力-化学耦合作用在血管内皮细胞迁移中的作用及其力学生物学机制

目的 研究力学与化学因素的耦合在内皮细胞迁移过程中的作用以及其中的力学生物学机制。方法 在不同大小剪应力下分别用RTPCR、Western blot以及免疫荧光的方法检测内皮细胞CXCR1和CXCR2的表达变化;用antiIL8RA和antiIL8RB拮抗CXCR1和CXCR2,在剪应力作用下观察内皮细胞迁移情况;采用脂质体包绕法分别将Rac1及RhoA的野生型、活化型和抑制型3种质粒转染入内皮细胞,将转染了Rac1的3种质粒的细胞分别施加力学（剪应力）和化学（IL-8）刺激,对转染了RhoA的3种质粒的细胞施加化学刺激,检测以上条件下内皮细胞迁移情况。结果 CXCR1和CXCR2作为新型力学感受器参与调节内皮细胞迁移;Rac1与RhoA的高表达能促进内皮细胞迁移,反之,内皮细胞迁移被抑制。结论 IL-8Rs (CXCR1、CXCR2)、Rac1、RhoA是将力学、化学信号进行“耦合”的关键信号分子。     

流体剪切力调节血管内皮细胞自噬的研究进展

细胞自噬作为细胞的一种防御和应激调控机制,参与维持细胞的代谢平衡。在血管内皮细胞中,自噬是影响内皮细胞功能的一个重要因素。流体剪切力也是影响血管内皮细胞形态和功能的重要因素之一。而血管内皮细胞生理功能的维持在整个心血管系统的正常运转中起着重要的作用。我们主要对血管内皮细胞的功能,细胞自噬和流体剪切力对血管内皮细胞功能的调节作用,以及流体剪切力对血管内皮细胞自噬的调节作用等方面进行综述。     

骨质疏松症动物模型的构建及实验方法研究进展

骨质疏松症是一种全身性骨代谢病,由多种因素引起,其特点是骨量、骨密度和骨组织的显微结构恶化,骨脆性增强和易发生骨折。骨质疏松症已严重威胁人类健康,最终将导致患者日常活动减少,生活质量降低,死亡率增加。针对不同的研究对象,选择一个正确、理想的动物骨质疏松的模型和实验方法以尽可能再现人类骨质疏松的状态,是开展动物实验的关键。我们综述了当前原发性和继发性骨质疏松等动物模型的构建,以及利用这些模型进行给药实验的研究方法,并对研发治疗骨质疏松的新型药物的选择提供了一些参考建议,以期对后续关于药物的作用机制、研发新药、药物的改良等研究提供思路。     

血管内皮糖萼在炎症中的作用

血管内皮糖萼是血管内皮细胞腔侧面的多糖蛋白复合物层.在生理状态下,其主要功能是调节血管内皮通透性及血细胞与内皮细胞间相互作用,介导血流剪切力诱导一氧化氮的释放等.炎症条件下,多种炎症介质导致血管内皮糖萼脱落,削弱了其血管保护功能;同时血管内皮糖萼的组分硫酸乙酰肝素可调控炎症发展,包括作为L-选择素的配体调节白细胞的滚动,形成趋化因子浓度梯度调节白细胞在血管腔侧面的移行及其与内皮细胞的紧密黏附,调控趋化因子由组织向血管腔的转运等.动脉粥样硬化作为一种炎症性疾病,其多种危险因子与血管内皮糖萼联系密切.综述了血管内皮糖萼在炎症和动脉粥样硬化中的作用.     

IL-8对血管内皮细胞通透性的影响

目的研究白细胞介素-8（IL-8）对血管内皮细胞通透性的影响。方法采用Transwell弥散模型,以标志物漏出法检测IL-8不同浓度、不同作用时间对EA.hy926细胞单层通透性的影响;结晶紫染色法检测细胞形态学改变;透射电镜进行细胞连接形态学观察。结果IL-8可明显增加血管内皮细胞单层的通透性（P〈0．05）,呈一定的剂量和时间依赖关系;荧光倒置相差显微镜观察,随着IL-8浓度和作用时间的增加,细胞明显回缩,细胞间隙明显增加;透射电镜实验表明,随着IL-8浓度和作用时间的增加。细胞连接逐渐打开、破坏。结论IL-8以时间和剂量依赖方式引起血管内皮细胞通透性升高、细胞及细胞连接形态学的改变。     

层流剪应力对内皮细胞IL-8受体CXCR2蛋白表达的影响

目的 研究内皮细胞在不同时间、不同大小层流剪应力作用下IL-8 受体 CXCR2的表达规律.方法 通过体外培养人脐静脉内皮细胞株EA.Hy926细胞,分别施加5.56、10.02、15.27 dyn/cm<'2>3种剪应力,以静止组为对照,选取0、1、2、4和8 h 5个时间点进行采样,West blot检测IL-8受体CXCR2表达变化.结果 在5.56 dyn/cm<'2>剪应力作用下,与静止组相比,CXCR2表达随作用时间的增加而显著升高(P<0.05),至4 h达到最大值,为对照组的4.2倍.在10.02 dyn/cm<'2>剪应力作用下,CXCR2的表达随剪应力作用时间而相对缓慢增加,但仍高于对照组(P<0.05).在15.27 dyn/cm<'2>剪应力作用下,其CXCR2的表达随时间呈现较显著性降低(P<0.05),当持续作用8 h,其CXCR1的表达为对照组39.14%.结论 不同强度、作用时间的层流剪应力参与调节IL-8受体CXCR2的表达.     

对细胞施加力学作用的实验方法

对细胞施加力学作用的实验方法有很多种,但大多是对体内、体外环境中某一力学因素的模拟.按照所模拟力的来源不同,分为模拟体内力学环境的实验方法和模拟体外力学环境的实验方法两类.模拟体内力学环境的实验方法主要有:流动剪切力法、静水压法、圆周应力法、基底拉伸法;模拟体外力学环境的实验方法主要有:微重力细胞培养法、离心力场法、气体加压法、声波刺激法、微光束辐照法.另外,还有一类用于研究单细胞力学特性的实验方法,主要有微管吸吮法、原子力显微镜悬臂刺激法、磁珠扭转法和光钳法.本文针对这些主要的实验方法进行综述.     

Rac1参与调节IL-8诱导的内皮细胞迁移

研究Rac1是否参与调节IL-8诱导的内皮细胞迁移.采用Transwell小室迁移率分析法,考察不同Matrigel稀释比例以及IL-8不同作用时间对内皮细胞迁移的影响;同时用RT-PCR法检测Rac1 mRNA的表达.结果表明,Matrigel稀释比例为1:2时与比例为1:3、1:8时细胞迁移数量有显著性差异,而比例为1:4、1:5和1:6时与其他各组没有显著性差异;故选用Matrigel稀释比例1:4进行后期实验,随着IL-8作用时间的增加,内皮细胞迁移数量也逐渐增加;IL-8作用6h后,Rac1 mRNA的表达较其他各时间组稍强.以上结果提示,Rac1参与调节IL-8诱导的内皮细胞迁移,本实验为进一步研究Rac1在IL-8诱导内皮细胞迁移中的作用奠定基础.     

氢溴酸山莨菪碱改善微循环障碍的机制研究进展

氢溴酸山莨菪碱是从我国特产植物唐古特山莨菪中提取的一种天然生物碱,于1965年率先应用于临床,代号为654-1.临床上常使用其人工合成替代品消旋山莨菪碱(654-2),改善微循环治疗感染性休克、平滑肌痉挛、有机磷农药中毒等.近年来,氢溴酸山莨菪碱的来源得到了有效保障,为了帮助氢溴酸山莨菪碱的临床应用开发及作用机制研究,本文对氢溴酸山莨菪碱在稳定细胞质膜、抗脂质过氧化、拮抗胆碱能受体、抗凝血与促纤溶、保护血管内皮糖萼和细胞间连接等方面的作用及其机制进行综述.     

湖北利川黄连不同生长龄期主要生物碱的分布及变化

目的:研究湖北利川黄连不同生长龄期主要生物碱的累积变化过程,为标准化种植提供科学依据.方法:采用紫外分光光度法和HPLC测定黄连有效成分.结果:随着生长龄期的增长,黄连叶片数、根茎干重都在不断的增加;黄连不同部位中总生物碱含量的由大到小的顺序依次是根茎＞须根＞叶片;在黄连2～3龄阶段为黄连生长最旺盛的时期,酪氨酸、总生物碱、小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量增长速度最快;在5龄阶段,这4种生物碱含量的大小顺序依次是小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀,且这4种生物碱含量之和占总生物碱含量的比例在不断增加.结论:为黄连的种植管理提供了参考.