可溶性gp130和gp130反义核酸对IL-6诱导的靶基因启动子活性的影响

ｇｐ１３０是ＩＬ－６信号转导子，ＩＬ－６介导的信号转导起始于ｇｐ１３０与ＩＬ－６、ＩＬ－６Ｒα形成的复合物。为了研究ｇｐ１３０胞外区的结构与功能，在肝癌细胞ＨｅｐＧ２中建立了检测ＩＬ－６诱导基因表达强弱的方法，并观察了含胞外区全长（５９７个氨基酸）及氨基端３０４个氨基酸残基的ｇｐ１３０突变体，以及ｇｐ１３０反义核酸对ＩＬ－６生物学效应的影响。证明两个突变体和反义核酸均拮抗ＩＬ－６信号，为进一步研究ＩＬ－６受体拮抗剂奠定了基础。     

抗人CD20单克隆抗体诱导Daudi细胞凋亡的功能研究

目的　观察由基因重组抗原制备的抗人CD2 0单克隆抗体 (CD2 0 McAb) 1- 2 8对B淋巴瘤细胞的促凋亡作用 ,并探讨其作用机理。方法　利用流式细胞术测定所获 1- 2 8单抗对标准CD2 0 FITC单抗的竞争抑制作用及对胞内游离钙的影响 ;通过电镜观察其诱导Daudi细胞凋亡后形态上的改变 ,免疫印迹实验显示Daudi细胞凋亡后功能上的变化。结果　 1- 2 8能明显竞争标准CD2 0 FITC单抗与Daudi细胞表面CD2 0分子的结合。电镜结果证实了 1- 2 8能够促进Daudi细胞发生凋亡的结论 ;实验结果显示Daudi细胞与 1- 2 8作用后胞内游离钙浓度明显升高 (P <0 .0 5 ) ,细胞内Bcl 2蛋白和caspase酶原的表达量下降 ,而Bax蛋白和caspase酶原降解的活性产物表达增加。结论　 1- 2 8能竞争结合Daudi细胞表面的CD2 0分子并诱导其发生凋亡     

抗血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa Fab抗体的原核表达及其生物活性

目的：研制抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa Fab抗体。方法：通过问接免疫荧光试验和血小板聚集抑制试验，选取鼠源抗血小板糖蛋白Ⅱb／Ⅲa单克隆抗体(mAb P140)。从分泌该mAb的杂交瘤细胞株(P140)中，克隆到抗体轻链基因和重链Fd段基因，构建原核表达重组质粒p3MH／P140x-Fd，并在XLI-Blu菌株中进行表达。采用钴亲和层析法对P140 Fab抗体进行纯化，用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法，对P140 Fab抗体进行检测，并通过血小板聚集抑制试验，观察P140 Fab抗体的抗栓活性。结果：SDS-PAGE和Western blot表明，纯化的P140Fab抗体的相对分子质量(Mr)约为47000。ELISA的结果显示，P140 Fab抗体可与人血小板特异性结合。在体外ADP诱导的血小板聚集试验中，P140 Fab抗体对血小板聚集的抑制作用成剂量依赖性，IC50的平均值为16．85mg/L。结论：成功地研制出具有抗栓活性的抗血小板膜糖蛋白Ⅱb／Ⅲa的Fab抗体。     

gp130胞外区近膜端缺失的突变体介导IL-6信号的研究

目的研究ｇｐ１３０胞外区远膜端和近膜端在ＩＬ－６信号转导中的作用。方法用分子克隆手段构建全长的膜结合型ｇｐ１３０分子和胞外区第３０１～５８２位氨基酸残基缺失的突变体分子，并通过阻滞电泳方法比较突变体与野生型分子在传导信号方面的差异。结果通过酶切鉴定、序列分析和表达检测，证明野生型和突变体ｃＤＮＡ表达载体构建正确，并有效表达；阻滞电泳结果表明，在ＳＫＯ－００７细胞和Ｍｏｌｔ－４细胞中，突变体分子与野生型ｇｐ１３０都能介导ＩＬ－６信号。结论ｇｐ１３０分子胞外区远膜端在ＩＬ－６信号转导中发挥重要作用；而近膜端并非ＩＬ－６信号转导所必需。     

不同反应靶细胞中IL—6对STATl激活的比较

探讨不同反应靶细胞中白细胞介素6(IL—6)对信号转导子与转录激活子1(STATl)的激活。方法：利用抗STATl和抗酪氨酸磷酸化STATl的抗体，进行免疫印迹分析。结果：IL—6可促进7TDl和TFl细胞生长，但在这两种细胞中对STATl的酪氨酸磷酸化水平没有明显影响。M1、R2和U937细胞在IL—6诱导下生长停止并向巨噬细胞方向分化，而IL—6在这3种细胞中均可激活STATl，且激活效应有剂量与时间依赖性。结论：STATl的活化可能与抑制效应有关。我们的数据有助于解释为什么IL—6在不同效应靶细胞中有不同的生物学效应。     

CD3AK细胞过继免疫治疗的实验研究

目的: 分析抗CD3分子的单克隆抗体 (mAb)yCD3的免疫学特性和生物学活性, 观察其激活的免疫活性细胞CD3AK体外及动物体内的抑瘤作用。方法: 用流式细胞术(FCM)测定yCD3的特异性, 以及CD3AK细胞的免疫表型和产生细胞因子的情况。用 3H -TdR法测定yCD3对淋巴细胞转化的作用; 乳酸脱氢酶法 (LDH)测定CD3AK细胞的体外细胞毒活性。建立荷瘤小鼠模型, 观察静脉注射CD3AK细胞后肿瘤生长的情况、转移灶数量和小鼠存活天数。结果: yCD3与T细胞呈特异性反应, 5μgyCD3可竞争抑制 70%的标准抗CD3抗体与细胞表面CD3分子的结合。yCD3刺激外周血淋巴细胞增殖的有效浓度为 8μg/L, 并与IL- 2、抗CD28抗体有协同作用。活化的CD3AK细胞中CD3 、CD8 和CD25 细胞增多; 产生IL- 2和IFN γ的CD3 细胞均有不同程度的增加, 在抗CD28抗体协同刺激下分别增加 3. 29和 2. 47倍。当效靶细胞比为 80∶1时, CD3AK细胞对体外肿瘤细胞杀伤的百分率为 57. 54%。分组观察荷瘤动物, CD3AK细胞治疗组的抑瘤率为 33. 17%, 对小鼠肿瘤肺转移的抑制率为39. 70%, 与LAK细胞联合治疗的疗效更显著。结论: yCD3可活化T细胞, 诱导的CD3AK细胞在体外及动物体内显示抑制肿瘤的作用, 在临床抗肿瘤过继性免疫治疗中具有重要意义。     

FGF和VEGF在血管生成中的作用

血管生成因子,诸如成纤维细胞生长因子(FGF)和血管内皮生长因子(VEGF)是目前研究的一大热点.人们试图通过抑制它们来抑制疾病中病态的血管形成,例如癌症中的血管形成.FGF和VEGF是通过特异性地结合于那些表达在细胞表面上的受体而发挥作用,这些受体都具有酪氨酸激酶活性.这些受体激酶活性的活化使得它们与下游的信号转导途径偶联,而这些途径调节着内皮细胞的增殖、迁移和分化.对FGF和VEGF介导的信号转导途径的抑制剂目前正在进行临床试验.本文主要对现在已知的FGF和VEGF介导的信号转导途径作一,这些途径均导致特定的生物学效应.此外,还将讨论目前已知的这些途径调节血管生成的方式.     

蓖麻毒素A链与底物作用的结构基础及其解毒剂的研究进展

蓖麻毒素是从植物蓖麻籽中分离得到的一种Ⅱ型核糖体失活蛋白，其A链（RTA）为效应链，具有N-糖苷酶活性，通过催化28S rRNA在S/R结构域第4 324位脱去一个保守的腺嘌呤，使核糖体60S亚基失活，从而阻断蛋白质合成途径，引起细胞死亡。RTA因其高细胞毒性，常常用于制备免疫毒素药物，尤其在恶性肿瘤的生物治疗上具有诱人的应用前景；或可能被用作恐怖袭击的生物战剂。本文对RTA与底物相互作用的结构信息及其解毒剂进行综述。     

调更汤治疗围绝经期综合征的最佳时机研究

目的观察和分析围绝经期综合征采用调更汤治疗的最佳时机。方法将2014年6月～2015年6月广东省佛山市南海区妇幼保健院收治的60例围绝经期综合征患者，随机分为对照组、治疗1组、治疗2组（n=20）。治疗1组患者采用调更汤治疗，患者按时服用药物。治疗2组患者采用调更汤治疗，患者不按时服用药物。对照组不给予任何干预措施。3组同时在14、28、42d进行复查并评价。结果治疗1组患者的症状改善情况要显著优于对照组和治疗2组，并且3组中28d时药物改善情况最为明显，差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗1组治疗有效率为90.0％显著优于对照组35O％和治疗2组70.0％（P〈0.05）。结论对围绝经期综合征患者采用调更汤进行治疗，患者需要按时进行服药，能够有效改善患者的症状，在28d时的治疗效果最佳，此为治疗的最佳时机。     

小檗碱对结核病并糖尿病的作用

随着社会生活水平改善，糖尿病发病率有增加趋势，结核并糖尿病是结核病的特殊人群，两病并发率也逐年递增，临床治疗难度大。小檗碱对结核杆菌有抑菌作用，对血糖有调节作用。本文就小檗碱对结核病并精尿病的作用进行综述。