WWC3蛋白在胶质瘤干细胞中的表达及作用

目的 探讨WWC3在胶质瘤干细胞(GSCs)中的表达,以及通过调节Hippo通路调控GSCs增殖、迁移和侵袭的作用.方法 Western blot检测Hippo通路相关分子的表达.过表达WWC3后,检测MST1、LATS1和YAP的磷酸化与表达;免疫荧光检测YAP分布变化;CCK8和Transwell检测GSCs增殖、迁移和侵袭的变化.结果 WWC3、MST1和LATS1在GSCs中的表达均显著降低,而YAP的表达显著升高.过表达WWC3显著增加p-MST1/MST1、p-LATSl/LATSl、p-YAP/YAP的表达水平,抑制细胞核中YAP表达,抑制GSCs的增殖、迁移和侵袭.结论 过表达WWC3通过降低Hippo通路活性抑制GSCs的增殖、迁移和侵袭.     

经显微镜下鼻蝶垂体瘤切除术31例临床分析

目的:探讨经单鼻孔蝶窦入路垂体瘤切除术的效果及并发症,讨论该术式的技术要点。方法:总结分析2003年5月至2004年在我院接受显微镜下经鼻蝶垂体瘤切除术的31例垂体瘤患者的手术方法及结果。术前均行磁共振扫描及内分泌激素检查。术中保留鼻中隔,切除筛骨垂直板,并重建蝶窦前后壁。结果:所有患者手术结果满意,肿瘤切除完全,并发症较少。结论:该术式治疗垂体瘤有效、创伤小、恢复快同时并发症少。     

EMAP-Ⅱ通过LKB1/AMPK/mTOR信号通路增加BTB的通透性

目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对体外血肿瘤屏障(BTB)通透性的影响及可能机制。方法建立体外BTB模型,EMAP-Ⅱ处理后,millipore电阻测量系统检测跨内皮细胞阻抗(TEER)值,采用Western blot方法检测p LKB1/LKB1、p AMPK/MAPK和p-m TORC1/m TORC1的蛋白表达水平;分别应用LKB1抑制剂radicicol、AMPK抑制剂compound C和m TORC1激活剂IGF1进行预处理后再给予EMAPⅡ,检测体外BTB模型的TEER值,Western blot方法检测紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的蛋白表达水平。结果与EMAP-Ⅱ0 h组相比,EMAP-Ⅱ可明显降低体外BTB模型的TEER值,增加p-LKB1/LKB1和p-AMPK/AMPK的表达水平,降低p-m TORC1/m TORC1的表达水平,以上指标在EMAP-Ⅱ作用1 h时效果最明显;radicicol、compound C和IGF1预处理能够部分阻断EMAP-Ⅱ的作用,使体外BTB模型的TEER值及紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平明显增加。结论 EMAP-Ⅱ能明显增加体外BTB模型通透性,其机制可能与激活LKB1/AMPK/m TOR信号通路相关。     

血清D-二聚体水平与急性脑出血疾病严重程度及早期预后的关系

目的探讨血清中D-二聚体水平与急性脑出血疾病严重程度及早期预后的关系。方法收集2015年1月～2016年8月于中国医科大学附属盛京医院神经外科住院治疗的128例急性脑出血患者临床资料,患者入院24 h内均行脑CT检查明确脑出血诊断,根据1周内随访患者是否死亡将入组患者分为生存对照组与死亡病例组。分析血清D-二聚体水平与血肿量、中线移位距离、入院格拉斯哥评分(GCS评分)相关性及血清D-二聚体水平对急性脑出血患者早期预后的影响。结果 128例急性脑出血患者中,死亡病例组24例,生存对照组104例。死亡病例组患者血清D-二聚体含量、出血量、脑CT中线移位距离、手术率均显著高于对照组(均P0.001);Spearman相关性分析显示血清D-二聚体含量与患者脑出血血肿量(r=0.426)及中线移位距离(r=0.454)呈正相关性;与入院GCS评分(r=-0.486)呈负相关性(均P0.05)。血清D-二聚体水平预测急性脑出血患者1周不良预后的ROC曲线下面积为0.908(P0.05),其临界值为450.50μg/L时,灵敏度为0.960,特异度为0.827。Logistic回归分析显示,血清D-二聚体含量及中线移位距离是急性脑出血患者1周内死亡的独立危险因素(均P0.05)。结论急性脑出血患者血清中D-二聚体含量显著增加,且与血肿量、中线移位距离、入院GCS评分呈显著相关性,D-二聚体可作为急性脑出血疾病严重程度判断指标之一,D-二聚体含量增高是急性脑出血患者1周内死亡的独立危险因素。     

低频超声选择性开放血肿瘤屏障的实验性研究

目的 探讨低频超声对血肿瘤屏障通透性的影响.方法 试验用80只健康成年Wister大鼠.采用1MHz超声探头、功率12mW,对移植肿瘤部位照射时间为20s,按照射与否及照射后时间分为正常对照组、肿瘤对照组及实验组,测定血一肿瘤屏障通透性的改变,透射电镜观察微血管内皮细胞紧密连接及神经元超微结构改变.结果 1MHz超声照射大鼠移植瘤部位后,血-肿瘤屏障通透性先增加后恢复至正常水平,即在3h达到峰值,12h恢复到照射前的水平.透射电镜超微结构显示超声照射后引起照射部位微血管内皮细胞的紧密连接开放;同时观察到照射后胶质瘤细胞呈现不同时期凋亡的改变,而正常神经元仅有膜结构的轻微改变.结论 低频超声可以选择性、可逆性开放血肿瘤屏障,其机制可能与紧密连接的开放有关.     

不同移植方法对脑胶质瘤大鼠骨髓间充质干细胞迁移能力的影响

目的观察移植方法对脑质瘤大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）迁移能力的影响。方法立体定向法建立大鼠C6脑胶质瘤模型。A组大鼠用小剂量缓激肽后经荷瘤侧颈内动脉灌注BMSCs组，B组经荷瘤侧颈内动脉灌注尾静脉灌注组，每组6只。免疫组化染色显示MSCs，观察其在正常脑组织和胶质瘤组织中的数量和分布规律。结果三组均可见BMSCs在胶质瘤组织中广泛分布，A组明显多于B、C组（P〈0.01）。BMSCs主要分布于肿瘤内部，在肿瘤与正常脑组织的交界处亦有分布。结论小剂量缓激肽有助于BMSCs进入胶质瘤组织。     

miR-19a对血肿瘤屏障通透性的影响

目的研究miR-19a对血肿瘤屏障通透性的影响。方法将miR-19a模拟物转染至人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3,应用real-timePCR法检测miR-19a的表达。用过表达miR-19a的hCMEC/D3细胞和人U251胶质瘤细胞建立体外血肿瘤屏障模型,跨内皮电阻测量系统检测血肿瘤屏障跨内皮阻抗值的变化;Western blot和免疫荧光法检测体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达。结果经miR-19a模拟物转染后,hCMEC/D3细胞中miR-19a的表达水平显著升高;血肿瘤屏障跨内皮阻抗值显著下降;体外血肿瘤屏障hCMEC/D3细胞中,紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的表达水平显著降低,在细胞膜上呈不连续分布。结论 miR-19a过表达能显著增加血肿瘤屏障的通透性,其机制之一可能与降低紧密连接相关蛋白相关。     

神经干细胞移植对脑损伤大鼠皮层connexin43表达的影响

目的观察神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植治疗大鼠脑损伤前后大脑皮质神经元的缝隙连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)表达变化,探讨NSCs移植治疗对脑外伤功能恢复的作用。方法体外培养NSCs,自由落体撞击大鼠左脑大脑皮质运动感觉区以制作脑外伤模型,采用免疫组织化学、RT-PCR来检测脑外伤后2w和4w及脑外伤神经干细胞移植后2w和4w时的Cx43的表达变化。结果大鼠大脑皮质Cx43的表达水平创伤组明显多于sham组,移植组Cx43的表达水平明显多于创伤组(P<0.05)。结论 Cx43的表达变化可能与NSCs移植对脑外伤恢复作用有关。     

血脑屏障氧糖剥夺体外模型大鼠脑微血管内皮细胞miRNA表达变化

目的 研究体外血脑屏障氧糖剥夺模型大鼠脑微血管内皮细胞miRNA表达变化.方法 提取纯化大鼠脑微血管内皮细胞,建立血脑屏障氧糖剥夺模型,模拟在体缺血,在氧糖剥夺60 min,应用基因芯片技术检测氧糖剥夺前后miRNA表达谱.利用靶基因软件对部分高表达的miRNA进行靶基因预测.结果 共有278个miRNA表达,与正常对...     

PARP抑制剂3-AB对脂多糖诱导的帕金森病大鼠血脑屏障及多巴胺能神经元的影响

目的研究多聚ADP核糖聚合酶(poly(ADP-ribose)polymerase,PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰(3-aminobenzamide,3-AB)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠的血脑屏障(blood–brain barrier,BBB)及多巴胺能神经元的影响。方法大鼠随机分三组:对照组,LPS组和LPS+3-AB组。用伊文思兰渗透性实验检测血脑屏障通透性;Western blot法检测MMP-9和紧密连接蛋白ZO-1的表达;免疫组化法检测MMP-9在黑质神经元的表达。结果与对照组比较,LPS组黑质内BBB的通透性和MMP-9的表达显著增加,紧密连接蛋白相关蛋白ZO-1的表达和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性细胞数显著降低。上述作用受到PARP抑制剂3-AB的显著抑制。结论 3-AB通过保护LPS诱导的PD大鼠的BBB进一步保护多巴胺能神经元。