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人卵GST-ZP3融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫原性的检测 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:在大肠杆菌中表达人卵透明带3(Human zona pellucida3,HuZP3)蛋白并对其进行纯化。方法:将HuZP3基因的核心片段克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和序列分析后,用重组质粒转化E.coli BL21,经IPTG诱导产生GST-HuZP3融合蛋白并通过Glutathione Sepharose 4B纯化。以纯化的融合蛋白免疫纯系Balb/C小鼠制备抗血清。抗血清的效价采用ELISA检测。结果:成功地构建GST-HuZP3融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中高效表达特异性的GST-HuZP3融合蛋白。以该融合蛋白免疫小鼠获得高效价抗GST-HuZP3抗血清,且该抗血清可识别大肠杆菌表达的重组ZP3。结论:获得高表达的GST-HuZP3融合蛋白并证实其具有良好的免疫原性,可作为抗原研制开发检测不孕妇女体内是否存在抗自身ZP3抗体的诊断试剂盒。 相似文献
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精子活动率是男性授孕的一项最重要的因素,为精子尾部运动提供主要能量的是通过果糖分解和三羧酸循环合成的ATP。与ATP合成有关的酶及底物的报道已有许多,但对于精浆中延胡索酸酶(E、C、4、2、1、2)的报道却很少。笔者收集了男性不孕患者的精液,测定分析精浆中延胡索酸酶的活力及与精子质量的关系。 材料和方法 收集了64例年龄在25~34岁之间,禁欲4天以上的男性不孕患者的精液,按操作规程测定了每份精液的体积,精子数量及活动度,然后用1200g离心20分钟,将精子与精浆分离,分离后 相似文献
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前S1抗原与其他乙型肝炎表面标志物的相关性及其临床意义 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 研究前S1抗原与其他乙型肝炎表面标志物的相关性及其临床意义。方法ELISA法和定量PCR法对290份慢性乙型肝炎患者血清进行了HBV preS1-As、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HbcAb、HBV—DNA及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)联合检测。结果 在HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)组中前S1抗原阳性所占比例为71.01%,显著高于HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)组30.97%和HBsAg(+)、HBcAb(+)组41.07%(P〈0.05);ALT、AST升高率均有显著性意义。结论 前S1抗原与其他乙型肝炎表面标志物有一定相关性,在实际工作中两种方法可协同检测,相互补充。 相似文献
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基质金属蛋白酶与肿瘤侵袭、转移的相关性 总被引:4,自引:0,他引:4
人体细胞的增殖与分化在正常情况下是个有序的过程,受到各种机制的调节,可以有效控制细胞增殖的速度。当细胞突变后,这一正常过程受到破坏,取而带之的是非正常细胞无序的增长和分化,某些调节机制受到破坏,形成大量多余细胞,即肿瘤。肿瘤细胞能侵犯破坏周围组织细胞,还可以发生侵袭、转移,目前研究表明,肿瘤的侵袭和转移都需要借助于蛋白酶的表达和激活。 相似文献
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目的:探讨硫酸阿米卡星对乙二胺四乙酸(EDTA)依赖性假性血小板减少症(EDTA-PTCP)患者血标本中血小板聚集的解离作用,为这类标本血小板的准确计数提供有效方法。方法:在1例少见的EDTA-PTCP患者EDTA-K2抗凝管中预先加入或不加硫酸阿米卡星后采集静脉血,分别于采血后不同时间用全自动血细胞分析仪检测血小板数和其他血细胞参数;留取EDTA-K2抗凝血后不同时间加入阿米卡星,观察其对血小板聚集的解离作用,并检查血涂片中血小板形态改变。结果:未加阿米卡星的EDTA-PTCP标本,随采血后标本放置时间(0.5~4.0 h)的延长,血小板数从117×109 L-1逐渐降至41×109 L-1。在EDTA-K2抗凝管中预先加入阿米卡星的血标本,血小板计数在正常参考值范围内,且标本室温放置4.0 h内血小板计数值相对稳定。采集的血标本放置30 min以内加入阿米卡星,血小板计数(186×109 -1~191×109 L-1)在正常参考值范围内,血涂片镜检可见聚集的血小板明显解离,而超过30 min后加入硫酸阿米卡星,随标本放置时间(40 min~4 h)的延长,血小板计数从放置40 min时的168×109 L-1逐渐降至放置4 h时的42×109 L-1,镜检血涂片中血小板逐渐明显聚集。结论:留取血标本前或留取标本后30 min内加入一定量硫酸阿米卡星,全自动血细胞分析仪检测EDTA-PTCP患者血小板计数是准确的,且其他血细胞参数的测定未受影响。 相似文献
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目的:评价本科室2台凝血分析仪(美国Beckman-Coulter公司的ACL-9000型和ACL-200型)检测凝血常规(包括PT、INR、FIB、APTT)的准确性和一致性.方法:使用重复性试验检测2台仪器的精密度;使用比对试验评价2台仪器检测凝血常规的准确性和一致性.结果:ACL-9000型凝血分析仪有关各项检测结果的重复性较好,其CV值均小于5%;ACL-200型凝血分析仅有关异常标本FIB的重复性较差,CV值为6.6%.与ACL-9000型凝血分析仪相比,ACL-200型凝血分析仪的检测结果与其有着良好的相关性,相关系数γ均大于0.975.结论:在保证每台仪器的重复性和稳定性都良好的前提下,定期对凝血分析仪进行比对分析,能够及时发现仪器存在的系统误差,通过调整与校准可以确保检验科回报结果的准确性和一致性. 相似文献