金银花、连翘配伍提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的实验研究

目的:观察金银花、连翘配伍提取物(JLT)体外抑制甲型流感病毒FM1株的作用。方法:采用血凝试验方法,测定不同质量浓度JLT体外和鸡胚内抑制流感病毒效价,分析JLT对病毒增殖的影响。结果:与病毒对照组比较,JLT组血凝效价降低,其抑制作用时间可从1 h持续到24 h,其对病毒的抑制作用随着药物质量浓度的降低而逐渐减弱;JLT在400 mg/mL、200 mg/mL及100 mg/mL时,对感染流感病毒鸡胚具有预防和保护治疗作用(P<0.001),而在400 mg/mL时的预防作用明显优于阳性对照组(P<0.05)。结论:JLT可有效抑制甲型流感病毒FM1株。     

金银花提取物体外抗甲型流感病毒FM1株的研究

目的观察金银花提取物体外抑制甲型流感病毒FM1株的作用。方法采用血凝试验方法,测定不同浓度金银花提取物体外和鸡胚内抑制流感病毒效价,分析金银花提取物对病毒增殖的影响。结果与病毒对照组比较,金银花提取物组血凝效价降低,其抑制作用时间可从1h持续到24h,其对病毒的抑制作用随着药物浓度的降低而逐渐减弱;金银花提取物在100、50、25mg/mL时,对感染流感病毒鸡胚具有预防和保护治疗作用(P<0.001),而在100mg/mL时的预防作用明显优于阳性对照病毒唑组(P<0.05)。结论金银花提取物可有效抑制甲型流感病毒FM1株。     

解毒胶囊抗流感病毒的实验研究

目的:研究解毒胶囊(金银花、连翘、黄芩、板蓝根、麻黄、甘草)的抗病毒作用。方法:采用体内实验方法,观察解毒胶囊对流感病毒(influenza virus,IV)(A/FM/1/47)感染小鼠的保护或治疗作用。结果:解毒胶囊可明显延长流感病毒(A/FM/1/47)感染小鼠的存活时间(P<0.01);对小鼠肺内的流感病毒均有一定的清除作用,降低肺内流感病毒的血凝滴度和感染力;逆转小鼠的肺炎性病变。结论:解毒胶囊具有明显的抗流感病毒作用。     

柴胡提取物对CVB3m感染小鼠心肌细胞凋亡相关基因表达的影响

目的探讨柴胡提取物调节心肌细胞凋亡的作用机制。方法以柯萨奇病毒嗜心肌株（CVB3m）腹腔注射诱导BALB／c小鼠病毒性心肌炎模型,将实验小鼠分为正常对照组、模型组、柴胡提取物组,柴胡提取物组每天予0．2ml／10g的浓度为2mg／ml的柴胡提取物灌胃,正常对照组、模型组予以等量生理盐水灌胃,于造模后第10天处死,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,采用免疫组化、RT—PCR法检测各组小鼠心肌中Fas、Bcl-2、Caspase3表达。结果正常组小鼠心肌未检测到凋亡的心肌细胞,Fas、Bcl-2、Caspase3均有不同程度表达,模型组可见大量心肌细胞凋亡,且Fas、Bcl-2、Caspase3表达均强于对照组（P〈0．01）,柴胡提取物组心肌细胞凋亡明显减少,与模型组比较差异显著（P〈0．01）,Fas、Caspase3表达明显降低,Bcl-2表达轻度升高。结论柴胡提取物可以抑制病毒性心肌炎时心肌细胞凋亡,明显下调Fas及Caspase3表达,轻微上调Bcl-2表达。     

正交设计银翘散抗流感病毒作用的实验研究

目的 通过对银翘散各配伍与抗流感病毒药效之间关系来探讨其配伍规律.方法 用流感病毒滴鼻造成小鼠感染模型,以小鼠肺组织中病毒的血凝滴度作为观察指标,运用正交设计方法 ,观察银翘散各配伍与药效之间的关系.结果 银翘散降低流感病毒感染小鼠肺组织匀浆血凝滴度的必要因素有连翘、金银花、牛蒡子、荆芥穗、竹叶、生甘草、桔梗、薄荷,而淡豆豉的作用不明显（P＞0.05）.连翘与金银花、连翘与牛蒡子、连翘与荆芥穗、牛蒡子与薄荷、荆芥穗与桔梗有交互作用.结论 从降低流感病毒滴鼻感染小鼠肺组织匀浆血凝滴度的角度看,银翘散最佳组合为连翘2,金银花2,牛蒡子2,荆芥穗1,竹叶2,生甘草2,桔梗1,薄荷2,淡豆豉1.     

双表法对流感病毒感染小鼠肺组织MyD88及NF-κB P65mRNA表达的影响

目的探讨双表法对流感病毒感染小鼠肺组织MyD88及NF-κB P65mRNA表达的影响,探讨双表法的作用机制。方法将120只昆明种小鼠随机分为12组:模型组10只;正常组10只;利巴韦林对照组10只;解表药(银翘散)高、中、低剂量组各10只;固表药(玉屏风散)高、中、低剂量组各10只;双表法(银翘散+玉屏风散)高、中、低剂量组各10只。动物造模后正常组和模型组均以等体积的生理盐水灌胃,各中药治疗组分别予固表法(玉屏风散提取物)、解表法(银翘散提取物)、双表法(玉屏风散+银翘散)、利巴韦林灌胃给药。采用RT-PCR法检测MyD88及NF-κB P65mRNA表达情况。结果正常组和模型组肺组织中均可检测到MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA的表达,但模型组明显高于正常组(P0.05)。双表法高剂量组MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA表达最低,与双表法中低剂量组、解表法各剂量组、固表法各剂量组、利巴韦林组比较均有显著性差异(P均0.05)。结论流感病毒感染小鼠时激活了MyD88/NF-κB P65信号通路,双表法能较好地抑制MyD88mRNA及NF-κB P65mRNA的表达。     

不同鼠龄昆明种小鼠流感病毒肺炎动物模型的比较研究

[目的] 通过幼龄鼠与成龄鼠建立流感病毒感染动物模型对照实验研究,探讨幼龄鼠与成龄鼠对流感病毒的易感性。[方法] 采用鼻腔接种甲型流感病毒小鼠,将实验小鼠分为幼龄正常组、幼龄模型组、成龄正常组和成龄模型组4组,观察各组小鼠在一般状态、存活只数、肺组织病变程度等方面的差异,计算肺指数,应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测各组小鼠肺组织的病毒载量。[结果] 1）接种流感病毒后,成龄模型组基本保持较好状态,幼龄模型组一般状态最差,各正常组小鼠状态最好。2）肺组织外观病变程度：各正常组小鼠在肺组织外观全肺野无病变;幼龄模型组肺组织病变最重,与幼龄正常组及成龄模型组比较均有统计学差异（P<0.05）;成龄模型组与成龄正常组比较无统计学差异（P>0.05）,与幼龄模型组有统计学差异（P<0.05）.3）肺指数：幼龄模型组肺指数最高,与幼龄正常组及成龄模型组比较均有统计学差异（P<0.05）.4）肺组织IV-RNA的半定量：各正常组小鼠未检测到病毒核酸,幼龄模型组在各时点均检测到大量的病毒核酸,幼龄模型组各时间点与成龄模型组比较有统计学差异（P<0.05）.[结论] 幼龄鼠可以成功塑造小鼠IV感染模型,成龄鼠不能成功造模。     

清肺通络膏对呼吸道合胞病毒感染大鼠肺组织PI3K-AKT-NFκB信号通路的影响

目的观察清肺通络膏对呼吸道合胞病毒(RSV)感染大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达的影响,探讨清肺通络膏对PI3K/AKT/NF-κB信号通路的调控机制。方法将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组、治疗组各10只,模型组、治疗组均给予RSV滴鼻接种3d,治疗组于接毒第1天予清肺通络膏背部贴敷,连续7d。于造模第7天后取大鼠肺组织,运用免疫组织化学染色法检测各组大鼠肺组织中PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达增多,差异有统计学意义(P0.05)。治疗组大鼠肺组织PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白表达均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 RSV感染大鼠时激活了PI3K/AKT/NF-κB信号通路,清肺通络膏能够抑制PI3K、AKT1/2、NF-κB p65蛋白的表达,可能是清肺通络膏干预RSV肺炎的机制之一。     

银翘散主要活性成分对流感病毒性肺炎小鼠治疗作用的研究

目的:观察银翘散主要活性成分对流感病毒性肺炎小鼠的治疗作用.方法:昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、中药组和病毒唑组,每组10只,采用鼻腔接种甲型流感病毒FM1株诱导幼龄小鼠肺炎,于感染前1 d,中药组灌服中药提取物,病毒唑组腹腔注射病毒唑注射液,正常组和模型组以等体积的生理盐水灌胃.观察各组小鼠的一般状态、肺组织形态学,各组小鼠感染5 d后处死,对肺指数及IV-RNA表达进行统计学分析.结果:与正常组比较,模型组小鼠肺指数显著增加,2组比较差异有高度统计意义(P<0.01);给药后中药组和病毒唑组小鼠肺指数显著下降,与模型组比较,P<0.01.但中药组与病毒唑组之间差异无统计意义(P>0.05).正常组肺组织未检测到IV-RNA,模型组检测到大量的IV-RNA,2组比较差异有高度统计意义(P<0.01);中药组和病毒唑组IV-RNA水平均低于模型组,差异有高度统计意义(P<0.01);但中药组与病毒唑组之间差异无统计意义(P>0.05).结论:银翘散主要活性成分对小鼠流感病毒性肺炎有较好的治疗作用.