一种适用于大规模高效快速分离培养人头皮毛乳头细胞的方法

目的:寻求适合于毛囊组织工程的大规模高效快速分离培养人头皮毛乳头细胞的方法。方法:将含有毛囊中下部的皮下组织剪碎,加入胶原酶Ⅰ消化2h,悬液经400目筛网过滤,收集被筛网截留的毛乳头进行培养,计算其贴壁率,绘制细胞生长曲线,并与显微解剖法相比较。结果:用这种方法成功分离培养了人头皮毛乳头细胞。结论:消化过滤法是一种能够大规模高效、快速分离培养人头皮毛乳头细胞的方法。     

富含血小板血浆对小鼠触须毛乳头细胞活性和毛囊重建的影响

目的 探讨富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对小鼠触须毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)活性和毛囊重建的影响.方法 将采用2步离心法制备的PRP与采用显微解剖法获得的DPCs共培养,显微镜下观察细胞的形态变化,通过MTT法检测第4和第8代DPCs细胞活性.将新鲜分离的C57BL/6J小鼠背部表皮细胞与第4代的DPCs混合制成含有不同终浓度PRP的细胞悬液并移植至裸鼠体内,观察移植区域毛发形成的时间,4周后处死裸鼠,HE染色计算各组毛囊数量.结果 通过2步离心法获得的PRP中含有的血小板数量约为全血的8.3倍,与未加PRP的对照组比较,终浓度为5％和10％ PRP组不但可促进前6代DPCs的聚集性生长,还可促进前8代DPCs的增殖.在裸鼠体内实验中,10％ PRP组长出毛发的最早时间和形成毛囊的数量分别为(18±1)d和(344±27)根,对照组为(20±1)d和(288±35)根,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PRP既能够增强DPCs的活性,也有助于毛囊的重建.     

毛发诱导结合自体毛囊单位移植技术进行毛发定向重建的研究

目的 将异位诱导形成的毛发组织进行移植,实现毛发的定向重建.方法 制备新生C57鼠的皮肤细胞悬液注射于裸鼠体内,诱导形成皮下异位毛发组织,取出后在体视显微镜下分离成单个毛囊单位,移植至裸鼠体表,并进行大体观察和组织学检测.结果 按照预定密度移植后的毛发成活良好并呈周期性生长,组织学可见各时期相应的毛囊形态.结论 诱导形成的毛发组织可以作为移植物,通过毛囊单位移植的方式,实现毛发组织密度和方向的可控性重建.     

颞肌神经血管定位在颞肌筋膜法动力性矫正晚期面神经麻痹中的意义

背景颢肌筋膜法动力性矫正晚期面神经麻痹(以下简称面瘫)的手术中,存在颞肌血管神经定位困难的问题.为明确颞肌的精细解剖而设计了此次实验.目的通过分组进行人类颞肌的血管神经分束研究,以阐明颞肌动力修复晚期面瘫的显微解剖应用基础.设计随机对照的研究.单位南方医科大学南方医院整形外科及解剖教研室.对象收集2000年自愿遗体捐助的20具24 h内死亡的新鲜尸体头部标本,其中男性12具,女性8具,年龄在16～50岁,平均30岁,死因均为感染或肿瘤等疾病,随机分为4组.方法分别用氧化铅、墨汁或甲基丙烯酸树脂进行血管灌注,并进行神经显微解剖染色,结果拍摄照片,在计算机中进行图像叠加,从而形成血管神经的分束构筑图.主要观察指标①颞肌形态.②颢肌前动脉、颞深后动脉及颞中动脉直径、长度和分布面积百分比.③颞深前神经、颞深后神经及颞中神经直径、长度和分布面积百分比.④颞肌静脉的分布.⑤颞肌神经血管的分束.结果颞肌具有可利用的、有独立神经血管支配的三个肌肉分区,互相之间有丰富的吻合支.结论晚期面瘫眼、鼻和口部畸形的动力矫正可选用对应的颞肌神经血管束一期完成.     

皮肤软组织重复扩张术治疗头面部大面积病变缺损18例临床分析

目的 总结应用皮肤软组织重复扩张术治疗18例头面部大而积病变缺损的临床经验。方法 对已扩张一、两次后的头面部正常皮肤组织进行1-2次重复扩张．利用扩张皮瓣分次修复头面部病变软组织缺损。结果 共治疗18例，头面部病变组织均完全切除，头皮瓣毛发分布较均匀，但比较稀疏，面部有一例切口疤痕较明显，随访6个月，头面部外观及功能修复满意。结论 皮肤软组织的重复扩张术是修复头面部大面积病变缺损的一种较好的方法。     

显微分离培养与免疫磁珠法分离纯化人毛囊干细胞

目的 探讨从人毛囊隆突区细胞(bulge cells,BCs)获取高纯度有活性的人毛囊干细胞(hair folliclestem cells,HFscs)的方法及条件. 方法 取自愿捐献的成人头皮标本,显微分离培养获得BCs,应用免疫磁珠纯化BCs中CD200阳性的HFSCs.苔盼蓝染色比较纯化前后细胞活性;流式细胞仪检测细胞纯化效率;免疫荧光检测纯化前后细胞CD200的表达情况. 结果 显微分离培养获得的人毛囊BCs,培养6 d后细胞生长融合,呈铺路石样.所得细胞角蛋白19组织化学染色阳性.CD200免疫磁珠分选法纯化细胞后,苔盼蓝染色显示纯化前细胞活力为95.0%±0.6%,纯化后为94.2%±1.0%,差异无统计学意义(P＞0.05).流式细胞仪及免疫荧光检测显示纯化前CD200阳性细胞的纯度为8.31%,纯化后CD200阳性细胞纯度为82.31%,纯化后CD200阳性细胞回收率为65.39%. 结论 联用显微分离培养与免疫磁珠法,可获得高纯度HFSCs,且细胞活性不受影响.     

毛囊去皮分离法在毛发移植中的应用

目的：观察毛囊去皮分离法对毛发移植成活率的影响。方法：选择2018年1月-2018年4月笔者科室收治的48例接受自体毛发移植手术的雄激素性脱发（Androgenetic alopecia,AGA）男性患者为研究对象，毛囊分离过程中去除皮脂腺开口以上皮肤。术后评估毛囊脱落率、毛囊存活率及患者满意度。结果：术后，所有患者受区即刻外观良好，患者满意；术后2周，部分移植毛囊毛发脱落；术后3个月毛发脱落率为（45.26±0.99）%，无明显并发症；术后1年，移植毛囊成活率为（96.52±0.11）%，所有患者对手术效果满意。结论：在毛发移植中采用毛囊去皮分离法不影响毛囊的存活率，可防止受区术后出现“鸡皮疙瘩”外观，能够提高术后即刻患者的满意度，值得临床推广。