补肾法诱导骨髓间充质干细胞定向成骨分化的研究进展

中医学认为:肾主骨,生髓。骨的生成,发育,强弱,盛衰均与肾有密切关系。众多研究表明补肾法能诱导骨髓间质干细胞定向成骨分化,骨髓间质干细胞是多能细胞,通过诱导可分化成为骨、软骨、脂肪、肌腱,这是用现代科学技术更完善地阐释补肾法的理论依据,对防治骨质疏松症,骨坏死,骨缺损等也有重大价值。     

膝骨关节炎患者血清基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1、透明质酸、脂质过氧化物含量及超氧化物歧化酶活性变化与补肾活血中药的干预

背景：补肾活血复方中药能改善膝骨关节炎患者的症状，但对其作用途径尚无统一认识。 目的：观察补肾活血复方中药对膝骨关节炎患者血清中基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1、透明质酸、脂质过氧化物含量及超氧化物歧化酶活性的影响。 设计、时间及地点：病例一对照及自身对照的细胞因子及酶学检测实验，于2002—09／2005-01在广州中医药大学第一附属医院髋中心完成。 对象：选择广州中医药大学第一附属医院门诊或病房收治的膝骨关节炎患者42例，按随机数字表法分为2组（n=21），即补肾活血中药组和骨仙片组。另外选择10例无关节疾病的骨折愈合后来本院拆除内固定的患者作为正常对照组。 方法：补肾活血中药组以补肾活血方治疗，中药复方由杜仲、熟地、枸杞子、补骨脂、川牛膝、独活、红花、木瓜、川芎、丹参和木香组成，由广州中医药大学第一附属医院自制，5片／次，3次/d；骨仙片组采用口服中成药骨仙片治疗，4片／次，3次/d。30d为1个疗程，共治疗1个疗程。 主要观察指标：补肾活血中药组和骨仙片组治疗前及治疗1个疗程后，分别采用酶联免疫法、四甲基偶氮唑蓝法、双抗体夹心酶联免疫吸附实验及放射免疫法测定患者血清基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1及透明质酸含量；应用试剂盒测定血清脂质过氧化物含量及超氧化物歧化酶活性，并与正常对照组对比。 结果：治疗前补肾活血中药组和骨仙片组患者血清基质金属蛋白酶3、白细胞介素1及透明质酸含量均高于正常对照组（P〈0．01）。治疗1个疗程后，补肾活血中药组和骨仙片组患者血清基质金属蛋白酶3、白细胞介素1、透明质酸及脂质过氧化物含量均低于治疗前（P〈0．05～0．01），血清超氧化物歧化酶活性高于治疗前（P〈0．05）。 结论：补肾活血中药与骨仙片具有类似的效果，可降低膝骨关节炎患者血清中的基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1和透明质酸含量，提高超氧化物歧化酶活性，抑制免疫损害进程，从而达到治疗膝骨关节炎的目的。     

健康三要

一般而言,人们大多会很容易地注意到身体生病时的病态,而很少有人会注意到生活理念和生活方式上的病态,尽管后者比前者更为重要。     

补肾活血中药对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响*☆

背景：骨髓间充质干细胞因其获取容易、创伤微小、具有无限扩增和多分化潜能、自体移植不存在免疫排斥反应而受到医学研究者的青睐。 目的：体外分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞，观察不同浓度补肾活血中药含药血清对其增殖的影响。 设计：完全随机对照的动物实验。 单位：广州中医药大学第一附属医院髋中心。 材料：选用健康雄性SD大鼠40只，SPF级，体质量170~180 g，由广州中医药大学实验动物中心提供。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。将实验动物按随机数字表分为4组，正常对照组和高、中、低剂量给药组，每组10只。 方法：实验于2005-01/03在广州中医药大学实验动物中心完成。采用Percoll密度梯度离心法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞，体外培养，建立大鼠骨髓间充质干细胞培养体系。高、中、低剂量给药组大鼠分别灌胃补肾活血中药4.4，2.2和1.1 g/kg，分别相当临床成人用量的20，10和5倍。正常对照组灌胃纯净水。连续给药1周。末次给药1 h后，无菌条件下，腹主动脉取血6 mL/只，2 000 r/min离心15 min，收集血清。高、中、低剂量给药组用10%大鼠含药血清代替10%的牛血清，正常对照组的培养基加入10%的血清。每天观察并记录细胞生长情况，绘制生长曲线。 主要观察指标：①骨髓间充质干细胞的生长状况。②HE染色和吉姆萨染色观察骨髓间充质干细胞形态。③免疫细胞化学法检测骨髓间充质干细胞的抗原表达。④不同浓度含药血清对骨髓间充质干细胞生长情况的影响。 结果：①骨髓间充质干细胞的生长状况：原代培养的骨髓细胞24 h后开始贴壁，7 d后可达80%融合。②骨髓间充质干细胞的一般形态：骨髓间充质干细胞的细胞多成长梭形或多角形，细胞体积小，胞核位于胞中或稍偏，核浆比略大。③髓间充质干细胞的抗原表达：单个核细胞的胞浆中有CD44表达，着蓝色，部分骨髓间充质干细胞表达c-Kit，在表型表达和细胞形态上具备骨髓间充质干细胞特征。④补肾活血中药对骨髓间充质干细胞生长曲线的影响：高、中、低剂量给药组在加入补肾活血中药血清3 d后，骨髓间充质干细胞数量比空白对照组明显增多，并与剂量呈正比。 结论：补肾活血中药含药血清能促进骨髓间充质干细胞的体外增殖。     

健康与养生

健康与养生是两个不完全相同的概念。健康是养生的前提,养生是对健康更加深入的理解与追求。健康偏重于理念,养生偏重于方法。人们也许会很容易注意到身体发生疾病时的病态,而很少会注意到生活理念和生活方式上的病态。我们认为有意识地去注意后者更为重要,因为从根本上去调整生活的偏差会让你过得更快乐。健康不是补出来的经常看到补铁、补钙之类的广告,具体怎样我已记不清,但我知道除了难以实施,消耗金钱外,它们一直在自相矛盾。看多了各种说法以后,你只会觉得无所适从,其实那本身就是一种误导与欺骗。大自然产生了人类,决不会在人类正常…     

补肾活血中药对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

背景：骨髓间充质干细胞因其获取容易、创伤微小、具有无限扩增和多分化潜能、自体移植不存在免疫排斥反应而受到医学研究者的青睐。 目的：体外分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞，观察不同浓度补肾活血中药含药血清对其增殖的影响。 设计：完全随机对照的动物实验。 单位：广州中医药大学第一附属医院髋中心。 材料：选用健康雄性SD大鼠40只，SPF级，体质量170-180g，由广州中医药大学实验动物中心提供。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。将实验动物按随机数字表分为4组，正常对照组和高、中、低剂量给药组，每组10只. 方法：实验于2005-01/03在广州中医药大学实验动物中心完成。采用Percoll密度梯度离心法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞，体外培养，建立大鼠骨髓间充质干细胞培养体系。高、中、低剂量给药组大鼠分别灌胃补肾活血中药4.4，2．2和1．1g/kg，分别相当临床成人用量的20，10和5倍。正常对照组灌胃纯净水。连续给药1周。末次给药1h后，无菌条件下，腹主动脉取血6mid只，2000r／min离心15min，收集血清。高、中、低剂量给药组用10％大鼠含药血清代替10％的牛血清，正常对照组的培养基加入10％的血清。每天观察并记录细胞生长情况，绘制生长曲线。 主要观察指标：①骨髓间充质干细胞的生长状况。②HE染色和吉姆萨染色观察骨髓间充质干细胞形态。③免疫细胞化学法检测骨髓间充质干细胞的抗原表达。④不同浓度含药血清对骨髓间充质干细胞生长情况的影响。 结果：①骨髓间充质干细胞的生长状况：原代培养的骨髓细胞24h后开始贴壁，7d后可达80％融合。②骨髓间充质干细胞的一般形态：骨髓间充质干细胞的细胞多成长梭形或多角形，细胞体积小，胞核位于胞中或稍偏，核浆比略大。③髓间充质     

大鼠骨髓间充质干细胞的分离纯化与成骨鉴定

[目的] 研究大鼠骨髓间充质干细胞 (MSCs) 的分离纯化和在诱导条件下的成骨能力.[方法] 取SPF级SD大鼠6只,采用全骨髓贴壁培养法分离成年大鼠骨髓间充质干细胞,取传至第3代的MSCs进行细胞形态和免疫组化鉴定;应用含地塞米松、B-甘油磷酸钠和维生素C的诱导分化培养液诱导传代细胞向成骨细胞分化,检测碱性磷酸酶 (ALP) 的活性和细胞矿化作用进行成骨细胞鉴定.[结果] 全骨髓贴壁培养法能有效分离纯化大鼠骨髓MSCs,MSCs 在含体积分数为10%胎牛血清的低糖 DMEM(L-DMEM) 养液中生长性状相对稳定,增殖速度快;诱导条件下,细胞ALP活性明显增高,并出现了矿化结节.[结论] 建立了一种体外分离纯化、培养扩增大鼠骨髓 MSCs 的方法,成骨能力肯定,为中药蛋白质组学研究提供材料基础.     

补肾活血中药对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

目的观察补肾活血中药含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)体外增殖的影响。方法采用Percoll密度梯度离心法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,体外培养,建立大鼠骨髓间充质干细胞培养体系;收集补肾活血中药的含药血清,用10%含药血清代替10%的血清,绘制生长曲线,观察补肾活血中药含药血清促进骨髓间充质干细胞体外增殖的作用。结果所培养的大鼠骨髓细胞在表型表达和细胞形态上具备MSC特征,补肾活血中药含药血清组增长速度比空白对照组明显加快,并与剂量呈正比。结论补肾活血中药含药血清能促进干细胞在体外增殖。     

补肾活血中药对大鼠骨髓间充质干细胞体外增殖的影响

背景:骨髓间充质干细胞因其获取容易、创伤微小、具有无限扩增和多分化潜能、自体移植不存在免疫排斥反应而受到医学研究者的青睐.目的:体外分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,观察不同浓度补肾活血中药含药血清对其增殖的影响.设计:完全随机对照的动物实验.单位:广州中医药大学第一附属医院髋中心.材料:选用健康雄性SD大鼠40只,SPF级,体质量170～180 g,由广州中医药大学实验动物中心提供.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.将实验动物按随机数字表分为4组,正常对照组和高、中、低剂量给药组,每组10只.方法:实验于2005-01/03在广州中医药大学实验动物中心完成.采用Percoll密度梯度离心法分离纯化大鼠骨髓间充质干细胞,体外培养,建立大鼠骨髓间充质干细胞培养体系.高、中、低剂量给药组大鼠分别灌胃补肾活血中药4.4,2.2和1.1 g/kg,分别相当临床成人用量的20,10和5倍.正常对照组灌胃纯净水.连续给药1周.末次给药1 h后,无菌条件下,腹主动脉取血6 mL/只,2 000 r/min离心15 min,收集血清.高、中、低剂量给药组用10%大鼠含药血清代替10%的牛血清,正常对照组的培养基加入10%的血清.每天观察并记录细胞生长情况,绘制生长曲线.主要观察指标:①骨髓间充质干细胞的生长状况.②HE染色和吉姆萨染色观察骨髓间充质干细胞形态.③免疫细胞化学法检测骨髓间充质干细胞的抗原表达.④不同浓度含药血清对骨髓间充质干细胞生长情况的影响.结果:①骨髓间充质干细胞的生长状况:原代培养的骨髓细胞24 h后开始贴壁,7 d后可达80%融合.②骨髓间充质干细胞的一般形态:骨髓间充质干细胞的细胞多成长梭形或多角形,细胞体积小,胞核位于胞中或稍偏,核浆比略大.③髓间充质干细胞的抗原表达:单个核细胞的胞浆中有CD44表达,着蓝色,部分骨髓间充质干细胞表达c-Kit,在表型表达和细胞形态上具备骨髓间充质干细胞特征.④补肾活血中药对骨髓间充质干细胞生长曲线的影响:高、中、低剂量给药组在加入补肾活血中药血清3 d后,骨髓间充质干细胞数量比空白对照组明显增多,并与剂量呈正比.结论:补肾活血中药含药血清能促进骨髓间充质干细胞的体外增殖.     

补肾活血中药治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的临床研究

【目的】探讨补肾活血中药治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的临床疗效。【方法】将42例肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者随机分为对照组和治疗组各21例,分别口服中成药骨仙片和补肾活血中药,连续治疗3个月。观察两组患者治疗前后膝部评分、膝部功能评分和X线摄片的变化。【结果】治疗组优良率为85.7%,对照组优良率为66.6%,2组比较差异有显著性意义(P<0.05),提示治疗组疗效优于对照组。两组患者治疗后膝部活动痛、膝部伸直迟滞、行走和上下楼梯困难、使用手杖支撑等评分均有改善,与治疗前比较差异有显著性意义(P<0.05或P<0.01);两组治疗后总评分均有显著性提高(P<0.05)。【结论】补肾活血中药能改善患者的临床症状和膝关节功能,为治疗肾虚血瘀型膝骨性关节炎的有效药物之一。