基于网络药理学和睾丸间质细胞模型探讨恩施巴戟促进睾酮分泌的作用机制

目的 基于网络药理学和睾丸间质细胞模型探究恩施巴戟对睾丸间质细胞睾酮分泌的影响和潜在作用机制。方法利用网络药理学和分子对接预测恩施巴戟治疗睾酮缺乏症的主要作用靶点及通路;通过LC-MS/MS技术分析恩施巴戟主要化学成分;构建睾丸间质细胞模型,采用MTT法检测睾丸间质细胞的存活率,采用ELISA法检测睾酮分泌量,采用qRTPCR检测睾酮合成和凋亡相关基因表达,采用Western blotting检测睾酮合成蛋白表达。结果 网络药理学和分子对接结果显示,恩施巴戟主要通过丝裂原活化蛋白激酶1（mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1）、磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基1（phosphatidylinositol 3-kinaseregulatory subunit 1,PIK3R1）等靶点和环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）、MAPK、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）等信号通路发挥作用,水晶兰苷为其主要有效成分。LC-MS/MS分析和睾丸间质细胞实验结果验证了网络药理学预测分析,恩施巴戟提取物和水晶兰苷均具有促进睾丸间质细胞生长和睾酮分泌的作用,其作用机制与促进类固醇生成急性调控蛋白（steroidogenic acute regulatory protein,StAR）、胆固醇侧链裂解酶（cholesterol side-chain cleavage enzyme,Cyp11a1）、B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）/Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）mRNA表达（P＜0.05、0.01）并促进StAR蛋白表达有关（P＜0.01）。结论 恩施巴戟具有促进睾酮分泌的作用,水晶兰苷为其主要活性成分,其作用机制与作用于MAPK、PI3K/Akt通路调控睾酮合成有关。     

虎杖叶斑病病原菌的鉴定、生物学特性及其有效杀菌剂研究北大核心CSCD

在湖北省十堰市房县虎杖种植基地调查发现虎杖叶斑病发生,为明确其病原菌种类及其发病规律,该研究根据科赫法则对虎杖叶斑病病原菌进行分离、纯化,测定病原菌致病性并研究其生物学特性。同时,采用菌丝生长速率法测定11种杀菌剂对该菌的抑制作用,筛选出合适的防控药物。结果表明,从虎杖染病叶片上分离出的病菌经分离筛选、形态鉴定及分子生物学鉴定,确定为大黄茎点霉Phoma rhei。其菌落形态、显微特征与Ph.rhei基本一致;且rDNA-ITS、TEF基因序列与Ph.rhei的同源性分别达到99.96%、99.43%。病原菌Ph.rhei最佳的生长温度为25℃,pH为7~10时生长状况较好,全黑暗或全光照的环境更适合该病原菌生长;杀菌剂筛选结果表明,0.3%丁子香酚、250 g·L^(-1)丙环唑、33.5%喹啉铜对该病原菌具有显著的抑制效果,EC_(50)分别为57.54、59.58、88.69μg·mL^(-1),丁子香酚为植物源杀菌剂,可作为绿色环保杀菌剂作用于虎杖叶斑病防治中。该研究首次报道虎杖叶斑病病原菌为大黄茎点霉Ph.rhei,对该致病菌进行了生物学特性研究及室内药剂筛选,为生产上虎杖叶斑病防治提供了理论依据。