单次上游单闪离心高活力精子分离与宫腔内授精

介绍了一种用于宫腔内授精（ＩＵＩ〖）的高活力业郛分离方法－单次上游单次离心法，活性精子提取率为（１９．９±６．３％），其中，ａ精子提取率为（３２．０±１３．８％）。提取的精子悬液中，ａ精子率为（８３．８±５．５％），精子活动率约９５％，畸形精子率下降了６个百分点。应用上述方法进行精子分离对２７例男性少、弱、畸精子症致不育夫妇进行了４０个周期的ＩＵＩ治疗，妊娠率（ＰＧＲ）２０％，ＩＵＩ中精子数量超过     

应用宫腔镜取出胎儿骨片1例报告

患者,２７岁,农民,２—０—１—２,２年前因妊娠３ 月在当地卫生院行钳刮术,术中过程尚顺利,术后反复下腹痛伴经期延长,月经周期及经量正常。曾辗转多家医院就诊,Ｂ型超声检查发现宫腔内强回声,疑宫内节育环,先后“取环”４次,均感有环而无法钩出,遂转诊我院。一般妇科检查无异常,Ｂ超发现子宫后位,大小形态正常,宫腔内可见一１．２ｃｍ×０．７ｃｍ×０．１２ｃｍ强回声,形态不规则,无典型节育环回声。结合病史疑胎儿骨片残留宫腔而行宫腔镜检查。镜下发现:子宫深７．５ｃｍ,宫腔形态正常,内膜有散在出血点,宫腔内有一１．０ｃｍ×０．６…     

718周期夫精宫腔内人工授精临床因素分析

目的:探讨影响夫精宫腔内人工授精(intrauterine inseminatio,IUI)成功率的各种临床因素.方法:回顾性分析526例患者进行718周期的IUI.对患者年龄、自然周期或超排卵周期、IUI次数、IUI活性精子数量、输卵管条件、子宫内膜厚度与妊娠率的关系进行分析.结果:718周期的IUI中妊娠109周期,其中双胎妊娠率9.2%,三胎妊娠率为2.8%,流产率为22.2%,每周期临床妊娠率为15.2%.自然周期或超排卵周期、单侧或双侧输卵管通畅病人间,妊娠率无显著性差异(P＞0.05).就女方年龄,＜30岁、30～40岁和＞40岁妊娠率分别为17.24%、14.40%和3.22%,年龄越大受孕率越低,＞40岁组妊娠率明显低于前两组(P＜0.05)).第3次IUI的妊娠率明显高于第2次IUI(妊娠率分别为25.00%、10.39%,P＜0.05).当IUI活性精子数量低于1×106时,妊娠率为3.33%,明显低于活性精子数为1～10×106,10～50×106,和＞50×106组(妊娠率分别为15.82%、16.67%和27.27%,P＜0.05).LH峰或注射HCG时,子宫内膜厚度＜7 mm和＞16 mm时,妊娠率分别为7.14%和3.23%,明显低于7～12 mm和13～16 mm组(妊娠率为16.86%和14.18%,P＜0.05).结论:IUI中女方的年龄、IUI活性精子数量和子宫内膜厚度是影响IUI妊娠率的直接因素.     

肌营养不良的分子遗传学进展

肌营养不良症（Muscular dystrophy disease，DMD）是一类较为常见的进行性肌肉变性疾病，在神经系统遗传病中占的比率较高，表现为肌肉进行性加重的萎缩和无力，一般都在青壮年以前发病，随着病情的发展，很多患者丧失劳动力及行走能力，靠轮椅维持生活，严重影响患者的生活质量，严重者危及生命，是一类危害较大的遗传病。这类疾病根据其临床表现、肌肉萎缩的分布、发病年龄、遗传方式又分为假性肥大性、     

地中海贫血羊水及脐血产前基因诊断的临床研究

目的:研究检测α-地中海贫血及β-地中海贫血在产前基因诊断中的临床应用价值.方法:对48例地中海贫血的风险胎儿的羊水(或脐血)应用单管多重PCR体系和反向点杂交法检测α-地中海贫血和β-地中海贫血基因诊断.结果:共有38例胎儿检测出携有地中海贫血.其中α-地贫14例,包括东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)2例,东南亚缺失型纯合子(--SEA--SEA)8例;左缺失型杂合子(-α4.2/αα)1例,右缺失型杂合子(-α3.7/αα)2例,非缺失型点突变(ααT/αα)1例;β-地中海贫血24例,包括CD 41～42杂合子16例,-28(A-G)杂合子3例,双重杂合子3例(ⅣS2nt654/CD41-42,-28(A-G)/CD71-72( A),-α3.7/CD41-42).其中10例重型地贫儿引产,1例重型地贫儿产后新生儿死亡.所有病例经引产或正常分娩后均留取脐带血作地贫基因诊断证实产前诊断.结论:应用单管多重PCR体系及反向点杂交法能快速、准确进行α和β-地中海贫血产前羊水基因检测,这对于有效预防重型地中海贫血胎儿出生具有重大临床意义.     

小鼠胚胎及人包皮成纤维细胞按比例制成混合饲养层上的人胚胎干细胞生长状态★

目的：人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。欲解决以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞为常规饲养层培养人胚胎干细胞时存在的问题，观察两者按一定比例制成的混合饲养层上人胚胎干细胞的生长状态。 方法：实验于2006-04/2007-07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。①对象：包皮来自于行包皮环切的儿童，由海南医学院附属医院泌尿外科提供，儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书，实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN-1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12.5~14.5 d的胎鼠11只，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法：将去除头、四肢和内脏的胎鼠按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养，待生长汇合后冻存部分原代细胞，用丝裂霉素C处理2.0~3.0 h后，按1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后，按1∶0，3∶1，1∶1， 1∶3，0∶1比例混合，然后以1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即混合饲养层。③实验评估：观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态。并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层，观察人胚胎干细胞体外分化情况。 结果：①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较：生长在小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞上的人胚胎干细胞克隆扁平、不饱满，而生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞克隆饱满、厚实，其克隆形态显著好于其他两种饲养层。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较：小鼠胚胎成纤维细胞：人包皮成纤维细胞按1∶1混合时，人胚胎干细胞显著堆积生长，克隆边缘清晰、隆起明显且饱满，按1∶3混合时无明显变化，优于其余3种混合比例。③混合饲养层上人胚胎干细胞未分化状态的检测：碱性磷酸酶染色及OCT-4抗原表达均呈强阳性，分别在200~300 bp和300~400 bp处可见OCT-4和端粒酶 mRNA表达的特异性条带。④体外分化实验：能形成拟胚体，贴壁后人胚胎干细胞可分化为多种形态的细胞。 结论：①与小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞常规饲养层相比，二者混合饲养层能够更好的支持人胚胎干细胞的体外传代培养，获得更佳的克隆形态。②小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合比例为1∶1时效果较好。     

高剂量黄体生成素在卵泡期不同时段对体外受精-胚胎移植的影响

目的探讨在控制超排卵（controlled ovarian hyperstimulation，COH）用药中，高剂量黄体生成素（luteinising hormone，LH）在卵泡的不同时期对体外受精-胚胎移植（in—vitro fertilization and embryo transfer，IVF—ET）的影响。方法采用回顾性研究。常规方案实施IVF—ET的病人359例，按COH中卵泡刺激素（follicle—stimulating hormone，FSH）和LH的不同用量，以及用药时间分为3组：A组（n=252），FSH≥225u／d，且LH≤225u／d（对照组）。B组（n=43）为卵泡晚期高LH接触组，FSH〉225u／d，且取卵前3日内LH〉225u／d（高LH近期组）。C组（n=64）卵泡早、中期高LH接触组，FSH〉225u／d，且取卵前4日或以前LH〉225u／d，取卵前3日内LH〈225u／d（高LH远期组）。对各组受精率、胚胎植入率、临床受孕率、继续妊娠率进行比较分析。结果 A组的胚胎植入率、临床受孕率、继续妊娠率均高于B组（10：4％与7．0％，26．7％与18．4％，20．2％与9．5％，P〈0．05）；而与C组比较则差异无显著性（10．4％与9．5％，26．7％与23．6％，20．2％与18．6％，P〉0．05），但受精率差异显著（60．2％与50．4％，P〈0．05）。C组的胚胎植入率、临床受孕率与B组差异无显著性（9．5％与7．0％，23．6与18．4％，P〉0．05），但C组的继续妊娠率明显高于B组（18．6与9．5，P〈0．05）。结论降调节下COH应用LH〉225u／d时，可使IVF—ET的受精率下降。在卵泡晚期（取卵前3日内）高LH的不良影响较大，其植入率、临床受孕率、继续妊娠率均明显下降。     

疤痕子宫的再分娩问题

“一次剖宫产，永远剖宫产”的说法不知道影响了多少代的产科医生，至今，其影响仍很深远。疤痕子宫能不能经阴道分娩呢?我想，很多产科医生都曾面临过患者的如此询问。对既往有剖宫产史的妇女再次妊娠分娩方式的选择是产科界十分关注的问题。随着近代产科的发展及监测技术水平的日益提高，剖宫产解决了许多难产和异常妊娠问题，将母儿的危险度明显减少。     

丙戊酸引起药物性皮炎1例

在研究正常人丙戊酸肠衣片药物动力学时,有1人出现药物性皮炎,而且其发展过程与药物在体内的代谢、消除过程一致。