甲基丙烯酸环氧丙酯诱导16HBE细胞恶性转化过程中细胞凋亡相关lncRNA的筛选及功能研究

目的： 筛选在甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）诱导人支气管上皮16HBE细胞恶性转化过程中凋亡相关lncRNA,并探讨其对细胞恶性转化的3个时期细胞凋亡的调控作用。方法： 取处于对数生长期的16HBE细胞,二甲基亚砜（DMSO）作为溶剂对照,终浓度为8 μg/mL的GMA为处理组,每次染毒72 h,重复染毒3次后,分别进行传代培养。收集GMA染毒组和DMSO对照组的第10、20和30代细胞,基于细胞转化表型鉴定结果,将其分为转化前、中和后期。流式细胞术检测3个时期的细胞凋亡率,lncRNA表达谱芯片筛选3个时期细胞凋亡相关差异表达lncRNAs,生物信息学数据库预测差异lncRNA可能的作用靶基因。实时荧光定量PCR验证筛选出的差异lncRNA相对表达水平。结果： 与同时期DMSO对照组相比,第10代GMA染毒组的细胞凋亡率明显升高,第20代GMA染毒组的细胞凋亡率降低（均为P < 0.05）,第30代GMA染毒组的细胞凋亡率与同时期的DMSO对照组相比差异无统计学意义。芯片筛选结果发现,lncRNA CFLAR-AS1在第10、20和30代分别下调22%、上调244%和下调30%,其可能靶基因CFLAR的mRNA分别上调27%、下调30.6%和下调31%。lncRNA CFLAR-AS1的qPCR验证结果与芯片筛选结果一致,与同时期的DMSO对照组相比,第10、20和30代的GMA染毒组细胞分别下调42%、上调442%和下调9%,其中第10和20代细胞与对照组间的差异具有统计学意义（P < 0.05）。结论： 在GMA诱导16HBE恶性转化过程中,转化前期凋亡率升高,转化中期凋亡率下降,这一时期lncRNA CFLAR-AS1可能发挥抑制细胞凋亡的作用,但其作用机制还有待进一步研究。     

甲基丙烯酸环氧丙酯的遗传毒性评价

目的：观察甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）诱发体外培养的中国仓鼠肺细胞（V79）微核发生变化情况,对其遗传毒性进行评价。方法：分别采用不同浓度（2.25、4.5、9.0、18.0、36.0 μg/mL）的GMA染毒V79细胞,设置空白对照组和DMSO溶剂对照组,其中染毒3 h处理组分别在加和不加体外活化系统（S9）条件下进行,染毒24 h处理组在不加S9条件下进行。分别计算细胞复制指数和微核细胞率。结果：GMA的浓度在2.25~36.0 μg/mL范围内,无S9的条件下,与空白对照组和DMSO溶剂对照组相比,GMA染毒3和24 h组的V79细胞复制指数均无明显变化,但微核细胞率明显升高,并呈浓度-效应关系;在有S9的条件下染毒3 h,各剂量组的GMA诱发微核细胞率的差异均无统计学意义。结论：在2.25~36.0 μg/mL浓度范围,GMA可致V79细胞的微核率升高,表明GMA可诱发遗传物质损伤,具有遗传毒性。     

我国非处方药上市路径调研与结果分析

目的： 对我国非处方药上市路径的现状、存在的问题,以及国外非处方药上市路径管理模式对我国的适用性进行调研。方法：在前期文献研究的基础上,开展问卷调查,并对调查结果进行分析。采用非概率抽样法,选择从事化学药品 OTC 研发、注册、生产、经营的专业人员以及行业协会、监管机构的专家作为调研对象,以微信方式发放电子问卷进行调查。结果：调查结果表明,多数调查对象认为我国应建立符合我国国情的非处方药的专论制度,应完善我国处方药和非处方药的转换标准和程序以及非处方药的注册路径和审评程序。结论：本调研为进一步分析我国在非处方药上市准入管理方面存在的问题及完善建议提供了数据支持。     

美国人体细胞、组织以及基于细胞和组织的产品的捐赠者资格监管研究

摘要：人体细胞、组织以及基于细胞组织的产品能够治疗许多常规药物难以治疗的疾病,这类产品正在逐渐成为热门治疗药物。由于这类产品的供体材料可能携带各种传染性病原体和疾病,因此对于供体的无风险性保障则是这类产品安全性保障的基础。关于供体安全性的保障,美国有专门的针对捐献者资格确定的法规和程序,并配套有相应的技术指南。而我国在这方面的制度设计,才刚刚开始。本文研究并借鉴美国FDA对捐献者资格确定的法规和技术指南,为我国制定保证细胞类产品供体安全性的制度提供思路和建议。     

GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中LINC00472的表达及其意义

目的：探讨在甲基丙烯酸环氧丙酯（GMA）诱导人支气管上皮细胞（16HBE）恶性转化过程中长链非编码RNA LINC00472的表达特征及其生物学意义。方法：以DMSO作为溶剂对照组,实验组采用8 μg/mL的GMA染毒处理72 h,重复染毒3次,传代培养,收获两组细胞的第10、20和30代（分别代表前、中、后期）16HBE细胞,采用Arraystar人类LncRNA芯片（v4.0）分析细胞中LINC00472的表达改变,实时荧光定量PCR （qPCR）检测LINC00472和预测靶基因miR-24-3p的相对表达水平。结果：芯片检测结果显示,与同代龄DMSO对照组相比,GMA诱导16HBE细胞恶性转化过程中LINC00472在转化第10代和第20代分别下调2.30倍和3.57倍,第30代上调2.32倍。qPCR检测结果表明,与同代龄对照组相比,LINC00472在早期的相对表达水平差异无统计学意义,而在中期和后期的相对表达水平的变化情况与芯片结果基本一致,其可能的靶基因miR-24-3p在不同时期相对表达水平的差异均具有统计学意义（P < 0.05）,但差异倍数均 < 2。结论：LINC00472在GMA诱导16HBE细胞恶性转化的前期表达水平未发生明显改变,而在细胞恶性转化的中期低表达、后期高表达,推测LINC00472可能在GMA诱导16HBE细胞恶性转化后期发挥作用,但LINC00472和miR-24-3p在此过程中是否存在相互作用以及其作用机制有待进一步研究。     

ERK/JNK信号通路在炭黑诱导细胞因子IL-6、IL-8表达改变中的作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶(ERK)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在炭黑诱导人胚肺成纤维细胞(HELF)白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)表达改变中的作用.方法 分别在含0、15、30、60、120或240 j/mL炭黑的RPMI...