蛇毒Ⅱ类磷脂酶A2功能分化的分析研究

目的：研究蛇毒Ⅱ类磷脂酶A2(PLA2)中D49 PLA2和K49 PLA2的功能分化及其功能分化决定位点的鉴定。方法：运用序列比较分析，进化树构建和DIVERGE v1．04软件计算研究D49 PLA2和K49 PLA2的功能分化情况及其分化位点。结果：序列比较分析，进化树构建和DIVERGE v1．04软件计算结果表明蛇毒Ⅱ类PLA2中D49 PLA2和K49 PLA2的确发生了功能分化，对于K49 PLA2来说，1S，7K，11Q，E12，R34，T56，N88，L92，E108，K116，K128可能为功能分化决定位点。对于D49 PLA2，L2，G33，G35，F46和Y118可能为功能分化决定位点。结论：我们首次通过序列比较分析，进化树构建和DIVERGE v1．04软件计算鉴定出蛇毒Ⅱ类PLA2中D49 PLA2和K49 PLA2可能的功能分化位点，为今后通过基因重组和定点突变方法研究蛇毒Ⅱ类PLA2结构功能关系提供了线索。     

转化生长因子-β在哮喘气道炎症与重塑中的作用

Transforming growth factor-β(TGF-β) was reported to be increased in asthma in some studies. Accumulation of TGF-β in airway promotes smooth muscle cell mitogenesis and hyperplasia, and in-duces fibroblast and myofibroblast and smooth muscle proliferation as well as increase in protein synthesis in connective tissue(such as collagen deposition on the reticular basement membrane). The autocrine induction of collagen expression by smooth muscle may contribute to the thickening of the reticular basement membrane, irre-versible f‘throsis and remodeling seen in the airways in some asthmatics. TGF-β is considered to be a major fi-brogenic cytokine. It can increase smooth muscle mass and lead to severe bronchial obstruction in an asthma at-tack.     

特应性皮炎患者外周血调节性T细胞亚群及相应细胞因子的表达

目的 检测特应性皮炎(atopic dermatitis, AD)患者外周血调节性T细胞亚群及相应细胞因子的表达,探讨其与内源性AD和外源性AD诊断及临床分型的意义。方法 选择36例AD患者(内源性AD组、外源性AD组各18例)和15例健康人(对照组),采用流式细胞仪检测各组患者外周血中CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞、CD8⁺ Foxp3⁺Treg细胞和IL-17⁺Foxp3⁺Treg细胞及其细胞因子IL-10的表达情况。结果 与对照组相比较,内源性AD组和外源性AD组患者外周血CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞、CD8⁺Foxp3⁺Treg细胞、IL-10⁺Foxp3⁺Treg细胞百分比均明显降低(P<0.05),内源性AD组IL-17⁺     

气道粘液、粘蛋白及其分泌调节

Mucus secreted mainly by epithelial goblet cells and submucosal glands coveting the respi-ratory tract plays an important role in the protection from external aggressions, such as solid particles,pathogens and chemical agents by mucocilialy clearance, The viscoelastic properties of mucus are mainly deter-mined by the presence of extensively - glycosylated high molecular weight mucins. A lot of factors influence the expression and secretion of mucins in airway, lead to mucus overproduction, which is a distinguishing feature of chronic obstructive pulmonaly disease (COPD) and causes disruption of the mucocilialy clearance function,resulting in airway block, chronic infection and death.     

肥大细胞脱颗粒信号的自我放大机制

目的：变态反应性疾病包括支气管哮喘、变应性鼻炎、变应性皮炎、食物及药物过敏等，发病率约占全球人口的40％，对人类危害极大。目前已经证实此类疾病的发生是一种炎症过程，而肥大细胞被认为在这种炎症过程中起着重要的作用，被称为初级效应细胞（primary effector cells），是连接变态反应诱导阶段和效应阶段的纽带。但是，迄今为止微量过敏原引起机体大量肥大细胞激活的机制尚不清楚，因而很有必要给以深入研究。方法：①肥大细胞激活实验：以类胰蛋白酶、组胺、蛋白酶激活受体激动剂等激活酶悬浮的人大肠肥大细胞，并分别用酶联免疫吸附试验和特异性玻璃纤维结合荧光检测技术测量类胰蛋白酶和组胺的分泌量②小白鼠腹腔炎症性细胞聚集实验：注射后收集腹腔灌洗液并分类计数炎症性细胞③应用激光共聚焦显微镜结合双色荧光标记鉴定肥大细胞亚型。     

蛋白酶激活受体2激动剂对肥大细胞释放组胺的影响

目的 研究PAR-2激动剂(tc-LIGRLO-NH2与SLIGKV-NH2)和胰蛋白酶对结肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 结肠组织经酶消化后,细胞成份用全HBSS重新悬浮。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果PAR-2激动剂tc-LIGRLO-NH2和SLIGKV-NH2均可诱导人结肠肥大细胞剂量依赖性组胺释放。浓度为100μmol／mL时,tc-LIGRLO-NH2和SLIGKV-NH2可分别引起比基础分泌量多出2．5倍和2倍的组胺释放,而反PAR-2激动剂tc-OLRGIL-NH2和VKGILS-NH2在实验浓度高至300μmol／mL时仍对组胺释放无影响。胰蛋白酶在1．0～100μg/mL间可引起剂量相关性组胺释放,胰蛋白酶抑制剂可抑制之。PAR-2激动剂tc-LIGRLO-NH2的作用从加样后1min开始,3min后完成。细胞经过百日咳毒素和代谢抑制剂预先处理后,几乎失去了对tc-LIGRLO-NH2、SLIGKV-NH2和胰蛋白酶刺激的反应性。结论 PAR-2激动剂和胰蛋白酶是高效的组胺释放刺激剂,其在人结肠炎症性疾病中起一定的作用。     

肺非小细胞癌患者中p53、bax的差异表达

目的探讨p53、bax 抑癌基因在肺非小细胞癌组织及癌旁组织中的差异表达.方法以凝胶上rRNA条带的亮度为依据对后续分析用的起始RNA浓度进行调整;以组成型表达的β-actin基因为外对照,对两类组织来源的起始RNA量进行监测;基因克隆及序列分析来验证所用引物的可靠性;随后采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）的方法对各基因在两类组织中的表达谱进行对比分析,并以Northern杂交加以验证.结果在两类组织来源的起始RNA量基本一致的前提下,p53、bax 2个抑癌基因在成对组织中的表达谱存在明显差异.bax在肺癌组织及癌旁组织中均有表达;p53基因在肺癌组织中的表达量较高,且p53的带型与在癌旁组织中表现也明显不同.结论肺癌组织及癌旁组织中存在bax促凋亡基因的转录;p53基因在肺癌组织出现异常转录.     

抗人白介素-28A单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备抗人白介素-28A（hIL-28A）单克隆抗体（mAb）。方法以hIL-28A融合蛋白为免疫原免疫BALB／c小鼠，运用杂交瘤技术制备抗hIL-28A mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类，通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得2株稳定分泌抗hIL-28A mAb的杂交瘤细胞，但2株mAb均与hIL-29有弱交叉反应。2株mAb的类别均为IgM。Western blot分析表明，此mAb所识别的靶分子的相对分子质量（Mr）约为19000。免疫组化染色表明，mAb与包皮和肺组织中的上皮细胞、结肠组织中的疑似巨噬细胞呈阳性反应。流式细胞仪分析显示，2株mAb与人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞的反应均呈阳性。激光共聚焦扫描显微镜观察到荧光标记的阳性反应物主要位于HUVEC细胞胞浆内。结论成功地制备抗hIL-28A mAb，为病毒感染性疾病、肿瘤和其他疾病的研究提供新的手段。     

沈阳农村哮喘发作危险因素调查

哮喘是我国的常见病和多发病,严重影响人们的健康.关于哮喘流行病学调查报道很多,但关于哮喘发作危险因素的研究却较少,占我国大多数人口的农村哮喘更是未得到应有的重视.我们在沈阳市郊区31个自然村,对31 965人进行了有关哮喘发作危险因素情况的调查,现报道如下.     

含胍基类肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂的特性及功能研究进展

 目的 介绍含胍基类肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂的特性及功能研究进展。方法 利用PubMed,Medline,Google Search,JBC-Search,HighWire等软件查阅了国内外的所有相关文献,并对相关内容进行了概括和总结。结果 目前共有5种含胍基化合物被发现具有抑制类胰蛋白酶活性的作用,其中APC2059已经完成了Ⅱ期临床试验。结论 含胍基类肥大细胞类胰蛋白酶抑制剂是一类可望成为临床治疗药物的化合物。