核酸杂交反应中影响因素分析

以光敏生物素标记的R3 cDNA克隆为模型,采用正交设计的方法,对影响核酸杂交反应的主要因素:杂交反应温度,反应时间,探针浓度及甲酰胺浓度作了综合性分析。当探针浓度为800μg/L,甲酰胺浓度为10mol/L,50℃杂交反应6h,可获得最高灵敏度(10pg)。     

Apoptin基因/壳聚糖纳米粒的制备及其对U937细胞凋亡的诱导作用

目的以羧甲基壳聚糖为基质材料,制备apoptin基因缓释微球,探讨其对U937细胞凋亡的作用。方法采用复凝聚法制备apoptin/壳聚糖微球,分别用光镜观察微球形态、内切酶研究其稳定性、DNA电泳阻滞分析apoptin/壳聚糖最佳比例、PCR测定apoptin基因作为复制摸板能力、用MTT法检测其抗肿瘤活性。结果壳聚糖与apoptin基因可形成稳定的微球,其直径在200～300之间,成球性较好,apoptin/壳聚糖微球P/N最佳质量比为5.5:1。微球能够有效防止DNA酶的降解作用,apoptin/微球载体中的基因仍具有DNA复制摸板功能,并能有效地转染U937细胞,转染48h可诱导U937细胞发生凋亡,从而抑制瘤细胞生长。结论apoptin基因与羧甲基壳聚糖可形成稳定的缓释微球,并能有效地转染肿瘤细胞,诱导肿瘤细胞发生凋亡。     

用鼠型单克隆抗体鉴定欧洲肾综合征出血热病毒抗原变异特点

本文报道了应用Puumala(Puu)病毒自然宿主—(?)鼠的脾细胞制备抗Puu单克隆抗体(McAb)的方法,并用所制的McAb对11株HFRS病毒的抗原变异进行了分析。Puu病毒为欧洲流行性肾病的病原体。近年来,尽管制备了许多抗汉坦病毒的鼠McAb,     

用抗细胞壁半乳糖—N—乙酰葡萄糖胺多糖的单克隆抗体鉴定炭疽杆菌(文摘)

本文报道了炭疽杆菌半乳糖—N—乙酰葡萄糖胺(Ga1-NAG)多糖单克隆抗体(McAbs)的制备及其特性鉴定,并用筛选的McAbs快速鉴定炭疽杆菌株。 作者用盐酸胍裂解法从粗制炭疽杆菌细胞壁中提取Ga1-NAG多糖,免疫BALB/c小鼠。从融合细胞中,筛选出对Ga1-NAG多糖特异性高的McAbs 5G4和6G6,荧光素异硫氰酸标记,分析其特性。发现McAb5G4和6G6能与纯化的细胞壁、O-脂多糖和荚膜内完整生长细胞特异性结合,证明其为抗炭疽杆菌Ga1-NAG多糖的McAbs,为IgM类(入链)。ELISA发现,0.5mol半乳糖和乳糖分别能强烈抑制McAbs 5G_4和6G6与Ga1-NAG多糖结合,而N-乙酰葡     

肿瘤特异性凋亡基因对人黑素瘤细胞凋亡诱导作用的机制研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin gene)在诱导人黑素瘤细胞A375发生凋亡时，c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用，用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375；采用流式细胞仪、蛋白印迹法(Western blot)、锥虫蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间对人黑素瘤细胞A375诱导凋亡的作用。结果表明，apoptin基因瞬间转染的人黑素瘤细胞A375可出现明显的细胞凋亡；而且凋亡细胞的数量与apoptin的转染时间有关；凋亡细胞内磷酸化型JNK蛋白随凋亡细胞数量的增加而增多，而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论：JNK信号通路的活化可能在apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。     

用Feulgen方法检测凋亡细胞的实验研究

细胞凋亡是生物体内的一个重要生命现象,发生在正常生理或疾病过程中.许多疾病特别是恶性肿瘤的发生和发展与细胞洲亡异常有关,所以对细胞凋亡的研究受到广泛关注.但目前常用于检测凋亡细胞的方法、设备和试剂要求比较高,在普通实验室较难开展.本文应用传统的DNA染色法检测凋亡细胞,取得较好的实验结果.现将研究结果报告如下.     

肿瘤特异性凋亡基因诱导A375细胞凋亡信号转导机制研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin)在诱导人黑素瘤细胞A375凋亡中的信号转导机制,用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375;采用流式细胞术检测A375细胞的凋亡;以比色法检测caspase-8和caspase-3的相对活性;Western印迹检测凋亡细胞中细胞色素C的表达量。结果表明,Apoptin基因瞬间转染的A375细胞凋亡率明显高于其他各组(P<0·01);caspase-3的活性升高,但caspase-8活性没有明显变化;细胞色素C释放量明显增多。结论:Apoptin基因可能通过促进线粒体释放细胞色素C激活caspase-3,进而诱导人黑素瘤细胞A375凋亡。     

Apoptin基因诱导A 375细胞凋亡信号转导机制

目的研究肿瘤特异性凋亡基因（apoptin）在诱导人黑色素瘤细胞A 375凋亡中的信号转导机制。方法用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑色素瘤细胞A 375;采用RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪分析检测A 375的细胞的凋亡;以比色法检测半胱天冬蛋白酶8（caspase-8）和caspase-3的相对活性。结果Apoptin基因瞬间传染的A 375细胞可出现典型的细胞凋亡所具有DNA梯状带;流式细胞术发现实验组细胞凋亡率明显高于其他各组（P〈0.01）;Cas-pase-3的活性升高,但caspase-8活性没有明显变化。结论Apoptin基因可通过激活caspase-3诱导人黑色素瘤细胞A 375凋亡。     

细胞因子与重症急性胰腺炎关系研究进展

重症急性胰腺炎(SAP)的发病机制尚未完全阐明,寻找更有效的方法阻断SAP的恶化和降低其死亡率一直是人们近年来研究的热点.目前研究表明,细胞因子在SAP的发病过程中起到很重要的作用,包括促炎细胞因子如白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、IL-12、IL-15、IL-18和肿瘤坏死因子(TNF),抗炎细胞因子IL-2、IL-4、IL-10、IL-11.现将各细胞因子与SAP关系研究进展情况综述如下.     

中药对脑血管的保护作用及其防治脑血栓形成的研究进展

脑血栓形成所致脑卒中是导致人类死亡三大疾病之一,严重威胁人类健康。该病的发病率逐年升高,因此研究血栓形成的机制,寻找有效的抗栓、溶栓药物显得尤为重要,许多中药具有抗血小板聚集、抗血栓形成的作用,因其具有多治疗靶点、不良反应极少而日益受到基础与临床医学家的关注和青睐,本文就中药对脑血管的保护作用及其防治脑血栓形成的临床及实验研究作一综述。