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1.
2.
目的 :在大肠杆菌内快速构建两种分别含有人肝细胞生长因子 (hepatic growth factor,HGF)和非分泌型人尿激酶型纤溶酶原激活剂 (urokinase- type plasm inogen activator,u PA) c DNA片段的重组复制缺陷型腺病毒。方法 :分别将人 HGF和 u PA c DNA片段与穿梭载体 p Track- CMV连接 ,线性化后与骨架载体 Ad Easy- 1在大肠杆菌 BJ5 183内同源重组获得腺病毒载体 p Ad HGF和 p Adu PA,经 2 93细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒 Ad HGF和 Adu PA;将 Ad HGF和 Adu PA分别体外感染肝细胞株 L0 2 ,以 Northern印迹法和 Western印迹法检测两种病毒在肝细胞中的表达。 结果 :连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒 p Ad HGF和 p Adu PA;经 2 93细胞包装 ,3d后均观察到绿色荧光蛋白明显表达 ,Cs Cl梯度离心纯化最终分别获得 4× 10 1 0 efu/ m l滴度的重组病毒 Ad HGF和 6× 10 1 0 efu/ ml Adu PA;两种病毒体外感染肝细胞 3d后 ,HGF和u PA表达均明显增加。结论 :细菌内同源重组制备复制缺陷型腺病毒 ,纯化过程简单 ,重组腺病毒在肝细胞中均高效表达 ,为肝细胞移植基因治疗肝纤维化提供了新的手段 相似文献
3.
目的利用AdEasy系统构建共同表达人肝细胞核因子4α(HNF4α)和绿色荧光蛋白(GFP)的复制缺陷型重组腺病毒——AdHNF4α,体外感染人肝肿瘤细胞株,观察HNF4α表达上调对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响。方法通过逆转录(RT)-PCR方法获取目的基因HNF4αcDNA片段,利用腺病毒载体AdEasy系统构建腺病毒质粒pAdHNF4α,经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒AdHNF4α;将AdHNF4α体外感染人肝肿瘤细胞株HepG2和Hep3B,通过RT—PCR、Western印迹法检测HNF4α在上述细胞中的表达;同时观察外源导人HNF4α对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响。结果连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒pAdHNF4α;经293细胞包装,4d后观察到GFP明显表达,反复扩增最终获得约1×10^10efu/ml滴度的重组腺病毒AdHNF4α;AdHNF4α体外感染人肝肿瘤细胞72h后,有约90%以上的细胞表达GFP,HNF4αmRNA表达明显上调,蛋白表达分别增加3.4倍(HepG2)和5.2倍(Hep3B);同时肝细胞相关功能基因包括载脂蛋白、细胞色素P450家族、谷氨酰胺合成酶、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶及葡萄糖-6-磷酸酶mRNA表达均明显上调,且肿瘤细胞凋亡率也明显增加。结论利用重组腺病毒载体可将外源HNF4α基因导入肝肿瘤细胞并维持高效表达,同时正常肝细胞重要功能基因表达亦增强,肿瘤细胞生物学特性明显改善,这将为基因修饰移植肝细胞研究提供新思路。 相似文献
4.
自1954年第一株人肝源性细胞株建立至今,已成功构建了上百株人肝源性细胞株及亚株,这些细胞株的构建为探讨肝细胞的细胞生物学特点、生理生化功能以及开展各种肝脏疾病尤其是肝纤维化、肝脏代谢性疾病、急慢性肝功能衰竭、不同类型肝炎的临床研究有着十分重要的意义。近年来,随着肝细胞株在肝细胞移植(hepatocyte transplant,HCT)、人工肝等领域的广泛应用,建立新一代功能齐全、无致瘤性、不引起宿主免疫反应、方便经济的人肝源性细胞株已成为研究热点。本文就人肝脏组织来源细胞株的构建、生物学特性及应用研究等方面作一综述。 相似文献
5.
目的评价声学造影实时三维超声心动图(CE-RT3DE)在冠心病诊断中的应用及其价值。方法收集2012年2月至2014年4月住院拟诊为冠心病的患者120例,均于经皮选择性冠状动脉造影术(CAG)前行CERT3DE定量分析。步骤为先经正中静脉缓慢推注声学造影剂声诺维(Sono Vue),行心肌声学造影(MCE),并结合CE-RT3DE图像获取整体心肌造影三维资料数据库,再联机或脱机对数据库进行分析处理做出诊断。然后进行CAG检查,对比分析CE-RT3DE与CAG的结果。结果以CAG诊断为金标准,CE-RT3DE诊断冠心病的敏感性为95.88%(93/97),特异性为95.65%(22/23),阳性预测值98.94%(93/94),阴性预测值56.52%(26/46),准确性为95.83%(115/120)。CE-RT3DE对冠状动脉病变≥2支(2支+3支)诊断的敏感性大于单支病变(100.0%vs88.24%,P<0.05)。结论 CE-RT3DE诊断冠心病敏感性、特异性及准确性高,无创,安全性高。 相似文献
6.
湖南省儿童医院是一所三级甲等儿童专科医院。随着医药行业的快速发展,传统的人工摆药模式难以适应医院药房管理水平的提高和JCI对药房工作的要求。近年来,全自动药品摆药机在国内各大综合医院的病室药房已投入使用。2012年我院从日本三洋电机株式会社引进一台型号为ATC-256G全自动药品摆药机(简称摆药机),同年9月份开始在中心药房先后对全院30个临床科室进行片剂和胶囊的摆药工作,替代儿科临床护士人工摆药。现就摆药机给口服药品调配工作带来的利与弊及应用体会总结如下。 相似文献
7.
目的观察早期康复护理对脑卒中偏瘫患者患肢活动功能、生活质量及心理状态的影响。方法选取本院2017年1月—2018年1月收治的98例脑卒中偏瘫患者纳作为研究对象,将入选患者随机均分为对照组与护理组,对照组给予常规院内护理,护理组给予早期康复护理;护理一个月后,观察两组患者神经功能指标、生活质量指标与心理状态指标的变化情况,并调查患者对护理工作的满意度。结果护理后,两组NIHSS、CSS、STEF、FMA、MBI得分均较前改善,组内对比P0.05;治疗后护理组患者各项神经功能指标均优于对照组(P0.05)。护理后,两组SAS、SDS均较前改善,组内对比P0.05;治疗后护理组患者SAS、SDS均优于对照组(P0.05)。护理后,两组患者生理功能、精神健康、社会功能、总体健康4个维度评分均较前改善,组内对比P0.05;治疗后护理组患者SF-36各维度均优于对照组(P0.05)。观察组总满意率为93.88%,对照组总满意率为77.55%,观察组整体满意度与总满意率均优于对照组(P0.05)。结论早期康复护理可促进脑卒中偏瘫患者患者活动功能恢复,改善患者生活质量与心理状态,具有临床推广价值。 相似文献
8.
9.
药物性肝炎119例临床分析 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:分析119例药物性肝炎的病因和临床特点,加深对药物性肝炎的认识。方法:根据服药史、临床表现、肝功能、血清标志物及停药后的治疗效果等指标进行系统分析。结呆:引起肝损害的药物多见于中草药(28.57%)、抗结核药(11.76%)、抗肿瘤药(9.24%)、抗感染药(7.56%)、免疫抑制荆(6.72%)等。73.95%的药物性肝炎出现于服药后4个月内。结论:影响药物性肝炎的因素有药物种类、用药时间、联合用药、患者自身健康状况等;中草药和抗结核药引起的药物性肝炎不容忽视;随着器官移植的大量开展,免疫抑制剂引起的药物性肝炎大量增加。 相似文献
10.
SLED与CVVH血液动力学比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的比较持续缓慢低效血液透析(SLED)与持续静脉静脉血液滤过(CVVH)在重症肾衰竭患者治疗中的血液动力学变化。方法采用前瞻开放设计,交叉对照方法,以清洗期12~24h,20例重症肾衰竭患者分别被随机施以SLED和CVVH治疗10h,治疗全程每小时记录平均动脉压、心率、超滤率,记录一过性低血压的发生情况、血管活性药和胶体的使用情况。结果CVVH组平均超滤率(0.262±0.296)L/h,总超滤平均每例(3.296±1.953)L,平均动脉压(102.760±19.494)mmHg,平均心率(89.550±21.203)次/min,一过性低血压发生率16/20;SLED组平均超滤率(0.420±0.333)h,总超滤平均每例(5.403±2.956)L,平均动脉压101.438±19.331,平均心率97.705±21.799,一过性低血压发生率15/20;SNK方差分析显示SLED组每小时超滤率、总超滤率、心率比CVVH组显著增高(P<0.01);但两组治疗之间MAP无差异(P>0.01)。结论SLED在重症肾衰竭患者治疗中血液动力学像CVVH一样稳定,甚至在总超滤量明显大于CVVH时也未明显增多低血压的发生。 相似文献