应用套式聚合酶链反应及血抗原检测诊断骨髓移植受者巨细胞病毒感染

人巨细胞病毒 (ＨＣＭＶ)感染是器官移植受者术后免疫抑制状态下最常见的并发症之一 ,所引起的间质性肺炎可使患者致死。建立敏感的ＨＣＭＶ检测方法 ,及时应用抗病毒治疗 ,对于预防和减少ＨＣＭＶ疾病的发生 ,降低移植受者的死亡率有重要意义。本研究针对ＢＭＴ受者 ,通过应用套式聚合酶链反应 (ｎＰＣＲ)及免疫组化技术检测骨髓移植 (ＢＭＴ)受者外周血中ＨＣＭＶ＿ＤＮＡ及ＨＣＭＶ抗原 ,动态研究ＢＭＴ受者ＨＣＭＶ感染情况。一、材料１．标本来源于１９９９年８月～２０００年４月浙江省骨髓移植受者９例 ,其中男性５例 ,女性４例 ,平…     

血管内皮细胞功能紊乱与血管老化

血管老化指血管结构和功能的退行性改变,引起动脉硬化,导致循环障碍,是冠心病、心绞痛、心肌梗死、高血压等心血管疾病的病理基础.血管老化的研究目前主要集中在血管内皮细胞以及活性物质改变.本文综述了血管内皮功能障碍以及与动脉粥样硬化等内容.     

福尔马林灭活RSV疫苗增强性疾病模型建立及特征研究

以福尔马林灭活呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗(兀-RSV)预防接种的婴儿或学龄前儿童,自然感染RSV后较之未接种疫苗感染者表现出更为严重的支气管痉挛性肺炎[1].此类因疫苗免疫接种使相应病原微生物感染时致病作用增强的疾病或现象,称为"疫苗增强性疾病"(vaccine enhanced disease.VED).目前关于VED免疫病理调控机制的研究多建立在动物模型基础上[2].本研究通过制备FI-RSV疫苗,建立BALB/c小鼠FI-RSV相关VED模型,定义其病毒滴度、抗体水平以及病理诊断特征,为进一步研究RSV相关VED的分子机制提供实验资料.     

普通型腺癌伴神经内分泌分化与临床病理及预后关系的研究

本课题采用铬粒素免疫细胞化学方法，首先对五种脏器共356例普通型腺癌中NE细胞及其激素产物群体结构进行了研究，区分为NE细胞阳性与阴性两组，然后对阳性组的NE细胞进一步作9种激素标记。在此基础上又重点应用PSA等6种指标，对130例乳腺癌神经内分泌分化与肿瘤生物学行为的关系进行了开拓性研究。     

老年人下消化道出血的病因和诊断

下消化道出血在老年人中常见。病因复杂,诊断困难。本文就本院1982～1986年住院的老年下消化道出血病例,进行回顾性讨论,以进一步探讨老年人下消化道出血的病因和诊断。     

器官移植受者人巨细胞病毒糖蛋白H基因型分析

目的分析器官移植受者人巨细胞病毒（HCMV）临床分离株糖蛋白H基因型，为进一步研究其致病性、免疫性以及研制HCMV亚单位疫苗提供依据。方法以巢式聚合酶链反应（nested—PCR）检测97例器官移植受者外周血细胞中的巨细胞病毒gH基因并测序分型。结果有23例移植受者的标本经nPCR检出gH基因阳性，阳性率为23．71％，其中骨髓移植受者阳性率10．31％，肝移植受者阳性率5．15％，肾移植受者阳性率8．25％。在23例HCMV分离株中，20例得到gH基因型结果，其中gH1型10例，占50％，gH2型6例，占30％，gH1、2混合型4例，占20％，呈散在分布（χ2=4．00，P〉0．05）；gH基因型在各移植类型间也呈散在分布（χ2=5．652，P〉0．05）。结论HCMV临床分离株糖蛋白基因分别属于gH基因型1～2型，呈散在分布。     

普通型腺癌伴神经内分泌分化与临床病理及预后关系的研究

本课题采用铬粒素免疫细胞化学方法,首先对五种脏器共356例普通型腺癌中 NE 细胞及其激素产物群体结构进行了研究,区分为 NE 细胞阳性与阴性两组,然后对阳性组的NE 细胞进一步作9种激素标记。在此基础上又重点应用 PSA等6种指标,对130例乳腺癌神经内分泌分化与肿瘤生物学行为的关系进行了开拓性研究。     

超声介导微泡空化增加鼠肺内皮细胞基因转染及其作用机制

目的 初步探讨超声介导声学微泡"空化效应"对鼠肺微血管内皮细胞基因转染的影响及其作用机制.方法 6孔板培养鼠肺微血管内皮细胞,加20μg报告基因质粒EGFP及10%白蛋白微泡(全氟显),连续波超声照射进行微泡"空化",观察不同照射时间相同机械指数(MI=1.0)(A组:30 s;B组:60 s;C组:90 s;D组:120 s;E组:180 s)及不同MI相同照射时间(60 s)(B1组:MI 0.5;B2组:MI 0.75;B3组:MI 1.0;B4组:MI 1.5;B5组:MI 1.8)报告基因转染情况.以激光共聚焦观察细胞膜膜流动性、免疫荧光观察细胞微管蛋白及微丝蛋白.结果 反应细胞膜流动性的荧光恢复强度分别为A组0.173±0.013、B组0.250±0.037、C组0.364±0.022、D组0.381±0.019、E组0.395±0.009(与A组相比,P＜0.01);B1组0.171±0.017、B2组0.255±0.026、B3组0.378±0.007、B4组0.382±0.009、B5组0.397±0.008(与Bl组相比,P＜0.01).反应细胞微管蛋白变化的荧光强度分别为A组159.15±4.79、B组188.23±6.20、C组205.80±4.48、D组208.99±8.34、E组213.70±5.09(与A组相比,P＜0.01);B1组176.84±3.10、B2组187.57±14.52、B3组206.41±11.66、B4组220.12±13.39、B5组221.16±12.78(与B1组相比,P＜0.01);各组微丝蛋白结构完整,无断裂及紊乱,荧光强度差别无统计学差异.结论 超声介导微泡空化能增加基因转染率,对细胞骨架无明显损伤;当MI为1.0时,随照时延长细胞膜流动性及细胞骨架微管蛋白荧光强度增强;当照射时间为60 s,随MI增高细胞膜流动性及细胞骨架微管蛋白荧光增强,但两种条件下均存在一定阈值;微丝蛋白荧光强度不随超声照射模式而改变.     

特异性免疫在呼吸道合胞病毒疫苗增强疾病过程中的作用

呼吸道合胞病毒（RSV）疫苗可诱发疫苗增强疾病，以肺组织广泛的炎细胞浸润和嗜酸性粒细胞增多为典型特征。探索RSV疫苗增强疾病的免疫机制，尤其是宿主体液和细胞免疫反应不平衡在疫苗增强疾病过程中的作用，有助于安全有效的RSV疫苗的研究。     

聚合酶链反应-反向杂交快速检测巨细胞病毒糖蛋白gB、gH基因型变异

目的 建立一种简便、快速、敏感和特异的检测巨细胞病毒（HCMV）糖蛋白gB、gH基因型变异的方法。方法 以HCMV糖蛋白基因gH、gBn、gBclv为靶序列，设计17条具有型特异性的寡核苷酸探针，聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段，反向杂交检测23例中国和6例德国移植患者HCMVgH、gBn、gBclv基因型变异，其结果与直接测序进行比较。结果 23例中国患者HCMV糖蛋白为gH1和2型，gB1、2和3型，未见gB4型；而6例德国患者的HCMV糖蛋白涵盖gH1和2型，gB1、2、3及4型。中、德国两患者均可同时感染2种不同基因型的病毒株。反向杂交技术对检测患者同时感染不同基因型病毒株优于直接测序。结论 PCR－反向杂交技术具有简便、快速、敏感和特异的特点，适用于临床实验室检测HCMV糖蛋白基因型变异。