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目的 探讨FBXW7对结直肠癌细胞中热休克转录因子1(HSF1)表达和定位的影响。方法 Western blot法检测敲除FBXW7及WT的结直肠癌细胞系HCT116和DLD1中HSF1及pHSF1Ser326蛋白的表达;免疫荧光和Western blot检测在热休克及恢复期细胞中pHSF1Ser326的核蛋白表达和定位。结果 过表达FBXW7α的DLD1细胞中HSF1蛋白表达显著降低(P<0.01);敲除FBXW7的HCT116和DLD1细胞中HSF1和pHSF1Ser326总蛋白表达显著升高(均P<0.05)。与WT组比较,敲除FBXW7的细胞中HSF1和pHSF1Ser326主要累积在细胞核,而胞质表达较弱;温热刺激后,WT细胞中HSF1及pHSF1Ser326表达恢复至未刺激水平,而敲除FBXW7的细胞中HSF1及pHSF1Ser326在核中有较强表达(均P<0.01)。结论 敲除FBXW7的结直肠癌细胞热刺激后,细胞核HSF1水平恢复受阻,可能与缺失FBXW7不能降解胞核HSF1有关。 相似文献
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目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549、H1299、H358、H441多西他赛(docetaxel,DTX)耐药细胞株与上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系,并初步研究逆转E-cadherin的表达对NSCLC细胞多西他赛耐药性的影响。方法:应用Real-time PCR 和Western blot 方法检测上皮间质转化相关标志物E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Snail在亲本细胞和多西他赛耐药细胞之间的表达差异;应用慢病毒载体介导构建稳定表达E-cadherin的NSCLC多西他赛耐药细胞;MTS法检测NSCLC细胞多西他赛耐药特性。结果:与A549、H1299、H358、H441四株亲本细胞相比,多西他赛耐药细胞(A549DTX,H1299DTX,H358DTX,H441DTX)形态呈长梭形,呈上皮间质转化(EMT)样改变。多西他赛耐药细胞中E-cadherin表达下调,Vimentin、N-cadherin、Snail表达上调。成功构建了过表达E-cadherin的NSCLC多西他赛耐药细胞。过表达E-cadherin细胞株细胞形态与空载对照细胞株以及亲本耐药细胞株相比呈间质上皮转化(MET)样改变。MTS结果显示四种不同E-cadherin过表达的NSCLC多西他赛耐药细胞对多西他赛的敏感性均强于其亲本耐药细胞和空载对照细胞。结论:NSCLC多西他赛耐药细胞发生EMT样改变,上调E-cadherin能增加NSCLC多西他赛耐药细胞对多西他赛的敏感性。 相似文献
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生理学设计性实验评价与考核模式的探讨 总被引:7,自引:0,他引:7
设计性实验对提高学生的综合素质培、养创新能力有重要的作用。设计性实验的评价应强调评价主体和评价过程的多元化 ,重视评价实验的动态变化 ,注重个性化和差异性评价。评价的原则应包含多元化、开放性、实践性、鼓励性、双向性、个性化等方面。采取经常性考核和设计性实验考核结合的方式 ,考评内容有设计质量、实验结果、实验报告、操作能力和创新能力等。设计性实验的开展和评价是提高实验教学水平的有效方法 ,是促进学生科研活动开展的途径。 相似文献
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白花丹水煎液对小鼠四氯化碳肝损害的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
[目的 ]本实验观察白花丹水煎液对小鼠急慢性肝损害的保护作用。 [方法 ]应用四氯化碳建立化学性肝损害动物模型 ,以测定血清谷丙氨酸转换酶 (ALT)、谷草氨基酸转换酶 (AST)活性和肝指数 (HI)为指标观察不同剂量白花丹水煎液对肝脏损害的保护作用。 [结果 ]检测表明 ,不同剂量白花丹水煎液 0 2 5 g·kg-1,0 5 g·kg-1和 1 0 g·kg-1均显著降低化学性肝损害小鼠血中ALT、AST的活性和小鼠肝指数 ,与模型组相比差异存在显著性 (P <0 0 1)。与治疗组相比 ,差异无显著性(P >0 0 5 )。 [结论 ]不同剂量的白花丹水煎液对CCl4导致的小鼠急、慢性化学性肝损害均有一定的保护作用。 相似文献
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程序性死亡受体1(PD1)和程序性死亡配体1(PD-L1)是重要的负性免疫调节因子。T细胞表面PD1受体与肿瘤细胞表面表达的PD-L1配体结合,向细胞内传递调控信号,抑制T细胞活化与增殖,从而介导肿瘤细胞的免疫逃逸及对常规放化疗的抵抗。近年来,针对PD1/PD-L1的单克隆抗体靶向药物在非小细胞肺癌和黑色素瘤等实体肿瘤治疗中均取得了较好的疗效,显著改善了部分肿瘤患者的临床进展和不良预后。本文综述了PD1/PD-L1在肿瘤发生、发展和转移中的重要作用以及PD1/PD-L1抗体应用于肿瘤免疫治疗中的最新进展。 相似文献
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目的 探讨泛素连接酶Cullin 7(Cul7)在人胎盘绒毛外滋养层细胞HTR8/SVneo中对Notch1蛋白稳定性的影响,初步阐明Cul7对Notch1蛋白表达的调控作用。方法 Western blot法检测Cul7基因敲除的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)中Notch1蛋白表达的变化。慢病毒稳定转染构建Cul7低表达HTR8/SVneo细胞系,通过real-time PCR检测Notch1 mRNA的表达。Western blot法检测干扰或过表达Cul7后Notch1蛋白的表达。应用蛋白免疫共沉淀(Co-IP)确定Cul7与Notch1蛋白结合情况。结果 与野生型MEF细胞比较,Cul7基因敲除MEF细胞Notch1蛋白表达增加。在HTR8/SVneo细胞也观察到干扰Cul7后Notch1蛋白表达显著升高,但对Notch1 mRNA的表达无显著影响。用放线菌酮(CHX)处理细胞后,与对照组比较干扰Cul7使Notch1蛋白降解的半衰期延长。将Flag-Notch1重组质粒和HA-Cul7真核表达质粒导入HTR8/SVneo细胞后,Co-IP结果显示外源性Cul7与Notch1无结合。结论 Cul7调控Notch1降解速度,但对Notch1转录表达无显著影响。Cul7可能通过间接方式调控Notch1蛋白稳定性。 相似文献
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白花丹水煎液对四氯化碳慢性肝损伤小鼠肝组织脂质过氧化的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨白花丹水煎液对四氯化碳(CCl4)所致慢性肝损伤小鼠脂质过氧化的影响。方法:采用CCl4建立小鼠慢性肝损伤动物模型,连续6周经口给0.25、0.5、1.0g/kg 3种剂量的白花丹水煎液,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性、肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,并测算肝指数(HI)。结果:3种剂量组均显著降低肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,而肝匀浆SOD含量上升、MDA含量下降,与模型组相比差异有统计学意义(P〈0.01);与治疗组相比,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:白花丹水煎液具有抑制CCl4所致小鼠慢性肝损伤组织脂质过氧化的作用。 相似文献
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Cullin7 (Cul7)作为核心支架蛋白与ROC1、Skp1和Fbxw8一起构成SCF (Skp1-Cullin-F-box) E3泛素连接酶复合物.Cul7是对人和小鼠生长发育具有重要调控作用的基因.Cul7对细胞转化、p53活性调节、细胞衰老以及细胞凋亡的调控作用,说明其具有癌基因的特征.Cul7在乳腺癌、肺癌、肝细胞癌、胰腺癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤中高表达,通过参与细胞转化和抑制细胞凋亡等机制促进肿瘤的发生发展. 相似文献