中药治疗帕金森病的体外实验研究进展

帕金森病(Parkinson's disease,PD)为常见的神经退行性疾病,在老年人中的发病率居高不下,给社会和家庭带来了沉重的负担.中药由于在防治帕金森病等神经退行性疾病等方面有较丰富的实践经验及多靶点作用途经、毒性相对小等潜在优势,在临床上的应用越来越广泛,近年来对中药作用机理研究力度加大、水平渐高,已达细胞、分子水平.该文对近十年来中药治疗帕金森病的体外实验研究进行了综述.     

药材玉竹RAPD反应体系的优化

目的寻找玉竹的最佳RAPD反应体系，保证实验结果的稳定可靠性。方法采用单因素多水平的梯度实验和正交设计实验相结合，对两种不同实验方法所得结果进行分析。结果确定了适合于玉竹的最佳RAPD反应体系。结论优化的RAPD反应体系是保证实验结果稳定可靠的重要因素之一。     

左金丸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的研究

目的：探讨左金丸水提物（WEZP）对人胃癌细胞（SGC-7901）生长的活性抑制和凋亡诱导作用。方法：观察不同浓度的WEZP对SGC-7901的生长抑制情况，MTF比色法检测细胞活力，Hoechst33258染色观察细胞形态学变化，流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：1mg／mL、5mg／mL、10mg／mL的WEZP作用SGC-7901细胞24h后，细胞存活率显著降低，且与时间、剂量呈依赖关系。Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析，各剂量WEZP作用SGC-7901细胞24h后，细胞凋亡率分别为（8．96±0．88）％、（18．40±0．60）％和（29．90±0．58）％，与对照组（2．66±1．33）％比较差异均有统计学意义。结论：WEZP对SGC-7901生长有明显的抑制作用并可诱导SGC-7901的凋亡。     

分子标记中植物DNA提取方法的研究进展

自20世纪80年代初,分子生物学大量运用于植物研究领域后,DNA分子标记不仅在农业上对植物选种、育种和改良等方面的应用稳步增长,而且在中药资源、鉴定、栽培等方面也有着很好的发展前景.在一般情况下,DNA分子标记技术涉及的分子生物学原理比较简单,实验方法也不复杂,但熟练掌握、灵活运用,并有效地解决实验中出现的各种情况,仍有许多问题值得重视.其中,如何有效地提取高质量的植物DNA已成为生物化学研究的一个重要方面.DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此DNA的提取应是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作,如不能有效地完成DNA提取,那就无法进行分子生物学方面的实验.植物DNA的有效提取,根据不同研究需要,应保证结构的相应完整性;应尽量排除其他大分子成分的污染(蛋白质、多糖及RNA等);应保证提取样品中不含对酶有抑制作用的有机溶剂及高浓度的金属离子,尽可能少地降解.提取DNA的质量一般采用核酸蛋白质分析仪检测.植物DNA的有效提取,它是进行任何DNA工作的前提和基础,也是最关键的一步.     

中西药杂合体多靶点抗阿尔茨海默病研究进展

<正>阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是最为常见的中枢神经系统退行性疾病。目前临床AD治疗药物包括多奈哌齐（donepezil）、利斯的明（rivastigmine）、美金刚（memantine）,以及源于天然药用植物石蒜科雪花莲的加兰他敏（galantamine）和千层塔的石杉碱甲（huperzine A）。但这些药物大多作用于单一靶点,无法延缓AD进程。原因在于：随着AD病程进展,各种AD神经毒素相互影响,神经元损伤级联性放大。     

新型体外胆碱酯酶抑制剂筛选体系的构建

〔摘 要〕 目的： 构建新型简便可靠的体外胆碱酯酶抑制剂筛选体系。方法： 从 SD 大鼠大脑和血清中提取乙酰胆碱酯酶 （AChE）和丁酰胆碱酯酶（BuChE），应用 Ellman 比色法构建体外 AChE 和 BuChE 抑制剂筛选实验体系。结果： 选择 10 倍 稀释的雄性大鼠脑匀浆液〔蛋白浓度（1.69 ± 0.10）mg·mL-1〕和 5 倍稀释的血清作为 AChE/BuChE 酶源，使用 AChE/BuChE 抑制剂他克林作为参考。他克林对 AChE/BuChE 的半数抑制浓度（IC50）分别为 262 nmol·L-1 和 168 nmol·L-1，体外 胆碱酯酶抑制剂筛选体系构建成功。在等量蛋白浓度情况下，雌性大鼠脑匀浆液中 AChE 酶活性为雄性大鼠的 1.84 倍。 结论： 本研究从大鼠大脑和血清里分别提取 AChE 和 BuChE 粗酶，构建了一种新型的简单易行且稳定可靠的 AChE/BuChE 抑制剂筛选平台。     

人参水提物对MPP^＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的研究人参水提物（WEG）对四氢吡啶离子（MPP^＋）诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP＋致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予WEG干预。应用MTT比色法检测细胞活力;Hoechst33258染色观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果0.5mmol·L^-1MPP^＋作用于SH-SY5Y细胞60h,MTT值降低到（51.97%±2.46%）（P〈0.01）,Hoechst 33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,凋亡率增加到（40.52%±1.68%）（P〈0.01）,而WEG则能明显改善SH-SY5Y细胞的凋亡特性,显著升高其MTT值,降低凋亡率（P〈0.05）。结论人参水提物对MPP＋诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有显著的保护作用。     

红参水提物对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的 探讨红参水提物对Aβ25-35诱导人神经瘤母细胞SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用.方法 用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,模拟阿尔茨海默病患者脑内神经元的病理损伤模型,以不同浓度的红参水提物进行干预;用倒置显微镜观察其形态学的变化;MTT法测定细胞的存活率;流式细胞技术检测细胞的凋亡率以及线粒体膜电位的变化.结果 50 μmol·L-1Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72 h后,细胞变圆、聚集,其存活率为39.26%土3.16%、凋亡率为37.30%±0.69%,线粒体红绿荧光强度比值为0.45±0.10;而Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞与不同浓度(1、5、10 mg·ml-1)红参水提物同时孵育后,明显减少了细胞损伤,升高了细胞存活率、降低了凋亡率,并升高了线粒体红绿荧光强度比值.结论 红参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用.     

基于细胞凋亡表达的生晒参、红参和西洋参四性研究展望

中药四性的研究一直是困扰中医药界的热点和难点问题,迄今未取得实质性的进展,严重影响了中医药现代化的进程.把细胞凋亡学应用于中药四性的研究,定性定量刻画中药四性的生物学效应与细胞凋亡的关系.从细胞分子水平建立一个中药四性的模式识别系统,将成为衡量中药四性的一个新突破.结合国内外大量文献研究和本课题组的研究基础,对中药四性的发展和定位提出新的观点和思路,对中药四性的研究进行评述和前瞻性分析.     

人参水提物对β淀粉样蛋白诱导SH—SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的研究人参水提物（water extracts of Ginseng，WEG）对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用方法用Aβ25-35诱导体外培养的SH-SY5Y细胞凋亡，并用WEG进行保护。MTT法检测细胞存活率，Hoechst33258染色观察细胞形态的变化，流式细胞仪分析亚二倍体峰和DNA含量，检测细胞凋亡。结果Aβ25-35 50μmol／L诱导SH—SY5Y细胞72h后，镜下观察到细胞变圆，损伤并聚集，Hoechst33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光，流式细胞仪检测到明显的亚二倍体峰，凋亡率达（37．30&#177;0．69）％。而Aβ25-35和不同浓度的WEG（1，5，10，15mg／m1）同时处理后，细胞形态明显改善，MTT值显著高于Aβ25-35处理组（P〈0．01），流式细胞仪检测凋亡率分别降低到（14．70&#177;3．18）％，（7．23&#177;1．51）％，（6．14&#177;0．40）％，（5．88&#177;1．33）％，呈现剂量依赖关系。结论人参水提物对Aβ25-35诱导的SH—SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。