短发夹RNA对人骨髓间充质干细胞生长增殖的影响

目的:观察靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)的短发夹RNA(shRNA)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)生长增殖的影响,探讨靶向hTERT的RNA干扰技术临床应用的安全性。方法:根据RNA干扰原理,利用构建的表达shRNA的靶向hTERT mRNA的真核表达质粒(shRNA1),非特异性的shRNA真核表达质粒(shRNA2),转染试剂(德国metafectene)和正常培养液处理细胞。24h后在共聚焦显微镜下检测荧光表达情况;24h、48h、72h用MTT法检测细胞增殖活性;48h后进行HE染色、RT-PCR及端粒酶活性检测。结果:①共聚焦显微镜下见shRNA1及shRNA2组有大量的细胞表达荧光。②相应时间点各组细胞生长增殖无明显差异(P>0.05);HE染色发现,同等培养条件下,各组细胞生长密度及形态无明显变化。③RT-PCR显示各组细胞均无hTERT mRNA的表达;端粒酶活性为阴性。结论:靶向hTERT mRNA的shRNA对正常hMSCs的生长增殖无明显影响,该方法对不表达hTERT的正常体细胞可能是安全的。     

一次性修补长期气管造口术后瘘口的一种新手术方式

长期或永久气管造口术指人工制造一个不会塌陷及狭窄的气管瘘口来改善呼吸情况。经常应用于预备长期不带管,可自我护理的病例中。但是长期或永久性气管造口并不意味着永不可逆,一旦原发性疾病被治愈,就应考虑手术修补瘘口。随着医学技术的进步,越来越多的患者原发疾病被治愈需修补瘘口。文献报道的修补方法很多,但没有一种方法能保证修补后的瘘口不渗水漏气。咳嗽或讲话产生的气管内正压会迫使气体扩散到周围组织中去,导致皮下气肿,气胸,纵隔积气,呼吸受迫。还常伴有出血,感染,肉芽肿形成,气管软化等诸多并发症。为了解决这一问题,我们发展…     

一次性修补长期气管造口术后瘘口的一种新手术方式

长期或永久气管造口术指人工制造一个不会塌陷及狭窄的气管瘘口来改善呼吸情况。经常应用于预备长期不带管，可自我护理的病例中。但是长期或永久性气管造口并不意味着永不可逆，一旦原发性疾病被治愈，就应考虑手术修补瘘口。随着医学技术的进步，越来越多的患者原发疾病被治愈需修补瘘口。文献报道的修补方法很多，但没有一种方法能保证修补后的瘘口不渗水漏气。咳嗽或讲话产生的气管内正压会迫使气体扩散到周围组织中去，导致皮下气肿，气胸，纵隔积气，呼吸受迫。     

短发夹RNA对头颈肿瘤细胞端粒酶活性和增殖的影响

目的:观察靶向人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的短发夹RNA(shRNA)对喉癌Hep-2细胞株和鼻咽癌NEC细胞株端粒酶活性和生长增殖影响,探讨抑制端粒酶活性途径治疗头颈肿瘤的可行性。方法:根据hTERT cDNA序列构建表达shRNA、含荧光素基因、靶向hTERT mRNA的真核表达质粒shRNA1和表达shR-NA的、含荧光素基因的、靶向非人类基因的真核表达质粒shRNA2。分别以质粒shRNA1、shRNA2、转染试剂及空白培养液处理体外培养的Hep-2细胞和NEC细胞。转染48 h后以TRAP PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性并行HE染色;倒置显微镜下每天观察细胞形态;MTT法检测细胞增殖活性。结果:①Hep-2细胞和NEC细胞shRNA1处理48 h后与空白对照组比较端粒酶活性下降,P<0.05。②HE染色发现shRNA1处理后Hep-2和NEC细胞胞体缩小、核固缩,同等培养条件下,细胞生长密度变稀,见许多圆形死亡细胞。③与相应时间点空白对照组细胞平均吸光度(A)值比较,shRNA1处理组Hep-2细胞和NEC细胞24,48,72 h A值均减小,P<0.05。结论:靶向hTERT mRNA的小干扰RNA能够显著降低Hep-2细胞和NEC细胞的端粒酶活性,抑制癌细胞生长增殖,并诱导细胞凋亡。     

牙源性上颌窦炎

牙源性上颌窦炎占上颌窦炎的10%～12%,诊断和治疗常涉及耳鼻咽喉科和口腔科,较易误诊.本文对近年来牙源性上颌窦炎的治疗进展做一综述.     

牙源性上颌窦炎

目的探讨牙源性上颌窦炎的病因、发病机制以及诊疗方法。方法回顾性分析18例牙源性上颌窦炎患者的临床资料。结果慢性牙源性上颌窦炎17例,急性牙源性上颌窦炎1例。病因分别为根尖周炎11例、含牙囊肿感染3例、拔牙损伤继发感染2例、异位牙1例、角化囊肿1例。主要症状为鼻漏14例、颔面部疼痛9例、颔面部肿块4例、鼻塞5例、牙根流脓1例、张口困难1例。行上颌窦根治术12例,鼻内镜手术4例,口腔上颌窦瘘修补2例,鼻旁异位牙切除1例,拔牙10例。17例手术效果良好,随访1年以上无复发。1例口腔上颌窦瘘两次修补未成功。结论牙源性上颌窦炎主要由于根尖周炎引起。症状以鼻漏、鼻塞、颌面部疼痛和颌面部肿块多见。同时处理牙源性病变和鼻窦病变疗效较好。