亚砷酸钠对人永生化皮肤角质形成细胞组蛋白H3K9me2及组蛋白去甲基化酶JHDM2A和JHDM2B表达的影响

目的探讨亚砷酸钠对人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)组蛋白H3K9me2及组蛋白去甲基化酶JHDM2A、JHDM2B表达的影响。方法将对数生长期HaCaT细胞暴露于含终浓度分别为0.00 (对照)、2.50、5.00、10.00μmol/L亚砷酸钠的DMEM高糖培养基染毒24 h。采用实时荧光定量PCR法检测细胞中的JHDM2A、JHDM2B mRNA表达水平,采用免疫印迹法检测H3K9me2修饰水平和JHDM2A、JHDM2B蛋白表达水平。结果与对照组比较,5.00、10.00μmol/L亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞H3K9me2蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P0.05),且亚砷酸钠剂量与H3K9me2蛋白的表达水平呈负相关(r=-0.898)。各亚砷酸钠染毒组HaCaT细胞中JHDM2A和JHDM2B mRNA和蛋白的表达水平与对照组比较无明显变化,差异均无统计学意义(P0.05)。结论亚砷酸钠可以诱导组蛋白H3K9me2表达降低,但不能改变组蛋白去甲基化酶JHDM2A和JHDM2A的表达水平,JHDM2A、JHDM2B可能不参与砷致HaCaT细胞组蛋白H3K9me2的去甲基化作用。     

姜黄素对饮水型砷中毒大鼠肝脏10种元素的影响

目的探讨姜黄素对饮水型砷中毒大鼠肝脏中10种元素的影响。方法 SD大鼠48只,分为6组,雌雄各半,实验周期90 d。采用HG-ICP-OES测定肝砷(As)含量;ICP-OES检测大鼠肝脏中铝(Al)、硅(Si)、镉(Cd)、铬(Cr)、铜(Cu)、铁(Fe)、锰(Mn)、铅(Pb)、锌(Zn)含量。结果 (1)饮水型砷中毒大鼠肝脏10种元素含量变化情况:与正常对照组比较,低、中、高剂量组肝As含量显著增加;低剂量组肝Cu、Zn,中剂量组肝Cu、Fe、Zn,高剂量组肝Cu、Fe、Zn含量显著降低;中剂量组肝Al及高剂量组肝Al、Si、Cr、Mn、Pb含量显著增加。以上各组间比较,差异均有统计学意义。(2)姜黄素拮抗饮水型砷中毒大鼠肝脏10种元素含量变化情况:与高剂量组比较,单纯姜黄素组肝Cu、Fe、Zn,姜黄素拮抗组肝Cu显著增加,单纯姜黄素组肝As、Al、Si、Cr、Mn、Pb,姜黄素拮抗组肝As、Si、Cr显著降低,差异均有统计学意义。结论高砷水可引起大鼠肝脏多元素异常改变;姜黄素能促进砷中毒大鼠肝砷的排砷,对肝脏Cu、Si、Cr元素失衡有一定的改善作用。     

竹荪多糖对砷中毒大鼠肝脏IL-6和TNF-α水平的影响

目的 探讨竹荪多糖对砷中毒大鼠肝脏IL-6和TNF-α水平的影响.方法 SPF级6周龄SD大鼠30只,雌雄各半,随机分为对照组(喂食正常饲料)、砷中毒组(喂食含砷50 mg/kg的饲料)及竹荪多糖组(喂食含砷50 mg/kg的饲料5个月后,以10 g/L竹荪多糖连续灌胃30 d);染毒终点记录大鼠体质量后麻醉处死、经心...     

赖氨酸甲基转移酶PR-Set7及S-腺苷甲硫氨酸在亚砷酸钠调控人永生化皮肤角质形成细胞碱基切除修复基因H4K20me1修饰中的作用

目的探讨赖氨酸甲基转移酶PR-Set7和S-腺苷甲硫氨酸(SAM)对亚砷酸钠调控人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)碱基切除修复(BER)基因组蛋白H4第20位赖氨酸一甲基化(H4K20me1)修饰水平的影响。方法体外培养HaCaT细胞,设对照(24 h)组、NaAsO_2(10.00μmol/L,24 h)染毒组、赖氨酸甲基转移酶PR-Set7小干扰RNA(siPR-Set7)干扰组(50 nmol/L,siPR-Set7,48 h)、siPR-Set7+NaAsO_2组(50 nmol/L siPR-Set7干扰48 h后,10.00μmol/LNaAsO_2处理24 h)和SAM+NaAsO_2组(SAM处理1 h后10.00μmol/LNaAsO_2处理24 h),染色质免疫共沉淀(CHIP)检测N-甲基化嘌呤-DNA-糖基化酶(MPG)、聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP1)、X射线修复交叉互补基因-1(XRCC1)基因启动子区(CHIP1、CHIP2区域)和编码区(CHIP3、CHIP4区域)H4K20me1修饰水平,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测MPG、PARP1、XRCC1基因mRNA表达水平。结果与对照组比较,NaAsO_2染毒组、siPR-Set7组和siPR-Set7+NaAsO_2组MPG、PARP1基因启动子CHIP1区及XRCC1基因启动子CHIP2区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO_2组MPG、PARP1基因启动子CHIP1和CHIP2区及XRCC1基因启动子CHIP1区H4K20me1富集减少;与NaAsO_2染毒组比较,siPR-Set7+NaAsO_2组PARP1基因启动子CHIP1区、XRCC1基因启动子CHIP2区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO_2组PARP1基因启动子CHIP1区及XRCC1基因启动子CHIP2区H4K20me1富集增加(P均0.05)。与对照组比较,NaAsO_2染毒组、siPR-Set7组和siPR-Set7+NaAsO_2组MPG基因编码CHIP4区及PARP1、XRCC1基因编码CHIP3和CHIP4区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO_2组MPG基因编码CHIP3和CHIP4区及PARP1、XRCC1基因编码CHIP3区H4K20me1富集减少;与NaAsO_2染毒组比较,siPR-Set7+NaAsO_2组MPG基因编码CHIP4区及PARP1、XRCC1基因编码CHIP3和CHIP4区H4K20me1富集减少,SAM+NaAsO_2组MPG、PARP1、XRCC1基因编码CHIP3和CHIP4区H4K20me1富集增加(P均0.05)。与对照组比较,NaAsO_2染毒组、siPR-Set7组、siPR-Set7+NaAsO_2组和SAM+NaAsO_2组MPG、XRCC1、PARP1 mRNA表达降低;与NaAsO_2染毒组比较,siPR-Set7+NaAsO_2组XRCC1、PARP1 mRNA表达降低,SAM+NaAsO_2组MPG、PARP1、XRCC1 mRNA表达升高(P均0.05)。结论 NaAsO_2可激活PR-Set7的表达,但由于甲基供体SAM不足,亦导致MPG、PARP1、XRCC1基因H4K20me1富集水平降低,进而使MPG、PARP1、XRCC1 mRNA表达水平降低,参与砷致细胞DNA损伤过程。