TRAIL基因原核表达载体的构建、表达与抗体制备

目的:获取抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗体.方法:利用PCR技术和基因重组技术将TRAIL基因构建于原核表达载体pPreTMH-Tb中,经酶切、测序鉴定证实构建完全正确后,通过IPTG诱导在大肠杆菌DH-5α中获得表达,并将TRAIL蛋白免疫家兔,通过Dot blot及Western blot检测抗TRAIL抗体的产生.结果:成功构建TRAIL基因原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,TRAIL蛋白表达量占菌体蛋白质总量的11.8%,Dot blot及Western blot检测证实获得了抗TRAIL抗体.结论:成功制备抗TRAIL抗体,这为TRAIL在真核细胞水平研究奠定了实验基础.     

G156A六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶原核表达载体的构建和表达

目的：构建原核表达载体pPROEX HTb-G156A MGMT，观察突变型G156A MGMT在大肠杆菌中的表达情况。方法：通过基因重组技术将G156AMGMT亚克隆至pPROEX HTb原核表达载体，在大肠杆菌DH5α中经异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果：经PCR及酶切分析证实，成功构建了pPROEX HTb-G156A MGMT原核表达载体，经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)显示重组克隆化基因pPROEX HTb-G156A MGMT在大肠杆菌DH5α中有表达。结论：G156A MGMT在大肠杆菌DH5α中有表达，为获取突变型MGMT工程蛋白奠定了基础。     

氯胺酮麻醉下空气整复治疗难复性肠套叠

目的：探讨提高小儿肠套叠空气整复复位率的方法。方法：对42例常规空气整复失败的肠套叠患儿在氯胺酮麻醉后再次空气灌肠复位。结果：成功31例，另有3例空气灌肠发现已自动复位，8例复位失败而手术治疗。结论：氯胺酮麻醉下空气整复可明显提高复位率，安全，有效。     

乳腺癌CR钼靶X线征象分析

目的:提高乳腺癌的诊断水平。方法:回顾性分析经手术病理证实的33例乳腺癌的钼靶X线征象。结果:41岁~60岁25例(75.7%),外上象限12例(36.3%),肿块24例(72.7%),肿块伴毛刺16例(66.7%),簇状钙化9例(27.3%)。结论:钼靶X线对乳腺癌的诊断具有重要价值。     

空腹与餐后条件下非洛地平缓释片在健康人体内的药代动力学比较研究

目的 研究进食对口服非洛地平药代动力学参数的影响。方法 使用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)法测定空腹及餐后条件下口服非洛地平缓释片后受试者血浆中药物浓度;计算两种条件下药动学参数与累计吸收百分数。结果 采用非房室模型计算药动学参数,空腹组和餐后组的最大血药浓度（C_max）分别为1.57±0.83、5±2.36 ng·mL^-1;0~60 h的血药浓度时间曲线下面积（AUC_0-60）为(19.56±10.18)、(31.49±9.91) h·(ng·mL)-1;0到∞时的血药浓度时间曲线下面积（AUC_0-∞）分别为(21.98±11.53)、(34.1±10.97) h·(ng·mL)^-1;消除半衰期（t_1/2）分别为(19.52±7.3)、(22.08±6.74)h;达峰时间（T_max）分别为(4.12±2.26)、(4.17±1.13)h;清除率（Cl）分别为(290.53±149.81)、(161.33±51.7)L·h^-1;表观分布容积（Vz）分别为(7 453.92±2 994.86)、(5 006.18±1 828.22)L;最大血药浓度、0~60 h的血药浓度时间曲线下面积、0到∞时的血药浓度时间曲线下面积、清除率、表观分布容积具有显著性差异,且差异具有统计学意义。采用Loo-Riegelman法计算累计吸收百分数。开始时空腹与餐后条件下药物吸收均较快,但在6 h后,餐后条件下累计吸收百分数基本不再增加,而空腹条件下5 h后一直在持续缓慢的吸收。结论 进食对非洛地平的药代动力学参数有较大的影响,可以显著增加人体对非洛地平的吸收速度和程度。     

脊柱损伤80例X线与CT影像诊断对比分析

目的:比较X线与CT对脊柱损伤的影像诊断价值。方法:回顾分析80例脊柱损伤的X线与CT影像资料。结果:80例中X线阳性76例,漏诊4例,CT阳性80例。损伤部位:颈椎3例,胸椎45例,腰椎32例。胸腰椎复合伤15例。合并椎管狭窄26例。结论:X线是脊柱损伤的基本诊断方法,但信息量低,易漏诊。CT为诊断及治疗提供更多信息与依据,对诊断椎管狭窄具有特异性及高度敏感性,在诊断价值上优于X线。     

改良LCTD手术治疗胆道结石的临床应用

目的 探讨改良腹腔镜下胆总管切开取石+T管引流术(LCTD)治疗胆道结石的临床应用价值。方法 回顾性分析2016年6月至2021年12月在本院行胆总管结石手术患者120例。分为A组(改良LCTD组)、B组腹腔镜下胆总管切开取石一期缝合术(LBEPS)组、C组(传统LCTD组)。结果 A组手术前后AKP下降速度要高于B、C组(P<0.05);A组术后发生胆漏、发热并发症例数要少于B、C组(P<0.05)。A组住院时间要短于C组(P<0.05);A组每日胆汁流量要少于C组(P<0.05)。结论 腹腔镜、胆道镜、胃镜三镜联合的改良LCTD手术具有安全、有效、快捷、微创的特点,是治疗胆道结石的有效术式,适合临床推广。     

药物临床研究阶段申办者和生产场地变更研究六:临床研究阶段申办者和生产场地跨境变更的风险分析

目的：通过对临床研究阶段申办者、生产场地发生跨境变更时的风险变化进行分析,为申办者和生产场地的跨境变更管理提供参考。方法：基于申办者和生产场地不同组合情形的初始风险评价结果和采取风险管控措施后的风险再评价结果,比较分析不同组合情形之间发生变更时变更前后的“风险指数水平”变化。结果与结论：基于初始风险评价结果,有两种变更情形的风险指数水平在变更后较变更前降低;基于风险再评价结果,有四种变更情形的风险指数水平在变更后较变更前降低。     

药物临床研究阶段申办者和生产场地变更研究五:申办者和生产场地不同组合方式的风险评估和风险控制研究

目的：对新药临床试验阶段申办者和临床试验药物生产场地的境内外不同组合方式开展风险评估和风险控制研究,为进一步完善我国临床试验阶段申办者和生产场地的跨境管理提供参考。方法：采用失效模式与效应分析及风险指数法,针对申办者和生产场地的境内外不同组合方式进行风险的识别、分析和评估。结果与结论：在新药临床试验阶段,“申办者在境内、生产场地在境外（供全球）”和“申办者在境外、生产场地在境内”是两种风险较低的跨境情形,且可通过适当措施对潜在风险进行管控,可优先考虑打通这两种跨境情形的注册路径。     

紫杉醇药代动力学参数TC > 0.05临床应用横断面调查及影响因素分析

摘 要 目的：探讨紫杉醇（PTX）药代动力学参数临界血药浓度（0.05 μmol·L-1）以上暴露时间（TC > 0.05）在临床应用中的实用性及存在的问题。方法：采用横断面调查方法，收集2019年11月至2021年12月我院89例在院期间接受PTX 3周方案化疗并行PTX血药浓度监测患者的临床资料。PTX血药浓度监测采用MyPaclitaxelTM试剂盒，药代动力学参数TC > 0.05的计算利用MyCare药物暴露计算器。87例患者的125例次PTX血药浓度监测结果被纳入TC > 0.05与血液学毒性结果分析，45例患者69例次PTX血药浓度监测结果被纳入TC > 0.05与近期疗效关系的分析，89例133例次PTX血药浓度监测结果被纳入TC > 0.05影响因素分析。结果：将TC > 0.05分为< 26 h组、26 ~ 31 h组和＞ 31 h组，三组间血液学毒性发生率和近期临床获益率差异无统计学意义（P > 0.05）。患者年龄和PTX剂型对PTX药代动力学参数的TC > 0.05存在一定影响（P ＜ 0.05）。结论：PTX TC > 0.05的靶目标值在临床常规化应用尚需进一步研究论证。另外，在PTX临床应用中要重点关注年龄≥ 65岁的老年患者和使用不同PTX制剂患者TC > 0.05结果，保障用药安全。