克拉霉素缓释胶囊人体相对生物利用度研究

 目的建立人血浆中克拉霉素浓度测定的LC-MS/MS方法,研究克拉霉素缓释胶囊与市售克拉霉素缓释片的药动学及人体相对生物利用度。方法以罗红霉素为内标,用乙醚-二氯甲烷(3∶2)提取处理,以甲醇-水-甲酸(80∶20∶0.05)为流动相,用C18柱分离,采用ESI源,正离子方式检测,扫描方式为多反应监测(MRM)。结果克拉霉素线性范围为10.0～4000μg·L^-1,日内、日间RSD均小于15%。应用此方法研究18名健康受试者口服0.5g受试制剂和参比制剂的药动学参数。单剂量口服受试制剂和参比制剂的t_max,ρ_max,t_1/2,AUC_0-t,AUC_0-∞,CL和Vd分别为:(5.36±1.14)和(5.25±0.88)h,(1218±433)和(1333±370)μg·L^-1,(4.59±1.67)和(4.24±2.10)h,(8239±1553)和(8467±1364)μg·h·L^-1,(8662±1829)和(8795±1331)μg·h·L^-1,(60.9±15.1)和(58.9±11.3)L·h^-1和(382±103)和(366±224)L。多剂量口服受试制剂和参比制剂的t_max,ρ_ssmax,ρ_ssmin,ρ_av,AUC_ss和DF分别为:(5.31±1.11)和(5.28±0.96)h,(1387±396)和(1488±401)μg·L^-1,(64.6±26.8)和(70.1±30.0)μg·L^-1,(399±99.2)和(410±107)μg·L^-1,(9585±2382)和(9830±2578)μg·h·L^-1,(3.32±0.62)和(3.49±0.66)。单剂量和多剂量相对生物利用度分别为(98.2±16.3)%和(99.5±19.0)%。结论本法快速、准确、专属、灵敏。统计结果表明,两制剂人体内相对生物利用度无显著性差异(P>0.05)。     

pH指示剂吸收度比值法测定醋酸洗必泰含量

本文提出用ｐＨ指示剂吸收度比值法测定醋酸洗必泰的含量，采用０．０５％溴酚蓝乙醇溶液为指示剂；测定波长为４３０ｎｍ和６０２ｎｍ；标准液为０．１ｍｏ１／Ｌ盐酸液。测得三批醋酸洗必泰的含量分别为９７．９％，９８．８％和９８．５％，并与非水法进行了比较。结果经ｔ检验（Ｐ＝０．９５）无显著性差异，本法结果准确，重现性好，适用于醋酸洗必泰的常规分析。     

硫化氢对体外大鼠肝星状细胞内Ca2+浓度变化及细胞增殖的影响

目的 研究硫化氢(H₂ S)对大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6) Ca²⁺浓度、细胞增殖的影响及其机制。 方法 活化HSC-T6用含10%小牛血清DMEM培养液制备为1×10⁵个肝星状细胞(HSC)悬液。钙离子荧光探针Fluo-3/AM负载细胞后，在不同刺激条件下，利用激光扫描共焦显微镜动态扫描HSC-T6细胞内Ca²⁺荧光强度（FI）变化，FI表示细胞内Ca²⁺浓度。四唑盐比色法，观察不同浓度H₂S供体——NaSH对HSC-T6细胞增殖的影响。 结果 低浓度H₂S（100μmol/L）明显降低HSC-T6细胞内Ca²⁺浓度（P<0.05)，而细胞增殖增加（增殖率为116%）；K_ATP通道阻断剂——格列本脲可阻断H2S的作用。高浓度H₂S（1mmol/L）刺激HSC-T6细胞内Ca₂₊浓度增加，但细胞增殖无明显变化(P＞0.05)。 结论 低浓度H₂S通过激活HSC-T6细胞K_ATP通道降低细胞内Ca²⁺浓度，可能通过调节细胞氧化应激促进细胞增殖；高浓度H2S刺激HSC-T6细胞内Ca₂₊浓度增加。提示H₂S在肝硬化门脉高压症的发生机制中具有双重作用。     

生长抑素受体亚型在人肝星状细胞的表达及其临床意义

目的研究人肝星状细胞系(LX-2细胞)生长抑素受体(somatostatin receptor,SSTR)亚型的表达情况,探讨其临床意义。方法选择对数生长期的LX-2细胞,将细胞以8×104个/孔接种于预置入盖玻片的6孔板中,分为LX-2组、中药复方861组、奥曲肽(octreotide)处理组及SSTR亚型阳性细胞(PANC-1)对照组,每组重复2孔。应用免疫细胞化学染色方法,观察LX-2细胞SSTR 2、SSTR5的表达;用RT-PCR方法观察SSTR亚型1~5的表达。结果免疫细胞化学染色结果发现,LX-2细胞SSTR亚型2、5表达阳性,阳性物质呈棕红色,主要位于细胞膜及细胞质,复方861处理组SSTR2、5表达增强,细胞着色较深;RT-PCR结果发现,LX-2细胞SSTR亚型1~5的表达均阳性,阳性表达的高低依次为SSTR1、SSTR4>SSTR2、SSTR5>SSTR3(P<0.05)。结论LX-2表达5种SSTR亚型,肝星状细胞可能是SST及其类似物降低门静脉压力的作用靶点。奥曲肽可能通过SSTR2、SSTR5亚型调节肝星状细胞的舒张与收缩功能,从而影响肝内阻力及门静脉压力。     

HPLC测定阿司达莫缓释片的含量

目的 建立测定阿司达莫缓释片含量的方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(52:48),检测波长275 nm,柱温35℃,流速1.0 ml·min-1,以内标法计算阿司达莫缓释片的含量.结果 阿司匹林的线性范围为6～16μg·ml-1(r=0.9999),低、中、高3种浓度的平均回收率分别为101.4%±1.1%、97.1%±1.3%、94.2%±1.5%(n=3);双嘧达莫的线性范围为20～120 μg·ml-1(r=0.9998),低、中、高3种浓度的平均回收率分别为98.6%±2.3%、99.0%±1.6%、101.4%±2.3%(n=3).结论 所建方法简便、准确、专属性强,可用于阿司达莫缓释片的质量控制.     

BALB/c裸小鼠人宫颈癌模型的建立

目的采用在裸鼠腹部皮下移植人原代宫颈癌组织的方法,研究其在裸鼠体内的成瘤性,并初步探讨此动物模型腹部肿瘤的生物学特性。方法将人宫颈癌组织接种于裸鼠腹部皮下建立人宫颈癌裸鼠模型,观察荷瘤鼠成瘤、一般特性和移植瘤生长情况。80d后处死裸鼠,取肿瘤块做病理切片;用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测肿瘤组织、外周血和肝、脾等脏器HPV DNA表达情况。结果接种后第42天在接种部位可见结节,第80天后肿瘤块平均表面积为(50.0±5.1)mm2,肿瘤移植平均成功率为90.5%。移植瘤生长以局部浸润为主,未见转移瘤。组织学检查结果示所有移植瘤与种植前肿瘤组织病理检查结果一致,HPV DNA呈阳性,且为高危型人乳头瘤病毒HPV16型阳性。而外周血与肝、脾等脏器HPV DNA呈阴性。结论本研究所建立裸鼠人宫颈癌组织模型成瘤率较高,操作简便,可保持人宫颈癌生物学特性,为进一步研究宫颈癌的发病机制提供了重要的科研工具。     

扬彼此互动之长,弃缺乏沟通之短——从显微互动教室开放使用看形态学实验教学

随着以计算机、网络技术为代表的信息技术的不断发展,显微镜与这些技术的有机结合,使得形态学实验教学迈上了一个新高度,全新的软硬件平台让形态学实验教学充满了现代感与时代气息,但教学中仍存在一些"传统"的问题应给予重视。     

高校实验课教学理念浅析

为培养学生科研的基本素质,提高实验教学的质量,加强学生对实验课设计和动手能力的锻炼,教学实验课的准备及设备试剂的采购,都凸显问题的重要性。传统观念是理论课比实验课重要,但就目前人才培养中更突出的是实践工作能力和创新能力。所以高校在教学工作中应更需要加强学生实验课的教学工作,培养学生科研思路的创新及动手能力,以适应21世纪人才战略需要。     

康复新液治疗小儿手足口病临床应用疗效分析

观察使用康复新液治疗小儿手足口病的治疗效果.方法 观察小儿手足口病患儿120例,年龄8个月-11岁,其中男68例,女52例,随机分为两组,各60例,两组性别、年龄、病情、症状、病程均无显著性差异,(P>0.05)具有可比性,治疗组应用康复新液在皮疹及口腔粘膜破溃处外擦治疗与对照组60例疗效比较.结果 治疗组3天治愈率82.3%,5天治愈率93.3%,对照组3天治愈率71.1%,5天治愈率82.1%,结果显示有显著性差异(P<0.05).结论 应用康复新液治疗小儿手足口病缩短病程,加快溃疡愈合,有明显疗效.     

改良术式治疗良性甲状腺结节的临床应用

[目的]探讨改良术式在良性甲状腺结节手术切除中的临床应用.[方法]对我院2006年1月～2008年1月63例良性甲状腺结节患者实行改良术式切除切除结节,行甲状腺侧叶加峡部切除14例,侧叶次全加峡部切除6例,双侧次全切除42例.[结果]本组病例术中无输血,术后无积血、积液,脂肪液化等并发症发生,伤口全部甲级愈合,均于术后2～5 d出院.随访1年以上伤口不明显,不易被发现,随访期间未出现喉上、喉返神经损伤,甲状腺及甲状旁腺功能的减低等并发症,随访无复发.[结论]改良式甲状腺次全切除术方法简单、损伤小、并发症少,采用改良术式是甲状腺良性结节手术时较好的选择.