表皮生长因子对大鼠垂体瘤催乳素分泌的影响

目的　采用乙烯雌酚 (DES)诱发垂体催乳素瘤模型 ,观察表皮生长因子在垂体催乳素瘤发生发展过程中的作用及其机制 ,为探明催乳素瘤的产生机制提供佐证。方法　采用Wistar系雌性大鼠 ,切除双侧卵巢后皮下埋植DES诱发垂体增生 ,检测DES诱发不同时期大鼠垂体前叶重量和血清催乳素水平 ,放免法检测原代培养大鼠垂体前叶细胞分泌的催乳素。结果　DES诱发的大鼠垂体前叶重量明显高于对照组 ,血清中催乳素含量明显增加 ,表皮生长因子使体外培养正常大鼠垂体前叶细胞催乳素的分泌增加 ,对乙烯雌酚诱发的大鼠垂体瘤催乳素的分泌没有显著作用。结论　表皮生长因子对乙烯雌酚诱发的大鼠垂体瘤催乳素的分泌没有显著性的影响 ,催乳素瘤细胞对表皮生长因子的反应性下降。     

地塞米松预处理对氧糖剥夺大鼠血脑屏障通透性的影响

目的探讨地塞米松(dexamethasone,DEX)对氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)条件下大鼠血脑屏障通透性的影响。方法提取纯化大鼠脑微血管内皮细胞,建立血脑屏障OGD模型。在OGD不同时间点(0、30、60 min),以及DEX预处理OGD 60min时,应用辣根过氧化物酶渗漏实验分析血脑屏障的通透性;应用RT-PCR和western blot法分析大鼠脑微血管内皮细胞的紧密连接相关蛋白claudin-5的mRNA和蛋白的表达变化;同时应用免疫荧光方法观察细胞膜上claudin-5的变化。结果与对照组相比,OGD 30、60min,辣根过氧化物酶流量均显著升高;与OGD 60min相比,DEX预处理显著降低了辣根过氧化物酶流量。与对照组相比,OGD30、60min,claudin-5的mRNA和蛋白表达水平均显著降低;与OGD 60min相比,DEX预处理显著增加了claudin-5的mRNA和蛋白表达。免疫荧光观察claudin-5在细胞膜上的表达,与对照组相比,OGD 60min时claudin-5的表达明显减少,DEX预处理后显著增加了claudin-5的表达。结论 DEX预处理降低了OGD条件下的血脑屏障通透性,其机制之一是DEX增加紧密连接相关蛋白claudin-5的表达。     

PARP抑制剂3-AB对脂多糖诱导的帕金森病大鼠血脑屏障及多巴胺能神经元的影响

目的研究多聚ADP核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰(3-aminobenzamide,3-AB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠的血脑屏障(blood–brain barrier,BBB)及多巴胺能神经元的影响。方法大鼠随机分三组:对照组,LPS组和LPS+3-AB组。用伊文思兰渗透性实验检测血脑屏障通透性;Western blot法检测MMP-9和紧密连接蛋白ZO-1的表达;免疫组化法检测MMP-9在黑质神经元的表达。结果与对照组比较,LPS组黑质内BBB的通透性和MMP-9的表达显著增加,紧密连接蛋白相关蛋白ZO-1的表达和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞数显著降低。上述作用受到PARP抑制剂3-AB的显著抑制。结论 3-AB通过保护LPS诱导的PD大鼠的BBB进一步保护多巴胺能神经元。     

PARP抑制剂3-AB对脂多糖诱导的帕金森病大鼠保护作用及可能机制

目的研究PARP抑制剂3-氨基苯甲酰(3-aminobenzamide,3-AB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠的作用及机制。方法大鼠随机分三组:对照组,LPS组和LPS+3-AB组。免疫组化法检测黑质内酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)的表达;ELISA法检测IL-6和IL-10的蛋白含量;Western blot法检测ERK1/2,p-ERK1/2,p38MAPK,p-p38MAPK蛋白表达水平的变化。结果 LPS显著降低大鼠黑质内TH阳性细胞数,升高IL-6的表达水平,降低IL-10的表达水平,增加p-p38MAPK/p38MAPK和pERK1/2/ERK1/2的表达。PARP抑制剂3-AB显著增加TH阳性细胞数,降低IL-6的水平,增加IL-10的水平,降低pERK1/2/ERK1/2的表达,而使p-p38MAPK/p38MAPK的表达增加。结论 3-AB的脑保护作用可能与ERK1/2通路有关。     

EMAP-Ⅱ通过LKB1/AMPK/mTOR信号通路增加BTB的通透性

目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对体外血肿瘤屏障(BTB)通透性的影响及可能机制。方法建立体外BTB模型,EMAP-Ⅱ处理后,millipore电阻测量系统检测跨内皮细胞阻抗(TEER)值,采用Western blot方法检测p LKB1/LKB1、p AMPK/MAPK和p-m TORC1/m TORC1的蛋白表达水平;分别应用LKB1抑制剂radicicol、AMPK抑制剂compound C和m TORC1激活剂IGF1进行预处理后再给予EMAPⅡ,检测体外BTB模型的TEER值,Western blot方法检测紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的蛋白表达水平。结果与EMAP-Ⅱ0 h组相比,EMAP-Ⅱ可明显降低体外BTB模型的TEER值,增加p-LKB1/LKB1和p-AMPK/AMPK的表达水平,降低p-m TORC1/m TORC1的表达水平,以上指标在EMAP-Ⅱ作用1 h时效果最明显;radicicol、compound C和IGF1预处理能够部分阻断EMAP-Ⅱ的作用,使体外BTB模型的TEER值及紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平明显增加。结论 EMAP-Ⅱ能明显增加体外BTB模型通透性,其机制可能与激活LKB1/AMPK/m TOR信号通路相关。     

特异性磷酸二酯酶抑制剂sildenafil增加缓激肽对血-肿瘤屏障的通透性

目的 研究新的cGMP特异性磷酸二酯酶sildenfil抑制剂是否能增加颈动脉灌注缓激肽对脑肿瘤的血－肿瘤屏障的通透性。方法 用放射自显影方法检测单独应用sildenfil，缓激肽以及sildenfil与缓激肽伍用时血－肿瘤屏障通透性的变化。结果 sildenfil与缓激肽伍用与单独应用缓激肽相比较，能显著增加反映血－肿瘤屏障通透性的指标单向转运系数Ki值（P＜0.05）。经缓激肽灌流的肿瘤组织中cGMP含量显著增加（P＜0.05）。结论 特异性磷酸二酯酶抑制剂sildenafil与缓激肽伍用能显著增加血－肿瘤屏障的通透性，从而能够增加药物选择性地转运到脑肿瘤组织。cGMP可能是缓激肽选择性增加血－肿瘤屏障的重要因素之一。     

新的活性氧测定法

一般认为,检测动物体内生成的活性氧,多半是不可能的。如果能开发出对活性氧(O~-_2、H_2O_2、~1O_2和OH)产生特异性反应的发光试剂,活性氧在机体组织中的生成,就有可能通过检测它与发光试剂反应产生的发光而加以确定。作者已报告了通过海萤属荧光素衍生物、MCLA或CLA检测或定量研究离体生成的O_2~-以及~1O_2。这些方法,正被广泛应用于白细胞的O_2~-生成能及动物(人)的血液及组织中SOD的测定上。 MCLA与O_2~-以及~1O_2反应时发光。MCLA对O_2~-和~1O_2的反应性分别为2×10~8M~(-1)S~(-1)以及2×10~9M~(-1)S~(-1)。     

低频超声选择性开放血肿瘤屏障的实验性研究

目的 探讨低频超声对血肿瘤屏障通透性的影响.方法 试验用80只健康成年Wister大鼠.采用1MHz超声探头、功率12mW,对移植肿瘤部位照射时间为20s,按照射与否及照射后时间分为正常对照组、肿瘤对照组及实验组,测定血一肿瘤屏障通透性的改变,透射电镜观察微血管内皮细胞紧密连接及神经元超微结构改变.结果 1MHz超声照射大鼠移植瘤部位后,血-肿瘤屏障通透性先增加后恢复至正常水平,即在3h达到峰值,12h恢复到照射前的水平.透射电镜超微结构显示超声照射后引起照射部位微血管内皮细胞的紧密连接开放;同时观察到照射后胶质瘤细胞呈现不同时期凋亡的改变,而正常神经元仅有膜结构的轻微改变.结论 低频超声可以选择性、可逆性开放血肿瘤屏障,其机制可能与紧密连接的开放有关.     

雌二醇对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力及长时程增强的影响(英文)

目的探讨雌二醇对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠的学习记忆能力及长时程增强(long-term potentiation,LTP)的影响。方法大鼠随机分成卵巢切除(ovariectomy,OVX)组和雌激素替代治疗(estrogen replace treatment,ERT)组。两组大鼠均接受卵巢切除手术,ERT组大鼠随后接受雌激素替代治疗。手术2周后,两组大鼠海马内立体定位单侧注射1μLAβ1-40(10μg/μL),建立AD模型。运用水迷宫实验检测大鼠的学习和记忆能力,并进行LTP记录和比较。结果OVX组AD大鼠的水迷宫逃避潜伏期相较于ERT组明显延长(P<0.05)。此外,高频刺激(highfrequence stimulation,HFS)30min后与HFS刺激前相比,ERT组LTP增加的幅值明显高于OVX组(P<0.05)。结论雌激素替代治疗能改善AD大鼠的认知功能,调整LTP及突触可塑性。     

大鼠创伤性脑损伤后Claudin-5表达水平变化的研究

目的：探讨大鼠创伤性脑损伤后不同时间点血脑屏障通透性及Claudin-5表达水平的变化,为进一步研究创伤后脑水肿的机制及治疗时机提供理论依据。方法：大鼠随机分为对照组和脑损伤组,参照Feeney＇s的自由落体致伤法,制作大鼠顶叶局灶皮质挫裂伤模型。应用伊文兰（evansblue）法测定伤后不同时间点损伤灶皮层脑组织中EB含量;应用Westernblot法检测损伤灶脑微血管内皮细胞紧密连接相关蛋白Claudin-5的表达水平。结果：损伤灶皮层中EB含量在伤后1～6h明显增多,高峰期在3h。Westernblot结果显示损伤后1～6h,Claudin-5表达水平较对照组显著降低（P〈0.05）,3h最明显,24h与对照组差异无统计学意义。结论：大鼠顶叶局部脑挫裂伤可能通过下调紧密连接相关蛋白Claudin-5的表达水平,开放紧密连接,增加血脑屏障的通透性。