健脾化瘀祛痰法对apoA-Ⅰ/AMPK/CPT1A信号通路介导的脂肪酸β氧化改善血脂异常的调控作用及其机制

目的 探讨健脾化瘀祛痰法对高脂血症大鼠血脂异常的影响,基于载脂蛋白AⅠ（apoA-Ⅰ）/单磷酸腺苷激活蛋白激酶（AMPK）/ 肉毒碱棕榈酰转移酶ⅠA（CPT1A）信号通路阐明其分子机制。 方法 32只大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组（给予1.575 mg·kg^－1·d^－1辛伐他汀）和化瘀祛痰方（HYQTP）组（给予13.846 mg·kg^－1·d^－1化瘀祛痰方药物）,每组8只。空白对照组大鼠给予正常饮食,模型组、辛伐他汀组和HYQTP组大鼠给予高脂饲料,建立高脂血症大鼠模型。8周后,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠灌胃相应药物;空白对照组和模型组大鼠给予等体积生理盐水。全自动生化分析仪检测各组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）水平,HE染色观察各组大鼠肝组织病理形态表现,油红O染色观察各组大鼠肝组织脂质沉积情况,检测各组大鼠肝组织中TG水平,ELISA法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ、B族Ⅰ型清道夫受体（SR-B1）和CPT1A mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肝组织中高密度脂蛋白受体（SR-B1）、AMPK、磷酸化AMPK（p-AMPK）和CPT1A蛋白表达水平。 结果 与空白对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-c水平升高（P<0.05）,HDL-c水平降低（P<0.05）;肝组织中TG水平升高（P<0.05）;肝细胞出现明显肿胀,体积增大;并且可见明显红色脂滴分布;肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平降低（P<0.05）,p-AMPK/AMPK比值降低（P<0.05）;与模型组比较,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠血清TC、TG 和 LDL-c水平降低（P<0.05）,HDL-c水平升高（P<0.05）;肝组织中TG水平降低（P<0.05）;肝细胞肿胀明显减轻,脂滴分布明显减少,肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平升高（P<0.05）,p-AMPK/AMPK比值升高（P<0.05）。 结论 健脾化瘀祛痰法能够改善高脂血症大鼠血脂异常,减轻肝脏损伤及脂质沉积,其作用机制可能与调控apoA-1/AMPK/CPT1A信号通路促进大鼠脂肪酸β氧化有关。     

聚乙二醇修饰羊生长激素的初步研究

使用非抗原性聚乙二醇(PEG)修饰羊生长激素(OVine growth hormone,oGH),分别获得氨基修饰率为35％和86％的PEG-oGH。氨基修饰率为35％的PEG-oGH仍保留了与天然oGH抗血清的反应性,但修饰率为86％的PEG-oGH则丧失了。荧光光谱分析表明,与天然oGH比较,修饰率为35％的PEG-OGH仅其荧光强度有所减弱,光谱图并未改变,但修饰率为86％的PEG-oGH则发生了明显的图谱变化。体内结合试验表明,两种修饰oGH与肝受体结合之能力均有明显降低。     

化瘀祛痰方通过调节ApoE-/-小鼠胆固醇代谢相关基因表达抗动脉粥样硬化

目的 观察化瘀祛痰方对载脂蛋白E基因敲除（ApoE^－/－）小鼠粥样斑块以及胆固醇代谢相关基因的影响,探讨化瘀祛痰方抗动脉粥样硬化（As）作用及可能的机制。方法 10只C57BL/6/J小鼠作为空白对照组,30只ApoE^－/－小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰组［20 g/（kg·d）］和辛伐他汀组［0.005 g/（kg·d）］。全自动生化分析仪检测血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）,HE染色观察主动脉结构及动脉粥样硬化程度,油红O染色观察主动脉脂质沉积,RT-PCR和Western blot检测肝脏低密度脂蛋白受体（LDLR）、卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）及主动脉CD36 mRNA和蛋白表达水平,流式细胞术检测腹腔巨噬细胞CD36蛋白表达。结果 与空白对照组相比,模型组小鼠血清TC、TG、LDLC水平显著升高;HDLC水平显著降低,主动脉管腔中形成较大粥样斑块,管壁形成大量脂质沉积,肝脏LDLR、LCAT 基因表达显著下调,主动脉、巨噬细胞CD36基因表达显著上调。通过药物干预,与模型组相比,化瘀祛痰组和辛伐他汀组小鼠TC、TG、LDLC水平显著下降,HDLC显著升高,主动脉管腔中粥样斑块面积和管壁脂质沉积量明显减少,肝脏LDLR、LCAT 基因表达显著上调,主动脉、巨噬细胞CD36基因表达显著下调。结论 化瘀祛痰方可抑制ApoE^－/－小鼠主动脉斑块形成,其机制可能与调控血脂及胆固醇代谢相关基因LDLR、LCAT及CD36的表达有关。     

香砂六君子汤调控CircRNA-0067835对脾虚高脂血症大鼠胆固醇外排的影响

目的 探讨香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠脂质沉积的影响及分子生物学机制.方法 30只SD大鼠随机分成空白对照组、高脂组、脾虚高脂组、香砂六君子汤高剂量组及香砂六君子汤正常剂量组.使用不节饮食加游泳直至力竭的复合方法15 d,建立脾虚模型.随后饲喂高脂饲料10周,检测大鼠血脂水平,确定高脂血症模型复制成功后,香砂六君子汤...     

几种因素在L-天冬酰胺酶化学修饰中对酶活力及抗原性的影响

为了寻求在较好地保持酶活力的同时解除L-天冬酰胺酶抗原性的方法,采用不同分子量的乙酸酐、右旋糖酐和单甲氧基聚乙二醇,作为修饰剂和不同的修饰方法对该酶进行了化学修饰。结果表明在保持酶活性和降低抗原性方面,大分子修饰剂右旋糖酐、单甲氧基聚乙二醇优于小分子乙酸酐,底物保护修饰优于直接修饰;活化PEG,优于活化PEG₁。在底物保护下的PEG,修饰酶其抗原性完全解除的同时,酶活力保持在30%以上。     

基于大学生科研创新能力培养的细胞培养实验平台管理探索

细胞培养实验平台是进行细胞培养以及细胞相关研究工作的重要场所,是大学生开展科技创新活动的有力依托和平台。文章从高校细胞培养实验平台在大学生科研创新能力培养中存在的问题为切入点,以辽宁中医药大学细胞培养实验平台为例,探讨细胞培养实验平台的管理模式,重点从鼓励学生参与细胞培养实验平台的管理、创新实验室培训及准入流程、充分发挥高端大型仪器设备在大学生创新能力培养中的作用三个方面,提出了面向大学生创新能力培养的细胞培养实验平台管理策略。