琼脂糖微囊化成猪胰岛异种移植实验研究

目的观察实验性糖尿病大鼠腹腔内移植琼脂糖微囊化成猪胰岛治疗效果。方法以琼脂糖作为制备微囊的材料,用相分离方法包被成猪胰岛,将18只糖尿病大鼠随机分为3组对照组、未微囊化胰岛移植组、微囊化胰岛移植组,分别进行腹腔内胰岛移植。结果移植前3组血糖水平无显著差异,移植后7天时,3组血糖分别为(22.67±1.15)mmol／L,(18.58±2.62)mmol／L和(12.38±2.68)mmol/L,微囊化胰岛移植组与前2组相比均有显著差异,且生存期明显长于前2组。结论琼脂糖微囊化成猪胰岛可存活于糖尿病大鼠体内,并且具有生物活性。     

白藜芦醇对人甲状腺乳头状癌IHH4细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察白藜芦醇对人甲状腺乳头状癌细胞(IHH4)增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的机制?方法:采用CCK-8法检测白藜芦醇对IHH4细胞增殖的影响;倒置显微镜?透射电镜?DAPI染色观察细胞的形态学变化;细胞免疫荧光和Western blot法检测细胞内cleaved caspase-3蛋白的表达;应用流式细胞技术(flow cytometry,FCM)观察细胞周期和凋亡的改变?结果:①白藜芦醇可以呈时间和浓度依赖性抑制IHH4细胞增殖;②与正常对照相比,加入白藜芦醇后IHH4细胞皱缩?变圆?脱落,细胞质中出现大小不等的空泡,胞质内容物增多;透射电镜下细胞核的染色质高度凝聚?边缘化;DAPI染色后荧光显微镜下观察,细胞核呈致密浓染;③细胞免疫荧光和Western blot显示,随着白藜芦醇作用浓度和时间的增加cleaved caspase-3蛋白的表达明显增加;④流式Annexin V-FITC/PI双染检测显示白藜芦醇呈浓度依赖性诱导IHH4细胞凋亡?白藜芦醇可引起细胞S期阻滞?结论:白藜芦醇可抑制人甲状腺乳头状癌IHH4细胞增殖,诱导IHH4细胞凋亡?白藜芦醇阻滞细胞于S期,可能是抑制IHH4细胞增殖?促使其凋亡的原因之一?     

Ⅱ型糖尿病患者血清脂蛋白(α)水平的变化

采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定50例Ⅱ型糖型尿病人血清脂蛋白（α）水平并与正常对照比较,以了解Ⅱ型糖尿病人血清脂蛋白（α）的变化。结果显示：Ⅱ型糖尿病人血清脂蛋白（α）水平较正常对照明显升高,病程长短及血脂水平对其影响不著,而出现血管并发症时进一步升高。提示Ⅱ型糖尿病人血清脂蛋白（α）水平升高,并可能与血管并发症相关。     

两种微囊化成猪胰岛移植疗效的比较

目的　通过对同一来源的成猪胰岛采用两种不同的免疫隔离材料进行微囊化包裹 ,并植入糖尿病大鼠腹腔内加以比较 ,以明确两种方法间的优劣。方法　将同一来源的成猪胰岛分成三组 :未微囊化组、海藻酸钠微囊组和琼脂糖微囊组。 2 4只糖尿病大鼠随机分为 4组 :对照组、未微囊化胰岛移植组、海藻酸钠微囊化胰岛移植组和琼脂糖微囊化胰岛移植组 ,分别进行腹腔内胰岛移植。结果　 4组糖尿病大鼠胰岛移植前血糖水平无显著差异 ,移植后 1周分别为 (2 2 6 7± 1 15)mmol/L ,(18 58± 2 6 2 )mmol/L ,(12 2 7± 1 36 )mmol/L和 (12 38± 2 6 8)mmol/L ,后 2组与前 2组相比均有显著差异 ,且生存期明显长于前 2组 ,但琼脂糖微囊化胰岛组的生存期明显短于海藻酸钠微囊化胰岛组 (分别为平均 57 10d和 145 17d)。结果　两种包膜材料制备的微囊化成猪胰岛均可存活于糖尿病大鼠体内并发挥生物功能 ,但海藻酸钠微囊化胰岛组较琼脂糖微囊化胰岛组的存活期明显延长。     

糖尿病伴高血压与高血压病人血清一氧化氮水平的比较

采用镉还原比色法测定高血压病人和糖尿病伴高血压病人血清一氧化氮(NO)的代谢产物——亚硝酸盐和硝酸盐(NO_2—NO_3)水平,以间接反映机体内源性一氧化氮水平的变化并加以比较。结果显示:高血压病人血清NO_2—NO_3值(36.7±11.3μmol/L)显著低于正常对照值(52.60±3.6μmol/L);糖尿病伴高血压病人血清NO_2—NO_3值(80.1±31.5μmol/L),显著高于正常对照值。结果提示:NO与高血压和糖尿病伴高血压的发生密切相关,前者表现为NO水平下降,后者则与血管内皮功能受损,对NO介导的扩血管反应减弱有关。     

高糖状态下肾小管上皮细胞肌肌醇加氧酶表达变化对TGF-β1表达的影响

目的:探讨高糖状态下肌肌醇加氧酶(MlOX)表达变化对肾小管上皮细胞TGF-β1表达的影响.方法:①在体外培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E.应用不同浓度高糖刺激NRK-52E细胞48 h,观察MIOX、TGF-β1 mRNA和蛋白表达的改变;②观测不同浓度TGF-β1刺激NRK-52E细胞48 h后MIOX mRNA和蛋白表达的变化;③应用针对MIOX基因的ASODN干涉NRK-52E细胞抑制MIOX基因表达后再用高糖刺激.观测其对TGF-β1 mRNA和蛋白表达的影响.结果:①不同浓度(15、30mmol/L)高糖刺激NRK-52E细胞48 h后MIOX、TGF-β1 mRNA和蛋白表达增加;②不同浓度(1、5、10、25 mmol/L)TGF-β1刺激NRK-52E细胞48 h后MIOX mRNA和蛋白表达无明显变化;③针对MIOX基因的ASODN干涉NRK-52E细胞使MIOX基因表达下降.同时NRK-52E细胞TGF-β1 mRNA和蛋白的表达也下降.结论:本研究结果提示,高糖刺激肾小管上皮细胞能使MIOX、TGF-β1 mRNA和蛋白表达增加,而且MIOX表达异常可能通过影响细胞因子TGF-β1的表达在糖尿病肾病中起作用.     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对糖尿病大鼠大血管Toll样受体2表达的影响

目的:研究选择性血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(缬纱坦)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠大血管Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)表达的影响.方法:将31只SD大鼠随机分成正常对照组(NC组)和DM造模组,造模组给予STZ 60 mg/(kg·次)腹腔注射,再随机分为DM组和DM 缬沙坦干预组(DV组),DV组给予缬沙坦20 mg/(kg·d)灌胃.于12周时乌拉坦麻醉,取胸主动脉,用RT-PCR方法检测STZ诱导的DM大鼠大血管组织中TLR2 mRNA表达的变化,Western blot检测大血管中TLR2蛋白表达的变化.结果:与NC组相比,DM组和DV组大鼠的血糖明显升高(P＜0.01).而DM和DV组间血糖差异无显著性(P＞0.05);DM大鼠大血管组织中TLR2 mRNA和蛋白的表达明显高于NC组(均P＜0.01),而DV组大血管组织中TLR2 mRNA和蛋白的表达明显低于DM组(P＜0.01),差异均具有显著性.结论:DM大鼠大血管组织中存在TLR2表达的增加,缬纱坦可能通过降低血管组织TLR2表达而对糖尿病大血管炎性改变起防治作用.     

肾上腺髓质素对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响及其机制的研究

目的观察肾上腺髓质素(AM)对高糖培养的肾小球系膜细胞HBZY-1增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法和流式细胞仪测定观察AM干预对HBZY-1细胞增殖和凋亡的影响,同时采用Western blot观察分裂素激活蛋白激酶(MAPK)信号传导途径中ERK和P38MAPK蛋白活性的变化。结果高糖状态下HBZY-1细胞增殖明显增强,凋亡轻度增加;AM干预后HBZY-1细胞增殖明显抑制,平均下降38.8%,同时凋亡明显增强。AM干预后,ERK1/2活性明显抑制,与高糖组比较平均下降约30%,而P38MAPK活性明显增强,较高糖组平均增高约70%。结论AM对高糖培养HBZY-1细胞增殖增强具有抑制作用,并促进其凋亡。这种作用是可能是通过MAPK信号传导途径所介导的。