCL,在配戴RGPCL 1个月后回访,用相同仪器分别测量戴镜时的瞳孔中心偏移、瞳孔直径、角膜像差和全眼球像差。统计分析6 mm直径下的前4阶14项波前像差。采用配对t检验和相关分析对数据进行分析。结果配戴RGPCL 1个月后,双眼瞳孔中心向颞侧水平偏移,瞳孔直径轻微增大,其变化量如下：?譹?訛水平位移：右眼戴前为（-0.067±0.141）mm,戴后（-0.103±0.129）mm（t=2.240,P＜0.05）;左眼戴前为（0.059±0.159）mm,戴后（0.114±0.132）mm（t=-3.371,P＜0.01）。?譺?訛瞳孔直径：戴前为（3.69±0.61）mm,戴后为（3.91±0.49）mm（t=-2.865,P＜0.01）。角膜和全眼球的水平彗差变化均有统计学意义：?譹?訛角膜水平彗差减少,右眼戴前为（-0.104±0.075）μm,戴后（0.019±0.050）μm（t=-5.697,P<0.01）,左眼戴前为（0.127±0.074）μm,戴后（-0.001±0.079）μm（t=5.113,P<0.01）;?譺?訛全眼球水平彗差增加,右眼戴前为（0.012±0.072）μm,戴后（0.097±0.054）μm（t=-5.291,P<0.01）;左眼戴前为（-0.038±0.071）μm,戴后（-0.099±0.051）μm（t=4.378,P<0.01）。在这些有变化的参数中瞳孔中心水平位移分别与角膜和全眼球水平彗差差值呈负相关（r=-0.583、-0.534,P<0.01）;并且瞳孔中心水平位移与瞳孔直径的改变有较大相关性（r=0.501,P<0.01）。结论配戴RGPCL后,瞳孔中心发生颞侧向的水平位移,从而角膜和全眼球水平彗差也相应改变,原来的角膜和眼内彗差的互补平衡被打破。瞳孔直径的轻微增加可能是造成此种改变的原因之一。     

甘草苷体内暴露特征及体外跨膜转运机制研究

目的总甘草素是甘草苷在体内的主要暴露形式,对两者在大鼠体内暴露特征及体外跨膜转运机制进行研究,为以甘草苷单体为新药的进一步开发提供依据。方法采用LC-MS/MS分析方法测定大鼠给药后不同时间点血浆样品中的总甘草素浓度,并应用WinNonlin.6.3软件采用非房室模型的统计矩法计算药代动力学参数;同时测定大鼠ig给药后组织匀浆中的浓度,考察不同类型甘草素在各组织中的暴露特征;应用体外MDCK-MDR1细胞模型,研究甘草苷、甘草素的跨膜转运能力及其机制。结果 ig给药后在大鼠体内,甘草苷不呈线性动力学特征;血浆和大部分组织中主要以甘草素的II相结合产物存在,肝、子宫、卵巢、胃和肠组织中主要为游离甘草素;总甘草素暴露量排序为肠血浆肝肾肺胃子宫卵巢脂肪心脾肌肉睾丸,且不易产生组织蓄积现象;甘草素跨膜转运能力较甘草苷良好,且均不是P-gp转运体的底物。结论甘草苷不呈线性动力学吸收特征;甘草素在组织中暴露特征表现为不同组织中甘草素的存在形式和分布程度差异较大,总甘草素不易产生组织蓄积现象;两者均为被动扩散跨膜转运方式。     

硬性透气性角膜接触镜的形变与角膜形态的关系

目的 探讨硬性透气性角膜接触镜(RGPCL)在眼表面的形状稳定性及角膜形态对其的影响.方法 22名志愿者42只眼,用鹰式角膜地形图测量角膜像差后给予验配RGPCL,同样仪器测量RGPCL的像差后派发给志愿者,连续配戴1个月后回访,分别测量戴镜状态下以及摘镜30 min后的角膜地形图.采用配对t检验、W检验及相关分析对数据进行分析.结果 RGPCL戴到眼表面后,主要表现为离焦C4增加,右眼为离体(1.003 ±0.131) μm,在体(1.065 ±0.160) μm(P =0.015);左眼为离体(1.003±0.130) μm,在体1.069(0.851,1.594)μm,(P =0.017),水平/垂直散光C5变负,右眼为离体(0.072±0.083) μm,在体(-0.312 ±0.232)μm(P＜0.001);左眼为离体(0.066±0.056) μm,在体(-0.349±0.242)μm(P＜ 0.001),以及球差C12增加,右眼为离体(0.264±0.039)μm,在体(0.295±0.048) μm (P＜0.001);左眼为离体(0.266±0.035) μm,在体0.290(0.215,0.471) μm(P ＜0.001).角膜像差在戴镜前后发生改变的像差项有C4,C5,C7和C8等.在体RGPCL像差C4、C5、C12均与相应的戴镜前角膜像差呈正相关(右眼:r=0.557、0.596、0.581,P＜0.01,左眼:r=0.684、0.497、0.543,P＜0.01).结论 RGPCL戴在眼表面后,镜片前表面有一定程度的变平,球差增加,并且出现趋向于角膜的散光.RGPCL的配适不宜过于平坦.     

Pentacam分析仪测量近视眼患者角膜厚度及影响因素分析

目的使用Pentacam眼前节分析系统测量近视患者角膜中央最薄点厚度,并探讨与A型超声角膜测厚仪测量结果的差异及可能影响因素。方法对预行准分子激光角膜手术的近视患者150例(300眼),分别采用Pentacam系统及A型超声角膜测厚仪测量角膜中央最薄点厚度,对测量结果进行统计学分析。结果 Pentacam、A型超声角膜测厚仪测得的中央角膜最薄点厚度平均值分别为(543.7±26.3)μm、(539.2±27.4)μm,二者高度相关(r=0.97,P=0.0001)。Pentacam测得角膜厚度值偏厚,二者差值平均(4.4±7.0)μm,差异有统计学意义(t=10.94,P=0.0001),该差值与A型超声测量角膜厚度值、年龄有关(P=0.0001),而与屈光度、性别、角膜直径、角膜曲率等无关。结论 Pentacam测量近视患者角膜厚度值略高于A型超声角膜测厚仪,尽管二者有很好的协同性,但相互间还不能完全替代。     

配戴球面与非球面设计硬性透气性角膜接触镜时全眼像差的比较

目的通过波前像差仪测量球面与非球面硬性透气性角膜接触镜（RGPCL）对全眼像差的影响。方法24例（48眼）近视患者,随机分成两组,每组12例,按照两阶段交叉设计：一组先配戴美康镜片（球面设计）,另一组先配戴美尼康镜片（非球面设计）,日戴1个月后测量戴镜时的全眼像差,之后停戴1个月,更换另一种镜片继续日戴1个月后再次测量戴镜时的像差。对配戴两种镜片时的像差值进行交叉设计的方差分析。结果配戴两种不同设计的镜片时,全眼总像差均方根（RMS）值分别为（0．439±0．183）μm和（0．42714）．190）μm,差异无统计学意义。配戴两种不同设计的镜片时,单项像差中离焦（F=56．175,P〈0．01）、垂直散光（F=4．263,P=0．029）和四叶草（F=3．410,P=0．037）的差异有统计学意义,其中配戴美尼康镜片的离焦数值高于美康,垂直散光、四叶草反之。其他各项像差值在两种镜片中差异无统计学意义。结论近视眼配戴球面及非球面设计的RGPCL时的像差值无显著差异,但非球面镜片形成的“偏负泪液镜”可造成更多的正性离焦,同时,非球面设计镜片相对球面镜片可更好地控制散光及某些高阶像差。     

小檗属植物抗糖尿病及糖尿病并发症的研究进展

小檗属植物资源丰富,药用历史悠久,可用于治疗多种疾病,其中刺檗、具芒小檗、毛叶黄耆和豪猪刺等植物的研究较为深入。小檗属植物的主要成分为生物碱类和黄酮类,研究最多的是小檗碱,其具有降血糖血脂、抗炎、抑菌等药理作用,可用于治疗糖尿病及其并发症。然而,对小檗碱的研究并不能代替对小檗属植物的研究。对小檗属植物提取物抗糖尿病及其并发症的药理作用和作用机制进行综述,为促进该属植物及其有效成分的临床应用提供理论基础。     

基于网络药理学和分子对接技术初探新加香薷饮治疗新型冠状病毒肺炎潜力的研究

目的 通过网络药理学和分子对接技术初探新加香薷饮治疗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的潜在活性成分、靶点、通路及分子机制。方法 从TCMSP数据库和文献挖掘收集新加香薷饮中的香薷、金银花、连翘、厚朴和扁豆花的化学成分,以TCMSP数据库和Swiss Target Prediction获取靶点,输入STRING数据库获取靶点对应的标准基因名,运用DAVID6.8进行GO富集、KEGG通路富集和组织富集分析,采用Cytoscape 3.8.0和R语言作图。从PDB数据库下载新型冠状病毒（SARS-CoV-2）3CL和ACE2的晶体结构,利用AutoDock Vina、Pymol和Discovery Studio软件进行分子对接。结果 从新加香薷饮中获得49个活性成分和321个靶点,发现了33条与治疗COVID-19相关的通路,包括肺病相关通路、病毒相关通路以及炎症-免疫相关通路,并发现了RELA、MAPK1、IL6、AKT1、MAPK8、TNF等6个基因可能与治疗COVID-19密切相关。通过分子对接发现金圣草黄素、绿原酸、咖啡酸、厚朴酚、和厚朴酚、麝香草酚、香荆芥酚与SARS-CoV-2 3CL和ACE2具有较高的亲和力。结论 中药治疗疾病是通过多组分、多靶点和多途径共同的结果,新加香薷饮具有治疗COVID-19的潜力。     

诃子酸在不同种属肝微粒体中的代谢稳定性和代谢酶表型研究

目的 建立测定肝微粒体孵育体系中诃子酸浓度的方法,并比较其在人、犬、猴、小鼠、大鼠肝微粒体中的Ⅰ相、Ⅱ相代谢稳定性及种属差异,确定其在人肝微粒中的代谢表型。方法 将诃子酸与不同种属肝微粒体共同孵育,应用UPLCMS/MS检测孵育液中诃子酸的含量,考察其代谢稳定性及体外动力学参数。采用化学抑制剂法确定其在人肝微粒中的代谢表型。将诃子酸与各CYP450同工酶CYP1A2、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4的特异性抑制剂（α-萘黄酮、香豆素、磺胺苯吡唑、噻氯匹定、奎尼丁、二乙基二硫代氨基甲酸钠、酮康唑）共同孵育,确定其代谢酶表型。结果 诃子酸在Ⅰ相、Ⅱ相孵育体系中均可代谢,在Ⅰ相代谢中,犬肝微粒体孵育与人最为相似,半衰期（t_1/2）分别为115.50 min和121.58 min;Ⅱ相代谢中5个种属代谢稳定性均中等,其中猴与人肝微粒体代谢趋势最为相近。诃子酸在人肝微粒中的代谢是由多种CYP酶共同介导的,其中CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4是主要的同工酶。结论 建立的UPLCMS/MS方法简便、快速、专属性强、灵敏性高,可用于肝微粒体孵育体系中诃子酸浓度的测定及体外代谢的研究。诃子酸在人、犬、猴、小鼠、大鼠肝微粒体中代谢存在一定种属差异,且其代谢过程与多种CYP酶相关。     

基于网络药理学的蒙药暖宫七味丸治疗原发性痛经作用机制及实验验证研究

目的 利用网络药理学方法,探究暖宫七味丸治疗痛经的作用机制并采用痛经模型大鼠对其进行实验验证。方法 使用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、中医药整合药理学研究平台（TCMIP）和网络药理学在线数据库（TCMID）结合文献报道确定暖宫七味丸的活性成分,通过Swiss Target Prediction在线平台得到活性成分对应的靶点。利用DisGeNET数据库和GeneCard数据库确定原发性痛经的相关靶点,手动筛选化合物-疾病的共同靶点,将潜在共同靶点蛋白上传至Biogrid平台,获取药物-疾病靶蛋白相互作用（PPI）网络,利用Cytoscape 3.7.2软件对PPI网络进行网络图优化和拓扑学分析。利用DAVID 6.8数据库对潜在靶点进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析及基因本体论（GO）注释分析。动物实验验证采用缩宫素致痛经大鼠模型观察暖宫七味丸高、中、低剂量（2.0、1.0、0.5 g·kg^-1）的镇痛作用,采用Western blotting方法观察暖宫七味丸高、低剂量（2.0、0.5 g·kg^-1）对痛经模型大鼠子宫组织环氧合酶-2（COX-2）蛋白表达的影响,并测定各组大鼠子宫组织中前列腺素F2α（PGF2α）水平。通过大鼠离体子宫肌张力实验观察暖宫七味丸水溶液（22.5、11.25 mg·mL^-1）对大鼠子宫收缩幅度和收缩频率的影响。结果 网络药理学预测结果显示,暖宫七味丸治疗痛经的潜在靶点有68个,PPI核心靶点有IL-6、PTGS2、TNF和TP53等。涉及到的通路有炎症相关的信号通路、癌症通路和雌激素信号通路等,涉及到的生物功能有炎症反应、一氧化氮的生物调节过程和对激素的反应和对血管的调节功能等。动物实验结果显示,与模型组比较,暖宫七味丸高、中、低剂量组和阳性药组大鼠的扭体反应次数显著减少（P＜0.01、0.001）,同时扭体反应的潜伏期均明显延长（P＜0.01、0.001）;暖宫七味丸高、低剂量组痛经模型大鼠子宫组织中过氧化物合成酶2（PTGS2）相关蛋白COX-2表达显著下调（P＜0.001））,同时子宫组织中PGF2α水平显著降低（P＜0.001）。暖宫七味丸高、低剂量水提液对大鼠子宫收缩幅度和频率均有显著的抑制作用（P＜0.001）。结论 暖宫七味丸可以通过下调PTGS2靶点进而调控子宫肌张力起到治疗痛经的效果。