NF-kB核酸对大鼠血管平滑肌细胞炎症反应和凋亡的影响

目的 探讨NF-kB核酸对增殖的血管平滑肌细胞炎症反应和凋亡的影响。方法大鼠胸主动脉平滑肌细胞传代培养，实验共分六组。阳离子脂质体转染法将NF-kB寡核苷酸导人血管平滑肌细胞，检测细胞凋亡、细胞内NF-kBp65基因表达以及ICAM-1、VCAM-1、MCP-1蛋白合成情况。结果血管平滑肌细胞转染NF-kB反义或诱骗寡核苷酸后．细胞凋亡增强，凋亡时间延长。反义组NF-kBp65蛋白质表达较正义组降低（P〈0．05）；反义＋诱骗联合干预并未优于反义组单独治疗，但与诱骗组相比NF-kBp65的蛋白质表达降低（P〈0．05）。反义组、诱骗组的ICAM-1、VCAM-1、MCP-1蛋白质表达较相应的对照正义组、诱骗对照组均降低（P〈0．05）。结论 NF-kB的反义和诱骗寡核苷酸均能抑制血管平滑肌细胞ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的蛋白质表达，抑制血管平滑肌细胞增殖，使细胞凋亡增强；NF-kB反义寡核苷酸及反义＋诱骗寡核苷酸联合干预可减少NF-kB生成。     

粪便致梗阻性难产子宫破裂1例

子宫破裂是指孕妇在分娩期或妊娠期晚期发生的子宫不同程度的破裂,是产科极为严重的并发症,可对产妇及胎儿的生命造成严重的危害[1].子宫破裂孕产妇的死亡率可达5％,其围产儿死亡率高达50％～90％[2].现将我院收治的自发性子宫破裂1例患者报告如下. 1病历摘要 患者女,23岁,体质量67 kg,越南人.以“停经40+2周,下腹痛16个小时”为主诉于2014-12 14日06:40入院.自述末次月经2014-03-06,停经40多天自觉轻度恶心、呕吐、厌食、乏力等早孕反应,持续至3个月后缓解.停经14-2周行B超检查示:中期宫内妊娠(相当于13+6周).     

血清炎症因子和S100B与进展性脑梗死患者神经功能缺损、梗死体积及预后的相关性研究

目的 探讨血清炎症因子和S100钙结合蛋白B(S100B)与进展性脑梗死患者神经功能缺损、梗死体积及预后的相关性。方法 回顾性选择2021年1月至12月遂宁市中医院收治住院治疗的急性脑梗死患者96例,根据入院后病情恶化情况将其分为进展性脑梗死组(n=43)和非进展性脑梗死组(n=53)。根据入院时国立卫生研究院卒中量表NIHSS评分不同将进展性脑梗死患者分为轻度神经功能缺损组(n=8,<4分)、中度神经功能缺损组(n=21,4～15分)、重度神经功能缺损组(n=14,>15分)。根据梗死体积不同将进展性脑梗死患者分为大梗死灶组(n=6,>10 cm³)、纳入中梗死灶组(n=14,4～10 cm³)、小梗死灶组(n=23,<4 cm³)。根据将改良Rankin量表(mRS)评分不同将进展性脑梗死患者分为预后良好组(n=32,<3分)、预后不良组(n=11,3～6分)。测定血清炎症因子[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞(WBC)、中性粒细胞(NEU)]和S100B水平,分析血清炎症因子和S...     

肝细胞癌抗原587基因甲基化调节HCA587-TAF9互作介导肝细胞癌的侵袭和迁移

目的：研究肝细胞癌抗原587（HCA587）在肝细胞癌（HCC）组织中的表达和启动子区甲基化状态,探 讨HCA587对肝细胞癌细胞迁移和侵袭的调节机制。方法：纳入肝细胞癌肿瘤组织114 例,分为HCC组和癌旁 非癌组织（NT）组。荧光定量PCR 检测HCA587的mRNA表达量;免疫组织化学和免疫印迹检测HCC组和NT 组组织中HCA587的蛋白表达。基于甲基化敏感酶和甲基化依赖酶酶切,并结合荧光定量PCR 方法分析肝细胞 癌组织中HCA587基因启动子区甲基化状态。构建重组HCA587过表达质粒（pcDNA3.1-HCA587）,培养人肝 细胞癌细胞系BEL-7404,转染pcDNA3.1-HCA587 或者使用甲基化抑制剂5-Azacytidin 处理细胞。细胞分为对照 组、5-Azacytidin 组、pcDNA3.1-HCA587 组和pcDNA3.1-HCA587 空载体（EV） 组。免疫沉淀法分析HCA587 与TATA 盒结合蛋白相关因子9（TAF9）的结合,Transwell 小室检测细胞的迁移和侵袭能力。结果： 与癌旁非 癌组织组比,HCC组的HCA587在mRNA和蛋白水平均上调。免疫组织化学证实HCC组组织中HCA587阳性表 达。HCC组中HCA587的启动子区CpG 岛甲基化水平降低。体外实验结果显示,5-Azacytidin 促进BEL-7404 中 HCA587的表达、HCA587与TAF9的结合、BEL-7404 细胞的迁移和侵袭能力,但抑制HCA587甲基化水平;另外, HCA587过表达增强BEL-7404 细胞的迁移和侵袭能力。结论：HCA587高表达或抑制其启动子区甲基化可以促进 HCA587与TAF9的结合及导致肝细胞癌细胞的迁移和侵袭。     

“从阴引阳法”从腹治腰的临床思路探究

腰痛属中医“痹病”范畴,病位在筋、骨,中医理论认为其是因风、寒、湿邪致经筋挛缩不伸。现代医学认为腰痛的原因仍与椎间盘相关,而忽视来源于其周围肌群、关节、神经的关联。笔者在临床观察中发现,对于仅有轻微的椎间盘膨出却存在明显的疼痛症状,运用常规针刺治疗后疗效欠佳,此类腰痛常与患者腹部区域出现相关性阳性反应点密切相关。当在腰痛局部施术难以获效时,可对其腹区进行查体,并对腹区阳性点进行针刺,即从阴引阳治法可获显效。正如《黄帝内经》：“用针之要,在于知调阴与阳。”即在常规治疗收效甚微时,可应用针刺配合手法,从阴引阳,调节阴阳平衡,恢复“阴平阳秘”的状态,符合中医治病理念的阴阳整体观。笔者临证中总结腰痛的发生、轻重与脊柱的结构密切相关。大多数医师将腰痛的焦点集中在腰椎后侧,忽略腹肌和髂腰肌。又因“腹属阴,腰背属阳”,《黄帝内经》：“故善用针者,从阴引阳,从阳引阴。”有别于痹证治疗时“以痛为腧”的原则,故认为“从腹治腰”是关键。文章以腰痛治腹的诊疗为主,根据中医经络理论结合现代筋膜学理论及生物力学,基于临床实录对腰痛病的治疗经验加以阐述,以飨同道。     

卡前列素氨丁三醇在妊娠期高血压疾病中的应用

目的 探讨卡前列素氨丁三醇在妊娠期高血压疾病中的应用.方法 将妊娠期高血压疾病患者200例作为治疗组,另选200例同期正常妊娠者作为对照组.两组均行腰硬联合麻醉下子宫下段剖宫产术.对照组术中胎儿娩出后即刻宫壁注射催产素20 IU,治疗组胎儿娩出后一次性宫体注射卡前列素氨丁三醇250 μg,两组术后持续静脉滴注缩宫素20 IU维持6h.观察两组手术中和手术后2h、24 h内的出血情况和产后出血的发生率、产后24 h红细胞计数及Hb水平、产后血压的变化.结果 与对照组比较,治疗组术后2h、24 h内的出血量较少,产后出血的发生率较低（P值均＜0.05）；两组用药后血压的变化比较,差异无统计学意义（P＞0.05）；两组均无明显的不良反应.结论 卡前列素氨丁三醇是预防妊娠期高血压疾病产后出血的有效措施,值得选择性推广应用.     

核因子κB反义和诱骗寡核苷酸联合作用对培养人脐静脉内皮细胞血管细胞粘附分子1表达的影响

为探讨在人脐静脉内皮细胞中，核因子κB的反义核酸及诱骗性寡核苷酸联合作用对肿瘤坏死因子α诱导的血管细胞粘附分子1表达的影响，采用培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304，分别和联合应用反义核酸和诱骗性寡核苷酸干预．流式细胞仪检测寡核苷酸转染效率．并用逆转录一聚合酶链反应和流式细胞仪测定其对肿瘤坏死因子α诱导的血管细胞粘附分子1的表达。结果发现．联合应用反义核酸及诱骗性寡核苷酸，可使肿瘤坏死因子α刺激的人脐静脉内皮细胞中血管细胞粘附分子1的表达明显下调，且下调幅度显著大于反义核酸或诱骗性寡核苷酸的单独作用。由此提示．核因子κB的反义核酸及诱骗性寡核苷酸可显著下调核因子κB调控的与动脉粥样硬化相关的粘附分子的表达，且联合作用效果强于单独作用，可能为核酸干预防治动脉粥样硬化提供新的思路。     

Heymann肾炎受体相关蛋白羧基端融合蛋白的表达及其对nephrin表达和分布的影响

目的 探讨Heymann肾炎(HN)受体相关蛋白(RAP)羧基端抗原决定簇在HN发病机制中的作用.方法 通过PCR及分子克隆技术,构建RAP全长和羧基端多肽的原核融合表达载体,表达融合蛋白,制备针对RAP全长和羧基端融合蛋白的抗血清,免疫荧光法检测其在肾组织中的定位.利用该抗血清制备两种HN模型,测定24 h尿蛋白定量,免疫荧光法检测肾组织中nephrin表达和分布,并比较组间差异.结果 成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1-RAP1083/324,表达了RAP全长(相对分子质量,70×103)和羧基端(40×103)的融合蛋白,并制备了相应的抗血清,免疫荧光显示制备的两种抗血清均对肾小管上皮细胞有高亲和性.利用两种抗血清成功制备了HN模型,模型组大鼠24 h尿蛋白定量分别达(21.31±4.15)mg和(19.05±3.72)mg,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01).nephrin在RAP324诱发的大鼠HN肾组织中表达较RAP1083中减弱明显.结论 Heymann肾炎RAP羧基端存在病理性抗原决定簇,能够诱发大鼠HN模型.nephrin在两种HN中表达减少,推测RAP作用机制与减少肾小球内nephrin的表达有关.     

高效液相色谱法测定秋鼠麴草中总黄酮的含量

目的建立秋鼠麴草提取物中总黄酮含量高效液相色谱的测定方法。方法选择乙醇浓度、料液比和提取时间这3个因素进行正交试验,初步优选出常规热回流法提取总黄酮的最佳工艺。色谱柱为HypersilODS2 C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为甲醇∶水=33∶67;紫外检测波长为359 nm;流速1.0 ml/min;柱温35℃;以芦丁为对照计算总黄酮含量;进样量10μl。结果最优的总黄酮提取条件为：60%乙醇溶液、料液比为1∶35、提取时间为60 min。芦丁在0.013 2～0.105 6 mg/ml范围内线性良好,样品平均回收率为98.98%,相对标准偏差（RSD）为1.86%。结论利用高效液相色谱法测定秋鼠麴草热回流提取物中总黄酮含量的方法回收率高、精密度好、重复性好,能为药材鼠麴草的质量评价和控制提供可行方法。