糖尿病基因治疗的实验研究Ⅰ.人胰岛素基因真核细胞表达质粒的构建

为有效开展糖尿病基因治疗，作为第一步，本研究构建了人胰岛素原基因与表达载体PRC／CMV的重组体。首先，从质粒PBCA中酶切回收260bp的人胰岛素原基因片段，利用中间载体PBS．SK构建了含人胰岛素原基困片段的过渡质粒PBS．INS，在此基础上构建了真核细胞表达的人胰岛素基因重组体PRC／CMV．INS。     

21世纪初医学展望

医学在过去一个世纪中取得了辉煌的成就,主要表现在:各种严重的生理和病理现象相继被阐明;对疾病的斗争——从治疗到预防,从肉体到精神,从个体到群体,从人到社会,无论在观念上、战略战术与方法上,都有了长足的进步。那么,到下世纪初医学研究的发展趋势如何?为了探讨这个问题,国家科委于1992年10月设立了一个“21世纪初科学发展趋势”课题,委托中国科学院科技政策局组织国内各学科科学家共同来完成。经过3年的研究,现已完成。就医学而言,到21世纪初的发展趋势有如下一些特点:     

构成性表达(constitutive expression)

也叫组成性表达。组成性表达是指不需要其他调节因子、RNA聚合酶与启动子相互作用而发生的基因表达 ,即基础表达。对于一个细胞来说 ,在任何时候都需要其表达一些基因通常是构成性的表达 ,这种表达基本上保持在恒定的水平。一般而言 ,对于正常代谢过程或转录过程必需的酶或蛋白因子的基因 ,都是构成性表达的 ,如管家基因。构成性表达(constitutive expression)@方福德!100005北京$中国医学科学院基础医学研究所     

分子生物学基础

分子生物学基础强伯勤，方福德一、基本概念基因（ｇｅｎｅ）的概念最初来自遗传学，表示体现一定遗传特征的功能单元。现在已经知道它的化学本质是ＤＮＡ分子上一段能够表达多肽链、核糖体ＲＮＡ或转移ＲＮＡ的核苷酸序列，这便是基因的分子生物学概念。按照这个概念，基...     

中国人β类球蛋白基因多态性研究

本文首次报告在中国人的ψβ_1和ε球蛋白基因中及其旁侧序列中存在三个多态性HincⅡ酶切位点。用含入ψβ_1序列的重组质粒PP3.9的BglⅡ和Xbal双酶解片段(1.8kb)作为探针,与正常人DNA的HincⅡ酶解片段行sou thern印迹杂交,所得杂交自显影图谱上可呈现7.6kb,6.0kb和3.0kb等条带,此系ψβ_1基因之中及     

早期鼠胚简化双针取样法

为建立早期胚胎活检的动物模型，以安全高效地开展人类的植入前遗传学诊断，应用显微操作技术，对发育到8细胞期的小鼠胚胎进行了透明带溶洞吸取单个卵裂球的研究。结果表明：简化组的胚胎活检时间显著缩短，而胚胎完整率及单个卵裂球的完整率与传统组无明显差别。对照和两实验组胚胎在体外培养过程中均出现不同程度的胚胎发育延迟现象。活检后胚胎桑椹胚的发育率较对照组显著降低，但三组胚胎的出生率和生后三周仔鼠的体重无显著性差别，提示简化组的胚胎活检是安全而高效的，因而为开展人类的早期胚胎活检提供了方法学的参考。     

人成纤维细胞在裸鼠体内生长和胶原分泌的观察

目的观察人成纤维细胞注射移植后是否在裸鼠体内增殖并分泌胶原。方法将经原代培养的2×1010L-1人成纤维细胞1mL注射于BALB/CNU裸鼠真皮内,于1、2和3个月处死取材,行HE和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化染色。结果在1、2和3个月时可以观察到人成纤维细胞在裸鼠体内呈分裂象,随着时间的推移细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌量呈增多趋势。结论人成纤维细胞注射移植裸鼠后,能够自行分裂、增殖并分泌人Ⅰ、Ⅲ型胶原,为自体成纤维细胞作为移植材料,发挥充填功能的持久性提供了理论依据。     

β类珠蛋白基因的多态性及其在β地中海贫血产前诊断中的应用

人类β类珠蛋白基因的排列为5’-ψβ_2-(?)-Gγ-Aγ-ψβ_1-δ-β-3’(ψβ_1和ψβ_2为假基因),全长约65kb。β类珠蛋白基因具有遗传异质性.在正常情况下,某些核苷酸位点可以发生中性改变,构成β类珠蛋白基因多态性。此种多态性对β珠蛋白的合成并不产生影响,只是作为一种遗传标志而已。β地中海贫血(以下简写为β地贫或β~(thal))除了β珠蛋白基因(简写为β基因)的外显子、内含子或旁侧序列发生特异性突变或部分缺失(它     

人谷胱甘肽S－转移酶基因π（cDNA）的筛选和鉴定

采用免疫筛选法和寡核苷酸探针筛选法从人肺ｃＤＮＡ文库中筛选得到人ＧＳＴ一ｐｉ（ＧＳＴ－ｘ）ｃＤＮＡ，对其序列进行了测定和分析。