丹参酚酸B和姜黄素抑制大鼠肝星状细胞细胞外信号调节激酶的磷酸化

目的研究丹参酚酸B(SAB)和姜黄素(Cur)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖、活化和细胞外信号调节激酶(ERK)的作用。方法培养大鼠HSC-T6,使用SAB和Cur处理细胞,采用MTT法检测药物对细胞增殖的影响。收集裂解细胞并抽提细胞总蛋白,10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,采用Western blot法检测药物对细胞表达α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原、ERK和磷酸化ERK的影响。结果Cur剂量依赖性地抑制大鼠HSC的增殖和活化,SAB和Cur显著降低α-SMA的表达水平(P<0.01);SAB对I型胶原的分泌无影响(P>0.05)而Cur显著减少I型胶原的分泌(P<0.05)。SAB和Cur对ERK表达水平都没有显著影响(P>0.05),但是显著降低了磷酸化ERK的表达水平(P<0.01 vs.P<0.05)。结论SAB和Cur能够抑制HSC的增殖、活化和ERK的磷酸化。     

丹参酚酸B和姜黄素抑制大鼠肝星状细胞细胞外信号调节激酶的磷酸化

目的研究丹参酚酸B(SAB)和姜黄素(Cur)对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖、活化和细胞外信号调节激酶(ERK)的作用。方法培养大鼠HSC-T6,使用SAB和Cur处理细胞,采用MTT法检测药物对细胞增殖的影响。收集裂解细胞并抽提细胞总蛋白,10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,采用Western blot法检测药物对细胞表达α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原、ERK和磷酸化ERK的影响。结果Cur剂量依赖性地抑制大鼠HSC的增殖和活化,SAB和Cur显著降低α-SMA的表达水平(P<0.01);SAB对I型胶原的分泌无影响(P>0.05)而Cur显著减少I型胶原的分泌(P<0.05)。SAB和Cur对ERK表达水平都没有显著影响(P>0.05),但是显著降低了磷酸化ERK的表达水平(P<0.01 vs.P<0.05)。结论SAB和Cur能够抑制HSC的增殖、活化和ERK的磷酸化。     

丹参对转化生长因子β1刺激的NIH/3T3细胞表达I型胶原和c-fos mRNA的影响

目的:观察丹参对TGFβ1刺激的NIH/3T3成纤维细胞功能的影响.方法:将丹参灌胃给正常大鼠,分离含药血清,温育TGFβ1刺激的成纤维细胞.RT-PCR法检测I型胶原和c-fos的基因表达.结果:经TGFβ1刺激后,细胞I型胶原和c-fas的mRNA表达明显增加,丹参含药血清可分别抑制由TGFβ1引起的细胞I型胶原和c-fos的mR-NA表达的增加,结论:丹参可能通过抑制c-fos的基因表达进而抑制I型胶原的基因表达.     

三七及三七总甙对NIH/3T3细胞增殖抑制作用比较

目的:初步观察三七总甙的抗肝纤维化活性作用。方法:用三七总甙及三七冻干粉作用于体外培养NIH3T3细胞(小鼠胚胎成纤维细胞),MTT法观察细胞增殖。结果:三七及三七总甙均能抑制NIH3T3细胞增殖,并呈一定浓度依赖性。与同浓度组三七比较,三七总甙效果尤为显著。结论:三七具有抗肝纤维化活性作用,其主要化学物质基础可能是三七总甙     

姜黄素上调PPARγ抑制肝星状细胞活化标志表达的研究

目的研究姜黄素对肝星状细胞(HSC)增殖活化的影响与过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)之间的关系。方法2005年4月至2006年8月,上海中医药大学曙光医院肝病研究所采用肝脏原位灌流酶消化、Nycodenz密度梯度离心法分离培养大鼠HSC,使用药物处理细胞,MTT法检测药物对细胞增殖的影响。收集裂解细胞抽提细胞总RNA,半定量RT-PCR检测基因表达水平。抽提细胞总蛋白,10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白,Westernblot检测蛋白表达水平。结果姜黄素在10~50μmol/L范围内呈剂量依赖性抑制HSC的增殖。姜黄素对HSC增殖的抑制作用可以被PPARγ特异性拮抗剂GW9662所阻断。在原代培养第1、4、7天和传代培养的HSC中,PPARγ基因表达水平随着HSC活化程度的增加而不断下降;姜黄素显著上调PPARγ表达水平,这种作用能够被GW9662阻断。姜黄素能够在基因和翻译水平显著抑制α平滑肌肌动蛋白的表达,GW9662能够阻断姜黄素的抑制作用。结论姜黄素通过上调PPARγ抑制大鼠HSC的增殖与活化。     

Study on Effects of Extracts from Salvia Miltiorrhiza and Curcuma Longa in Inhibiting Phosphorylated Extracellular Signal Regulated Kinase Expression in Rat''''s Hepatic Stellate Cells

Objective: To study the effect of salvianolic acid B (SAB) and curcumin, the extracts of Salvia Miltiorrhiza and Curcuma Longa, on the proliferation and activation of hepatic stellate cell (HSC), and the extracellular signal regulated kinase (ERK) expression in it. Methods: Rat's HSC-T6 were cultured and treated by SAB or curcumin. The inhibitory effect on cell proliferation was determined by 3-(4, 5-dimthyl-2-2thiazoly)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide (MTT) colorimetry, and the expression levels of a smooth actin (α-SMA), collagen typeⅠ, and ERK were determined by Western blot. Results: SAB and curcumin inhibited the proliferation and activation of rat's HSC-T6 in dose-dependent fashion and significantly reduced the expression level ofα-SMA (P<0.01). Curcumin significantly reduced the expression of collagen typeⅠ(P<0.05). Both SAB and curcumin showed insignificant effect on the ERK expression level, but they could significantly reduce the level of phosphorylated-ERK expression, showing significant difference as compared with that in the control group (P<0.01 and P<0.05 respectively). Conclusion: SAB and curcumin could significantly inhibit the proliferation, activation of HSC, and the production of typeⅠcollagen in HSC, the mechanism may be associated with their inhibition on ERK phosphorylation.     

刍议知情同意书质量管理在医疗争议中的作用

目的探讨知情同意书质量管理在医疗争议中的重要作用。方法抽查我院三年11份医疗争议案例,结合相关出院病案及外院类似个案,参照国务院颁布的《医疗事故处理条例》,分析探讨医疗争议的成因,加强知情同意书质量管理。结果医疗争议的原因中以知情权被侵犯为主要原因,通过加强知情同意书质量管理,我院知情同意书进一步得到完善,近年来医疗争议的发生率明显减少。结论加强知情同意书的质量管理,是维护医患双方权益,减少医患纠纷发生的新举措,在医疗争议中起了重要作用。     

慢性阻塞性肺病动物模型在药理研究中的应用

对慢性阻塞性肺病(COPD)动物模型研究的国内外报道进行文献整理,对COPD模型的建立以及COPD治疗药物开发提供新的思路.通过中科院上海药物研究所图书数据库平台查阅近几年国内外有关慢性阻塞性肺病和动物模型为关键字的研究报道30余篇,进行分析综合.总结了几种动物作为COPD动物模型的优势和缺陷,并归纳建立COPD模型的相关方法和评价造模成功的判断相关指标,为COPD模型的建立提供参考.COPD疾病的发病过程复杂至今没能有国际统一的标准建模方法,报道多是几种方法联合进行造模;希望能为COPD的研究者选择模型提供一点参考,为新的治疗COPD的药物的开发铺路,期望在不远的将来能够建立标准化统一的COPD治疗与研究方法.