应用气-液界面染毒技术研究柴油机尾气对16HBE细胞的毒性作用

[目的]应用气-液界面染毒技术探索柴油机尾气对人支气管上皮(16HBE)细胞急性毒性作用. [方法]在流速为20 mL/min,37℃的条件下,用柴油机尾气分别对生长在多孔膜上的16HBE细胞持续染毒5、10、15、20、30 min,分别使用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测法、乳酸脱氢酶(LDH)释放法、中性红摄入法(NRU)检测柴油机尾气对细胞存活率的影响;对细胞存活率约50％以上的染毒组用流式细胞术检测柴油机尾气对细胞凋亡率的影响;同时对每个染毒组分别设置用滤膜过滤的洁净空气作为对照组,暴露时间和检测方法均与染毒组-致. [结果]3种存活率检测方法的结果表明,染毒组与对照组相比,柴油机尾气持续染毒15 min及更长时间以后,细胞存活率降低,差异有统计学意义(P＜ 0.05),且呈随染毒时间延长而逐渐降低的趋势.3种方法比较表明,低流速短时间柴油机尾气对16HBE细胞的损伤作用以细胞膜损伤最为显著,其次是线粒体损伤.用柴油机尾气持续染毒10、15 min,染毒组细胞早期凋亡率、晚期凋亡及坏死率较对照组均升高,差异均有统计学意义(P＜ 0.05).10、15 min染毒组的晚期凋亡及坏死细胞多于早期凋亡细胞(P＜0.05). [结论]气-液界面染毒技术可以应用于柴油机尾气等气溶胶有害物质的体外毒性研究;同时发现柴油机尾气导致的16HBE细胞急性毒性为细胞膜损伤、线粒体损伤及细胞凋亡.     

基于循证和现场验证方法深化二硫化碳防治研究与实践

二硫化碳是德国化学家Lampadius于1796年偶然发现的;1802年,Clement和Desomes通过加热的焦炭和元素硫合成了这种化合物.在1840年,苏格兰外科医生Simpson进行了二硫化碳作为麻醉剂有效性的实验.1850年代,法国首次将二硫化碳作为橡胶工业的健康危险物.过了一个世纪,橡胶工业发展到大规模生产,二硫化碳的暴露很普遍.在欧洲,严重的职业性二硫化碳中毒连续发生.早期二硫化碳中毒的症状和体征主要是精神病、远端肢体的震颤和麻木、四肢无力、食欲下降、体重减轻、严重的和局限性头痛、性功能低下、视力减退和胃肠道功能紊乱等.1941年,第一个职业接触限值标准被美国标准协会采纳.     

基于胞质分裂阻滞法微核试验的细胞组学进展和应用

微核试验创建于20世纪70年代[1],根据不同的取材,体内试验、体外试验及不同的培养方法,现已有多种试验种类.外周血淋巴细胞和哺乳动物骨髓嗜多染红细胞是最常用的试验细胞.     

胺碘酮治疗心房颤动89例临床观察

心房颤动(简称房颤)是临床上常见的心律失常之一.尽管房颤的导管消融治疗取得了很好的疗效,但由于技术要求较高,在基层医院很难推广,药物复律仍作为治疗房颤的首选方法.现将本院2005年1月至2008年12月用胺碘酮治疗房颤89例的临床资料进行了分析,报告如下.     

北京市郊区儿童哮喘病影响因素病例对照研究

目的了解北京市郊区儿童哮喘病相关影响因素,为采取相应干预措施提供依据。方法采用自行设计调查问卷抽取北京市郊区小学27 445名1~5年级小学生父母进行横断面调查,对按标准筛查出的370例哮喘病例组学生和868名对照组学生父母进行病因调查。结果病例组低出生体重、非足月出生、母乳喂养6个月、有哮喘家族史、有过敏家族史、有过敏症、被动吸烟和家中燃煤做饭且不排风的比例分别为8.4%,10.0%,69.7%,21.4%,26.2%,34.3%,77.0%和26.8%;对照组分别为4.2%,6.0%,75.7%,8.3%,17.7%,11.7%,70.6%和19.8%,差异均有统计学意义(P0.05);多因素Logistic回归分析结果表明,低出生体重、有哮喘家族史、有过敏家族史、有过敏症和家中燃煤做饭且不排风是北京市郊区儿童患哮喘的危险因素;母乳喂养6个月是北京市郊区儿童患哮喘的保护因素。结论应针对儿童易患哮喘病的危险因素制定相应的预防措施,提倡母乳喂养,以降低患哮喘的相对危险性。     

应用基因重组细胞模型研究苯并[a]芘的细胞毒性和遗传损伤效应

目的 利用经基因重组构建的具有细胞色素P450 1A1(CYP1A1)代谢活性的人支气管上皮细胞(16HBE)为体外模型,研究苯并[a]芘[B(a)P]的细胞毒性和遗传效应改变.方法 应用实时定量PCR方法检测细胞的CYP1A1和微粒体环氧化物水解酶(mEH)的mRNA水平.细胞分0、1、5、10、20 μmol/L B(a)P处理组,应用胞质分裂阻滞微核细胞组学技术综合评价B(a)P的有害生物效应,其中核分裂指数、细胞凋亡率和细胞坏死率等指标评价B(a)P的细胞毒性,微核、核质桥和核芽的发生率检测B(a)P的遗传损伤效应.结果 CYP1A1和mEH在16HBE-CYP1A1细胞中有较高表达,mRNA相对含量分别是7.8×10~(-4)和0.030.B(a)P作用后,16HBE-CYP1A1细胞1、5、10、20μmol/L处理组核分裂指数分别为1.92±0.04,1.71±0.01,1.61±0.04,1.41±0.01,低于对照组(2.08±0.03);双核细胞率分别为(76.33±3.51)%、(66.33±0.58)%、(51.67±1.53)%、(39.00±1.00)%,低于对照组的(82.67±6.66)%;细胞坏死率分别为(1.93±0.42)%、(2.20±0.53)%、(8.07±0.90)%、(15.27±2.80)%,高于对照组的(0.47±0.11)%,差异均有统计学意义(F值分别为899.94、303.33、240.87,P值均<0.01).而凋亡细胞随着B(a)P作用剂量的增加出现先增高后降低的趋势,分别为(1.20±0.53)%、(2.00±0.20)%、(1.47±0.12)%、(1.20±0.00)%、(1.20±0.00)%.遗传损伤效应分析中发现,随B(a)P作用浓度的增加,核质桥发生率随之增加,分别为(4.67±2.89)‰、(7.33±1.53)‰、(10.67±2.08)‰、(11.00±1.00)‰;核芽发生率也随之增加,分别为(2.33±0.58)‰、(4.00±1.00)‰、(5.00±1.00)‰、(7.67±1.16)‰,均有剂量-效应关系(F值分别为50.23、121.09,P值均<0.01).在B(a)P低于10 μmol/L组中,微核率也随B(a)P作用浓度的增加而升高,分别为(8.33±3.21)‰、(14.67±1.15)‰,但在20 μmol/L组,微核率为(16.67±2.88)‰,低于10 μmol/L处理组[(17.67±2.08)‰].在空载质粒细胞16HBEV中,细胞毒性出现较晚,在5、10、20 μmol/L组中,微核、核质桥和核芽的发生率[分别为(6.37±2.08)‰、(9.33±1.52)‰、(9.33±3.21)‰;(4.33±1.53)‰、(6.00±2.65)‰、(5.33±1.53)‰;(2.33±0.58)‰、(3.33±1.16)‰、(3.67±1.16)‰]没有明显的组间改变.结论 B(a)P代谢活化后可导致遗传损伤效应增加,这可能与细胞的核分裂指数降低、细胞坏死率增加或细胞凋亡受抑制有关.     

发展生物监测技术进一步提高职业人群健康监护水平

我国正处于经济发展和社会转型期,同时面临着传统的职业病(如尘肺、急慢性中毒等)和新的职业卫生问题(如新材料和新化学物)的双重挑战,加之大规模流动人群的职业健康问题,使得当前职业病防治形势依然严峻.     

1，3-丁二烯致染色体损伤的遗传易感性与CYP2E1和GSTs基因多态性关系

[目的]探讨代谢酶基因CYP2E1和GSTs的基因多态性与1，3-丁二烯致外周血淋巴细胞染色体损伤易感性的关系。[方法]采用胞质分裂阻滞微核试验方法（CBMN）评价166名丁二烯接触工人和41名对照组染色体损伤水平，应用PCR-RFLP测CYP2E1 clc2基因多态，PCR法测GSTT1和GSTM1缺失情况。[结果]接触组和对照组的微核发生率分别为（3．23±2．49）％。和（1．22±1．19）％。，差别有统计学意义（P〈0．01）。多因素Poisson回归分析发现CYP2E1 c1c2／c2c2基因型和GSTMl非缺失型与染色体损伤相关（分别为矿=14．39，P〈0．01和χ^2=4．23，P〈0．05）。没有发现年龄、工龄、性别、吸烟和饮酒等与微核率之间的关系。[结论]双核淋巴细胞微核数可以作为1，3．丁二烯接触早期健康损害的指标。CYP2E1 c1c2／c2c2基因型、GSTM1非缺失型与1,3-丁二烯诱导的染色体损伤有关。     

2,5-己二酮不同作用时间对大鼠坐骨神经P_0蛋白及血清P_0蛋白抗体水平的影响

目的探讨正己烷代谢产物2,5-己二酮不同作用时间对大鼠坐骨神经髓鞘结构蛋白P0蛋白及外周血中P0蛋白抗体水平的影响。方法选用400mg/kg2,5-己二酮每日经口灌胃染毒Wistar大鼠,观察大鼠的一般状况改变,分别于第0、1、2、3、4周取材,采用免疫组化技术观察不同染毒时间大鼠坐骨神经横断面P0蛋白表达水平,并采用酶联免疫吸附试验检测不同染毒时间,大鼠外周血中P0蛋白抗体的水平。结果随着染毒时间的延长,大鼠逐渐出现明显的中毒症状。P0蛋白在坐骨神经横断面呈不均匀分布,髓鞘较轴索明显;未染毒大鼠坐骨神经横断面P0蛋白呈较高水平表达,随着染毒时间的延长,坐骨神经横断面P0蛋白表达水平有逐渐降低的趋势。染毒0、1、2、3和4周大鼠外周血中P0蛋白抗体阳性率分别为33.3%、26.7%、46.7%、46.7%和84.6%。外周血中P0蛋白抗体的阳性率随染毒时间延长呈现明显增加的趋势(χ2=11.007,P0.05)。结论正己烷代谢产物2,5-己二酮能够破坏大鼠周围神经髓鞘,降低坐骨神经中P0蛋白的水平,提高外周血中P0蛋白抗体的水平。     

重度铅污染地区儿童铅中毒的分子流行病学研究

目的：研究高暴露于铅的条件下，δ－氨基乙酰丙酸脱水酶（ALAD）和维生素D体（VDR）基因多态性对儿童铅中毒易感性的影响。方法：分析了469名严重铅暴露儿童ALAD和VDR基因多态性，血铅、锌原卟啉（ZPP）、头围、身高和体重等指标。结果：具有ALADS等位基因个体，血中ZPP水平高于不含该等位基因的个体（P＝0．017）；携带VDR B等位基因个体的头围大于仅携带b等位基因者（51.19cm和50.75cm）（P＝0．028）。结论：在高水平铅暴露儿童中，ALAD多态性可影响铅的血液毒性效应。VDR基因的遗传变异改变铅对儿童颅骨发育的作用程度。ALAD和VDR基因多态性是影响严重铅暴露条件下儿童铅中毒易感性的分子遗传学因素。