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1.
目的 探讨LH基因免疫对前列腺增生模型鼠生殖内分泌的影响。方法 RT-PCR法从雌性大鼠垂体细胞中RNA扩增大鼠的促黄体素基因(LH)cDNA片段约(461bp)并克隆至T载体,获得重组质粒T-LH,限制酶酶切,酶连接,构建PCDNA3.1(-)/HbsAg/LH,经脂质体转染纯化的重组质粒至COS细胞中,通过肌肉注射构建的PCDNA3.1(-)/HbsAg/LH与前列腺增生大鼠,2个月内给药两次。结果 体外培养COS细胞,发现HBsAg与LH连接物表达较好,肌肉注射前列腺增生模型鼠重组质粒后,模型鼠LH与T的含量明显低于对照组。结论 PCDNA3.1(-)/HbsAg/LH可参与前列腺增生模型鼠生殖内分泌腺的调节。 相似文献
2.
利用转基因动物乳腺生物反应器生产溶栓药物的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
目前,溶栓试剂主要有七大类,其中,纤溶酶原激活剂(PA)及其突变体是急性心肌梗塞的常规用药,但是由于来源有限,价格昂贵,远远不能满足临床需要。利用转基因动物乳腺作为生物反应器来生产溶栓药物能够降低成本,是一种高效率的表达系统,转基因动物乳腺生物反应器是将目的基因构建于乳腺表达载体,通过显微注射等方法注入动物的受精卵中,使目的基因整合到动物的染色体中,最终在动物乳汁中获得目的的蛋白的一种制药方法。到目前为止,转基因组织型纤溶酶激活剂(tPA),尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA),长效组织型纤溶酶原激活剂(LAtPA)的基因小鼠,及长效组织型纤溶酶原激活剂(LAtPA)的转基因单都已产生,并且在从转基因羊乳汁中纯化长效组织型纤溶酶原激活剂(LAtPA)蛋白方面也取得了突性的进展。可以预测,利用转基因动物乳腺生物反应器生产熔栓药物将会有广阔的前景。 相似文献
3.
4.
克隆人心肌肌钙蛋白I(cTnI)基因全序列,并进行分泌表达。从人心肌组织提取总RNA,经逆转录得到cDNA第一链,以此为模板,PCR扩增目的条带,重新设计上游引物,用相同PCR程序完成点突变;突变后PCR产物克隆入Pfd5载体,并用PCR、SpeI XhoI双酶切、载体测序等方法鉴定;用ITPG诱导cTnI的表达。PCR扩增出630bp左右条带,Pfd5—cTnI融合表达载体用PCR、SpeI Xho1双酶切均可见630bp左右条带,测序结果与预期序列一致;诱导后培养基及细胞周质均检测到cTnI蛋白免疫原活性。人心肌肌钙蛋白I得到成功表达。 相似文献
5.
基因重组干扰素α-2b脂质体的药代动力学研究 总被引:4,自引:0,他引:4
研究注射用干扰素α2b脂质体在大鼠体内的药代动力学及小鼠组织分布、排泄。运用同位素示踪法结合SDSPAGE,测定静脉注射后大鼠血液中原型药物浓度并做其胆汁排泄试验;用小鼠进行组织分布试验和尿粪排泄试验。结果:符合一级消除动力学的二房室模型,干扰素α2b的t1/2β为0.69h,脂质体3个剂量的t1/2β分别为3.36h、3.02h、2.34h,干扰素α2b脂质体在大多组织中分布增加,肝脾中尤其明显。脂质体能够显著延长干扰素α2b在血液及组织中半衰期,提高靶向性。 相似文献
6.
目的:在进行9-[2-(磷酸甲氧基)乙基]腺嘌呤钠(PMEA-Na)SD大鼠慢性毒性研究的同时,研究其伴随毒代动力学及组织分布。方法:采用液相色谱质谱联用方法测定样品中的药物浓度,并进行血清生化学及组织病理学检测。结果:SD大鼠单次及多次iv给药(90 d,每天1次)后,在给药剂量范围内,PMEA-Na在大鼠体内的暴露量与给药剂量呈线性相关。在6,12和24 mg/kg剂量下,AUC分别为7.49,11.63,30.99 mg/L.h(单剂量)和11.43,25.19,54.20 mg/L.h(多剂量)。肾脏中PMEA-Na浓度最高,其次是肝脏和生殖器,且多次给药后其组织浓度升高。血清生化学检测指标AST、CRE、CK及CRE均升高(P<0.01)。组织病理学检查未发现明显的病理形态学改变。结论:PMEA-Na经iv多次给药SD大鼠90 d后有毒性作用及蓄积现象,毒性作用靶器官主要为肾脏、肝脏和生殖器。 相似文献
7.
目的:考察(S,S)-ZX-5及其对映体对血管内皮细胞一氧化氮(NO)释放和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响,为开发通过增加NO释放而选择性改善脉络膜血流的药物提供理论依据。方法:采用细胞培齐技术和硝酸还原酶法在体外测定NO的释放量,用同位素方法测定[H^3]L-Arg催化生成[H3]L-Cit量的变化来反映eNOS活性.结果:(S,S).ZX-5使NO生成显著增加,并与(S,S)-ZX-5的浓度相关,(R,R)-ZX-5对NO生成增加影响不显著;(S,S)-ZX-5显著提高了eNOS酶活性,(R,R)-ZX-5对eNOS酶活性影响不显著。结论:(S,S)-ZX-5改善脉络膜血流的机制可能是通过增强eNOS酶活性,促进细胞内NO释放增加而完成的。 相似文献
8.
目的 探索镇关灵治疗类风湿性关节炎(rheumatoida~dtis,RA)的作用。方法 以佐剂性关节炎(AA)、蛋清性关节炎、角叉菜胶性关节炎为实验病理目标,建立二硝基氟苯所致小鼠迟发型超敏反应(DTH)、棉球肉芽肿及醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高和扭体反应等病理模型。结果 镇关灵能显著抑制大鼠佐剂性关节炎、蛋清性关节炎、角又菜胶所致炎症的足跖肿胀度和棉球肉芽肿,抑制由醋酸引起的小鼠扭体反应和腹腔毛细血管通透性增高,并可抑制DTH。结论 镇关灵具有良好的抗炎镇痛免疫抑制作用,对类风湿性关节炎具有明显的预防和治疗作用。 相似文献
9.
10.
目的:研究ZX-5对缺血后视网膜功能的恢复作用,并比较其光学异构体(R,R)-ZX-5和(S,S)-ZX-5对脉络膜血流及缺血后视网膜功能恢复的影响。方法:用彩色微球技术研究兔高眼压下(40mmHg)脉络膜血流的变化。用视网膜电生理仪测量b波,评价大鼠缺血后视网膜功能的恢复情况。结果:10g/L(R,R)-ZX-5滴眼液50μL能在不同时间点提高脉络膜血流(P<0.05),而(S,S)-ZX-5在相同条件下对提高脉络膜血流没有影响。ZX-5和(R,R)-ZX-5在不同时间点对视网膜缺血后功能恢复作用明显(P<0.05),(R,R)-ZX-5的作用优于ZX-5;而(S,S)-ZX-5对缺血后视网膜功能的恢复作用不明显。结论:ZX-5和(R,R)-ZX-5对增加脉络膜血流量和促进视网膜功能的恢复有显著功效,(R,R)-ZX-5恢复视网膜功能的作用更强,有可能进一步开发成有效防治眼血流障碍相关性眼病的药物。 相似文献