hsp60基因多态性在中国汉族人中的分布

目的 检测中国汉族人热休克蛋白60（heat shock protein 60,hsp60）基因调控区和编码区的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）,寻找hsp60基因的遗传标记.方法 采用分片段扩增直接测序的方法检测60名汉族人hsp60基因的5＇侧翼区、部分编码区和内含子区,将测序结果与美国国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information,NCBI）及国际人类基因组单体型图计划（International HapMap Project,HapMap）中日本人、欧洲人及非洲人的序列进行对比,确定中国汉族人群hsp60基因SNPs的位置、类型和频率.结果 在hsp60基因2号外显子区发现1个新的同义SNP,位于2号染色体198189061位,最小等位基因频率（the minor allele frequency,MAF）为0.025.检测区域内包含11个已报道的SNPs,7个未在研究人群中检出;4个被检出的SNPs为rs1116734、rs3749095、rs1050347、rs8539,MAF分别为0.51、0.30、0.29、0.49;rs1116734、rs1050347、rs8539在日本人和中国汉族人群中的分布相似;rs3749095在中国汉族人中较常见,在日本人种中未检出;rs8539在欧洲及非洲人中的分布与在中国人的分布差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 中国汉族人群hsp60的SNPs分布有别于其他人种,rs1116734、rs3749095、rs1050347、rs8539是hsp60基因在中国汉族人群中较常见的SNPs,可为Hsp60蛋白功能研究及hsp60基因与疾病关联研究候选SNPs的选择提供科学依据.     

灯盏乙素对乳腺癌细胞中环状RNA OXNAD1与SMARCA5的影响

目的〓检测灯盏乙素对乳腺癌MDA-MB-231细胞中的环状RNA（Circular RNA,circRNA）的相对表达量的影响,进一步探索灯盏乙素对肿瘤的作用机制。方法〓采用实时荧光定量PCR的方法,检测对照组与不同剂量组的灯盏乙素处理后的乳腺癌细胞中circRNA OXNAD1与SMARCA5的相对表达量。结果〓灯盏乙素在低剂量（1、10、25μm）的情况下,使得乳腺癌MDA-MB-231细胞中circRNA OXNAD1的表达量显著降低（P<0.05）,在高剂量（100μm）时显著升高（P<0.05）。灯盏乙素在低剂量（1、10、25、50μm）的情况下,使得乳腺癌MDA-MB-231细胞中环状RNA SMARCA5的表达量显著降低（P<0.05）,在高剂量（100μm）时显著升高（P<0.05）。结论〓灯盏乙素影响circRNA OXNAD1与SMARCA5的表达,并且存在剂量反应关系,低剂量与高剂量呈现出相反的表达量变化。     

Let-7与Dicer基因在肺癌组织和癌旁正常组织中表达的比较

目的 探讨Let-7a、Let-7b与Dicer基因在肺癌组织中的表达特征及相互调控关系.方法 选择47例肺癌患者并收集癌组织和癌旁正常组织,用TRIzol法提取总RNA,实时荧光定量PCR检测基因表达量.结果 Dicer基因在癌组织中的相对表达量(9.65±2.31)明显低于癌旁正常组织(11.79±2.71),差异有统计学意义(P＜0.05),Let-7a、Let-7b基因表达无明显变化.4例有远处转移的个体癌组织中Let-7b基因相对表达量(16.97±2.11)高于43例无转移者(14.87±1.92),差异有统计学意义(P＜0.05).在癌旁正常组织中,Let-7a、Let-7b均与Dicer基因的表达呈负相关(P＜0.05),在癌组织中未发现相关关系.结论 Dicer基因在癌组织中表达降低,并且可能失去与Let-7a、Let-7b基因的正常调控关系.     

宣威地区非小细胞肺癌患者线粒体DNA突变与多态性研究

【目的】寻找宣威地区肺癌患者肺组织中线粒体DNA突变和多态性情况,为进一步研究宣威地区女性肺癌高发机制提供参考。【方法】征集28例宣威籍肺癌患者,收集癌组织和相应癌旁正常肺组织,提取线粒体DNA ,实时荧光定量PCR和直接测序方法检测线粒体DNA突变和多态性改变。【结果】28例肺癌组织样本同对应癌旁组织比较,有21例（75．0％）发生mtDNA突变,15例有多种突变,突变发生在DLOOP 区,以及呼吸链编码区等区域。突变与患者年龄、性别,及组织学类型无明显联系。28例肺癌组织、相应癌旁组织同M t-DNA剑桥序列比较,有3例有mtDNA多态性改变。【结论】宣威肺癌患者线粒体DNA存在特异性的突变位点,以及多态性位点,可能和当地特殊的燃煤污染暴露及遗传易感性有关。     

慢性乙型肝炎患者血浆脂氧素A4水平与疾病临床分度的关系研究

目的：探讨慢性乙型肝炎患者血浆脂氧素A4水平与疾病临床分度的关系．方法选取病毒性肝炎乙型慢性轻度患者34例、慢性中度患者30例,慢性重度患者30例,采集患者外周静脉血分离血浆,应用酶联免疫方法测定血浆脂氧素A4的含量,分析脂氧素A4与慢性乙型肝炎临床分度的关系．结果慢性重度肝炎患者外周血脂氧素A4水平显著低于慢性轻度患者和慢性中度患者（P〈0.05）,和疾病临床分度显著相关．外周血血浆脂氧素A4的含量与ALT和AST的水平均成负相关,相关系数为分别为＝-0.41,＝0.019和＝-0.37,＝0.034．结论外周血血浆脂氧素A4的含量与慢性乙型肝炎临床分度相关．     

灯盏乙素、灯盏乙素苷元及四乙酰灯盏乙素苷元联合三氧化二砷对乳腺癌细胞的增殖抑制作用研究

目的 探讨灯盏乙素及其衍生物和三氧化二砷单独及联合用药对乳腺癌细胞的作用。方法 将体外培养的乳腺癌MDA-MB-231细胞分成对照组和用药组,每组设6个复孔。用药组为灯盏乙素及其衍生物（灯盏乙素苷元与四乙酰灯盏乙素苷元）单独用药,以及与5μM三氧化二砷一起联合用药。用MTT法测试它们对乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用。结果 灯盏乙素单独用药时,剂量为10μmol·L-1、50μmol·L-1、100μmol·L-1时,对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为（0.01±5.56）%、（18.18±3.46）%、（35.72±5.27）%;灯盏乙素与5μM As2O3联合用药时,抑制率分别为（13.55±3.54）%、（32.6±5.09）%、（35.29±6.96）%。灯盏乙素苷元单独用药时,剂量为10μmol·L-1、50μmol·L-1、100μmol·L-1时,对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为（1.13±5.46）%、（1.68±6.55）%、（3.86±5.51）%;与5μM As2O3联合用药时,抑制率分别为（17.90±2.41）%、（28.13±4.63）%、（34.94±2.41）%。四乙酰灯盏乙素苷元单独用药时,剂量为1μmol·L-1、5μmol·L-1、10μmol·L-1时,对MDA-MB-231细胞的抑制率分别为（0.76±5.07）%、（1.34±4.07）%、（-0.40±7.59）%;与5μM As2O3联合用药时,抑制率分别为（16.52±5.91）%、（17.25±3.89）%、（13.62±7.24）%. 结论 单独用药时,灯盏乙素对MDA-MB-231细胞的抑制作用大于灯盏乙素苷元及四乙酰灯盏乙素,糖基的去除和乙酰化使其作用减弱;与三氧化二砷联用时,灯盏乙素及灯盏乙素苷元对细胞有显著的抑制作用。其中,灯盏乙素苷元单独使用无抑制活性,却能显著增强三氧化二砷对细胞的抑制作用。灯盏乙素苷元与三氧化二砷联合用药具有治疗乳腺癌的应用前景。     

ALAD基因多态性与儿童血铅水平关系研究

目的探讨影响儿童血铅水平的因素,以及血铅水平与ALAD基因多态性之间的关系。方法对2016年云南省某铅冶炼厂周边某小学1~3年级281名学生进行研究。用调查表对调查对象一般情况进行收集;测量身高、体重等发育指标;同时采集外周静脉血样,进行ALAD基因分型以及血铅检测。结果 ALAD1-2组儿童血铅水平[(114.71±96.11)mg/L]高于ALAD1-1组[(87.17±73.11)mg/L],但差异无统计学意义。不同年龄组间的血铅水平差异有统计学意义(F=8.826;P0.01);进一步对影响血铅水平的因素进行多元回归分析发现,儿童血铅水平与年龄呈负相关(r=-0.197,P0.01)。结论较低血铅水平儿童ALAD基因多态性与血铅水平的关系需进一步进行研究。儿童的血铅水平与年龄呈负相关。儿童血铅水平由遗传因素和环境因素共同决定,加强对儿童良好生活习惯的健康教育,必要时可同时进行行为学的干预,可有效地降低儿童的血铅水平。     

砒霜厂工人外周血淋巴细胞Dicer基因相对表达与尿砷代谢产物的关系研究

目的 通过比较职业性砷暴露人群与对照人群外周血淋巴细胞Dicer基因表达的差异,探讨职业性砷暴露人群外周血淋巴细胞中Dicer基因的表达与尿砷代谢产物之间的关系.方法 于2011年选取43名砒霜厂职业性砷暴露工人为暴露组,23名无砷暴露史人群为对照组,采用TRIzol法提取淋巴细胞中的总RNA,利用实时荧光定量PCR方法检测Dicer基因的表达,采用氢化物发生原子吸收分光光度法检测尿中各类砷化合物的含量.结果 砒霜厂工人无机砷、甲基胂酸、二甲基胂酸、总砷含量均高于对照组,二级甲基化指数低于对照组,外周血淋巴细胞中Dicer基因mRNA的表达(6.90±0.24)高于对照组(5.08±0.24),差异均有统计学意义(P＜0.01).尿中无机砷、甲基胂酸、二甲基胂酸、总砷与外周血淋巴细胞中Dicer基因mRNA表达呈正相关(P＜0.01);二级甲基化指数与Dicer基因mRNA表达呈负相关(r=-0.384,P＜0.05).结论 职业性砷暴露工人外周血淋巴细胞Dicer基因表达升高,可能与砷代谢甲基化过程有关.     

砒霜厂工人砷暴露与六个线粒体基因DNA损伤的关系

目的 探讨职业砷暴露人群六个线粒体基因DNA损伤情况,并分析线粒体DNA损伤与尿砷及其代谢的关系。方法 于2017—2018年,选择云南某高污染砒霜厂78名工人为砷暴露组,选择附近村庄无砷接触史的24名居民为对照组,采用氢化物发生-原子吸收分光光度法测定人群尿中不同形态砷含量,采用实时荧光定量PCR方法检测人群外周血中ND1、ATP6、ATP8、COX1、COX2、COX3等六个线粒体基因DNA损伤水平。结果 砷暴露组尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸及总砷含量均显著高于对照组（P<0.05）,一甲基胂酸和二甲基胂酸百分比显著高于对照组（P<0.05）,二甲基化指数显著低于对照组（P<0.05）。砷暴露组六个线粒体基因DNA损伤水平显著高于对照组（P<0.05）。六个线粒体基因DNA损伤水平与尿中无机砷、一甲基胂酸、二甲基胂酸、一甲基胂酸百分比呈正相关（P<0.05）,与二甲基胂酸百分比呈负相关（P<0.05）。高二甲基化指数组的六个线粒体基因DNA损伤水平显著低于低二甲基化指数组（P<0.05）。结论 职业砷暴露导致人群线粒体DNA损伤,线粒...