葛根素抑制钠-葡萄糖协同转运蛋白2活性发挥促尿糖作用研究

目的 研究葛根素通过抑制钠-葡萄糖协同转运蛋白2（SGLT2）发挥促尿糖、降血糖作用。方法 同源模建获得SGLT2蛋白虚拟结构,以达格列净为阳性药,与葛根素进行分子对接,考察其分子结合强弱;采用能稳定表达人SGLT2（hSGLT2）蛋白的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞、以^14C-甲基葡萄糖苷（[^14C]-AMG）为底物,评价葛根素体外抑制SGLT2的活性;以达格列净为阳性药,采用大鼠体内口服糖耐量试验（OGTT）和尿排泄糖试验（UGE）观察葛根素直接降血糖和促尿糖活性。结果 分子对接得分显示,葛根素是SGLT2的底物,总体作用强度不及达格列净;体外实验显示,葛根素可较强抑制hSGLT2,最大效应为84%左右,半数抑制浓度（IC₅₀）为0.40 μmol/L;OGTT结果显示,葛根素10、30、60和120 mg/kg剂量的抑糖率分别为5.1%、6.5%、16%和22%,呈剂量相关性;在UGE实验中,随着葛根素剂量的增大,尿糖量增加,与模型组比较,30、60和120 mg/kg剂量组差异显著（P<0.05、0.01）。结论 葛根素具有抑制hSGLT2、促尿糖降低血糖的药理活性,有可能作为一类新型结构的SGLT2抑制剂的先导化合物。     

基于计算机模拟技术以埃博拉病毒跨膜糖蛋白为靶点挖掘中药抗病毒活性分子

目的基于埃博拉病毒跨膜糖蛋白(transmembrane glycoprotein of the Ebola virus,EBOV-GP)的三维空间结构,运用计算机虚拟筛选技术从中国台湾中医药数据库TCM@TAIWAN中寻找具有抗病毒作用的中药活性分子。方法以EBOV-GP为靶点,采用类药性评估、分子对接、分子动力学模拟以及吸收、分布、代谢和排泄(absorption、distribution、metabolism and excretion,ADME)预测等多尺度虚拟筛选策略,从TCM@TAIWAN数据库中挖掘候选药效分子,并分析候选分子与靶点的相互作用情况。结果以胺碘酮为阳性对照药物,筛选出4个类药性良好的中药单体ZINC85531496、ZINC85567560、ZINC85592968、ZINC33833122,与EBOV-GP亲和力及相互作用基团均优于胺碘酮。结论采用多种计算机虚拟筛选技术挖掘EBOV-GP抑制剂,可促进从天然产物化学结构数据库中提取、设计以及实验合成抗埃博拉病毒的药效分子。     

TCMSP 数据库中药化学成分的SARS-CoV-2 主蛋白酶抑制剂虚拟筛选

目的运用计算机模拟技术从中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）的中药化学成分中挖掘 SARS-CoV-2 主蛋白酶（Main protease,Mpro）抑制剂。方法运用类药性评估、分子对接、ADME 预测、结合 自由能计算、分子动力学模拟等多轮虚拟筛选的策略,从TCMSP 数据库中筛选Mpro 抑制剂。结果共筛选得 到10 个命中分子,其中前3 位最佳命中分子为MOL003392、MOL011716、MOL002966,表现出与靶标活性口 袋关键氨基酸残基的强相互作用。结论该研究可为发现SARS-CoV-2 Mpro 小分子抑制剂提供新的思路。     

基于SIRT1-ERK1/2通路研究白藜芦醇对环孢菌素A诱导高血压的作用及机制

目的 研究白藜芦醇对环孢菌素A(cyclosporine A,Cs A)诱导高血压的作用及其机制。方法 采用离体血管培养技术和微血管张力描记技术研究Cs A对5-羟色胺（5-hydroxytryptamine,5-HT）介导的平滑肌收缩量效曲线变化。大鼠sc Cs A诱导血压升高,给予白藜芦醇进行干预,研究白藜芦醇对血压的影响;采用微血管张力描记观察5-HT引起的动脉收缩量效曲线的变化;采用Western blotting检测5-HT1B受体、沉默信息调节因子1(sirtuin 1,SIRT1)、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular regulated kinase 1/2,ERK1/2)蛋白表达。结果 离体血管培养结果表明,白藜芦醇通过激活SIRT1-ERK1/2通路抑制CsA诱导的收缩。动物实验表明白藜芦醇可以显著降低CsA引起的血压升高（P<0.05、0.01）;抑制5-HT引起的收缩反应（P<0.05、0.01）;降低5-HT1B受体和p-ERK1/2蛋白表达（P<0.05、0.01）,增加SIRT1蛋白表达（P<0.01）。结论白藜芦醇...     

基于NLRP3炎症小体研究黄芩苷联合栀子苷防治缺血性脑卒中及并发心肌损伤的作用机制

目的 以NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎症小体为切入点,研究黄芩苷-栀子苷（7∶3）抗脑缺血损伤及并发心肌损伤的作用机制。方法 将雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、尼莫地平（10 mg/kg）组和黄芩苷-栀子苷低、中、高剂量（30、45、60 mg/kg）组,每组10只。ig药物7 d后,采用线栓法构建大鼠局灶性脑缺血模型,采用Zea-Longa评分标准进行神经功能评分;干湿质量法检测脑组织水肿情况;激光多普勒检测脑血流量;苏木素-伊红（HE）染色观察脑和心肌组织病理变化;TUNEL染色观察心肌组织凋亡情况;采用ELISA法测定心肌组织中心肌酶谱活性。利用网络药理学方法预测黄芩苷-栀子苷抗脑缺血损伤及并发心肌损伤的作用机制;采用ELISA法检测血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;采用Western blott...     

滋水清肝饮对慢性束缚应激抑郁小鼠皮层ERK/CREB/BDNF通路及肠道菌群的影响

目的 通过细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（cyclic adenosine monophosphate response binding protein,CREB）/脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）信号通路及肠道菌群探究滋水清肝饮对慢性束缚应激制备的小鼠抑郁模型的干预作用。方法 除对照组外,建立慢性束缚应激模型,造模21 d后根据糖水偏好实验结果随机分成模型组、盐酸氟西汀（0.01 g/kg）组和滋水清肝饮低、中、高剂量（8.835、17.670、35.340 g/kg）组。每周给药结束后进行糖水偏好实验及行为学实验。苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠全脑及结肠病理变化;免疫荧光染色检测海马小胶质细胞标志物离子钙结合衔接分子-1(ionized calcium binding adapter molecule-1,Iba-1)荧光强度;检测小鼠血清中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase）活性及丙二醛...     

虚拟筛选荭草素和异荭草素降血糖靶点和体外活性评价

目的 研究荭草素和异荭草素降血糖的靶点及其体外活性。方法 从蛋白质数据库（www.rcsb.org）获取糖尿病相关靶点蛋白结构,利用虚拟分子对接打分评价荭草素和异荭草素与糖尿病相关靶点的结合强弱;基于分子对接的结果,采用荧光标记的1-脱氧葡萄糖（1-NBDG）、4-硝基苯基-α-D-葡萄糖苷PNDG(PNPG)、对硝基苯酚磷酸酯（pNPP）作为底物对荭草素和异荭草素进行体外抑制α-葡萄糖糖苷酶、钠–葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)和蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)活性评价。结果 荭草素与α-葡萄糖苷酶、SGLT2、和PTP1B的分子对接得分分别为-5.67、-9.32、-4.75,异荭草素与α-葡萄糖苷酶、SGLT2和PTP1B的分子对接得分分别为-5.34、-8.63、-4.93,而阳性对照药与靶标的分子对接打分依次是-5.58、-9.79、-9.28。体外实验显示,荭草素对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次是（16.7±5.8）%、（15.4±1.2）%、（3.0±0.5）%,异荭草素对α-葡萄糖苷酶、SGLT2、PTP1B的抑制率依次是（11.8±3.8）%、...     

德尔塔（Delta）毒株国内外研究进展

新型冠状病毒感染疫情不断扩增,新型冠状病毒出现了诸多变异,其中德尔塔（Delta）变异毒株展现出了主导地位,其携载的病毒量高,致病能力强,传播时变异的刺突糖蛋白S能够更有效地融合细胞膜,感染靶细胞的速度明显快于其他变体,这使Delta毒株更容易进入细胞内进行复制转录,同时该毒株在进行PCR检测时有着更低的循环阈值和更长的病毒释放期,有着超高的病毒携载量,严重影响了世界公共卫生健康,给国家卫生防疫带来了巨大挑战。为研究出更有效的预防措施以及针对Delta毒株合理用药提供理论支持和科学依据,该文从Delta毒株的临床症状、分子结构、流行病学、疫苗预防和药物治疗等5个方面进行总结,详细阐述Delta毒株的特点并提供防治该病毒的新思路与方法。     

基于Ghrelin水平调控探讨玉液汤对2型糖尿病大鼠认知障碍的影响

目的 观察玉液汤对2型糖尿病认知障碍（DCI）大鼠胃饥饿素（Ghrelin）表达水平的调控，探讨其防治DCI的作用途径。方法 以高脂高糖饲料结合链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型，除正常组外，造模成功后按照血糖均匀分模型组、二甲双胍组（200 mg·kg^-1）、玉液汤低、中、高剂量组（4.575、9.15、18.3 g·kg^-1），每组10只。连续灌胃给药30 d，观察并记录各组大鼠体质量及血糖。给药结束即采用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力，测试结束后取大鼠全脑进行苏木素-伊红（HE）染色观察海马CA1区病理变化，同时以免疫组化法检测胃组织和海马CA1区Ghrelin的表达。结果 与正常组比较，模型组大鼠血糖显著上升（P<0.01），体质量显著下降（P<0.01），水迷宫逃避潜伏期明显增加（P<0.05，P<0.01），目标区域停留时间及运动路程、穿越平台次数显著下降（P<0.01），海马CA1区细胞形态结构异常，排列紊乱，数量减少，大鼠血清、海马CA1区及胃组织Ghrelin蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，玉液汤中、高剂量组大鼠体质量均增加，各剂量组血糖显著下降（P<0.01），各组大鼠逃避潜伏期均明显缩短（P<0.05），目标区域停留时间、运动路程及穿越平台次数均明显增加（P<0.05，P<0.01），海马CA1区细胞结构形态均改善，正常细胞数量增加，血清、胃组织及海马CA1区Ghrelin水平明显提高（P<0.05，P<0.01）。结论 玉液汤可有效改善DCI大鼠的认知能力，其机制可能与其调节血清、海马CA1区及胃组织Ghrelin有关。