维甲酸改变人肝癌细胞表面N－糖链的结构及其酶学机制

用３Ｈ－甘露糖标记７７２１人肝癌细胞表面糖蛋白的Ｎ－糖链，经提取和去唾液酸后，用ＣｏｎＡ和ＤＳＡ亲和柱顺序层析将３Ｈ－标记的Ｎ－糖链分成４个类型和天线数不同的组分来研究维甲酸（ＲＡ）对细胞表面Ｎ－糖链的影响。结果：１０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理细胞３～５ｄ后，可使Ｃ２Ｃ２二天线复杂型Ｎ－糖链增加，而高甘露糖型及三、四天线，特别是带有Ｃ２，６分支结构的复杂型Ｈ－糖链减少。用ＬＣＡ亲和柱还证明二天线糖链中的核心岩藻糖也减少。进一步发现上述改变的酶学机制是ＲＡ降低Ｎ－乙酰氨基萄葡糖转移酶Ｖ和α－１，６－核心岩藻糖转移酶的活力。结论：ＢＡ通过改变某些糖基转移酶活力而改变细胞表面糖链结构，这可能是ＲＡ使７７２１细胞诱导分化的机理之－。     

分化诱导剂对人肝癌细胞亚细胞组分酪氨酸蛋白激酶的早期影响

研究双丁酰环磷酸腺苷（ｄｂｃＡＭＰ）和全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）两种分化诱导剂对人肝癌细胞株ＳＭＭＣ－７７２１亚细胞组分中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的早期（２４ｈ内）效应。方法用超离心等法制备胞液（ｃ）,胞核（ｎ）和膜性（ｍ）ＴＰＫ酶液,以聚谷氨酸∶酪氨酸（ｐｏ１ｙＥ．Ｙ）４∶ｌ及γ－３２Ｐ－ＡＴＰ为底物测定ＴＰＫ活力。结果对照和ｄｂｃＡＭＰ处理１ｈ使ｃＴＰＫ和ｎＴＰＫ升高,以后对照降至原有水平,而ｄｂｃＡＭＰ处理细胞的ｎＴＰＫ在１２～２４ｈ略低于对照细胞,但ｍＴＰＫ在１ｈ反而降低,在３ｈ（对照）或６ｈ（ｄｂｃＡＭＰ）升至高峰,１２ｈ后ｄｂｃＡＭＰ使ｍＴＰＫ活力低于对照。ＡＴＲＡ作用于ＳＭＭＣ－７７２１细胞后,１ｈ可使三类ＴＰＫ活力均升至高峰,１２ｈ后ｃＴＰＫ和ｎＴＰＫ活力低于对照细胞,但ｍＴＰＫ活力在２４ｈ才低于对照。结论ｄｂｃＡＭＰ和ＡＴＲＡ对不同亚细胞组分ＴＰＫ有不同的时相效应。一般说来,早期（１～６ｈ）有升高作用,而在１２～２４ｈ则有一下降作用,呈现双相效应     

Enzyme-linked immunosorbent assay of human placenta type glutathione s-transferase and its application in the diagnosis of hepatocarcinoma

GST-π was purified from human placenta and its antiserum was raised in rabbits. The antibody IgC was purified and degraded into Fab' fragment which was conjugated with horseradish peroxidase (HRP) using N-succinimidyl-4-(N-maleimido-methyl) cyclo-hexane-1-carboxylate (SMCC) as crosslinking reagent to produce Fab'-HRP conjugate. A sandwich ELISA was established for the microquantitative determination of GST-π. The sensitivity was 11 pg/tube, which was far more sensitive than the radioimmunoassay so far reported. Using this method, the serum GST-π of 41 cases normal adult was found to be 1.06±0.94 ng/ml. The upper limit of the normal value was 2.6 ng/ml. In 30 cases of primary hepatocarcinoma, the level of serum GST-π was 24.4± 17.4 ng/ml, which was 23 times higher than the normal average value (P<0.01). The positive rate was 90%. In contrast, serum GST-π in 25 cases of chronic hepatitis was determined to be 1.74±1.16 ng/ml, which was not significantly different from the normal value (P>0.05). The     

合成酶synthetase不是合酶synthase

合成酶synthetase和合酶synthase在生物化学的酶学分类中属于两种完全不同的酶类，不能混为一谈，而目前临床书籍或杂志中往往发生翻译错误，如贵刊2006年第3期中的“胸苷合成酶基因多态性与结直肠癌易感性的关系”一文中将synthase误译成合成酶。     

人肝癌细胞诱导分化的体外研究

作者8年来选用全反式继甲酸（RA）为主要分化诱导剂，用体外细胞培养的方法，并用一系列形态学、生物学、生物化学的分子生物学的新技术和指标来研究RA对人肝癌细胞对SMMC－7721的逆转（分化诱导）作用，获得令人振奋的可喜成果。体外实验有利于药物直接作用于细胞，便于观察指     

肝癌诱导分化治疗基础和临床研究

恶性肿瘤的诱导分化治疗是近年来肿瘤生物学和肿瘤治疗学的研究热点和前沿阵地、由于这种治疗方法不损害正常细胞，已成为肿瘤治疗上新的里程碑。笔者曾用形态学、生物学及生物化学等方法在体外细胞培养水平证明了全反式维甲酸（RA）对人肝癌细胞7721确有诱导分化作用，使其诸多表型向正常逆转。最近还将研究深入到分化机制和体内实验，并应用于临床治疗，今将1992年第一次鉴定后的工作择其主要者介绍如下。一、体外研究Y一谷氨酸转肽酶门一GT）和甲胎蛋白（AFP）是两个公认的人类肝癌的标志，10微摩尔浓度的RA可使人肝癌细胞772］中这…     

脑脊液乳酸脱氢酶及其同工酶与中枢神经系统感染性疾病的关系

在神经生化的领域里,近年来对脑脊液(CSF)中的酶有了较多的注意.许多作者测定了各种神经疾病患者CSF中的酶活性,包括谷-草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸激酶(CK)、醛缩酶(aldolase)、β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)、亮氨酸氨基肽酶(leucine aminopeptidase)、异柠檬酸脱氢酶(ICDH)、酯酶(esterase)、肽酶(peptidase)及蛋白酶(proteinase)等.虽然这些酶活性在病理状态下常可发现明显的变化,但因难于获得大量的正常标本作为对照,多数报道中又未将同一个酶在CSF与血清中的活性进行比较,且亦未列出酶活性与蛋白、细胞计数的相关关系,故对诊断和预后的意义还不太肯定.但其中某些资料对临床诊断方面有一定的价值,LDH及其同工酶就是其中一例.     

亚硒酸钠对人肝癌细胞株甲胎蛋白、纤维连接蛋白及细胞膜糖链的影响

微量元素硒是机体正常生长的必需营养素,它能作为谷胱甘肽过氧化物酶组成部分,参与破坏机体代谢过程中产生的过氧化物,保障细胞膜或蛋白质中特定基团免受损害。随研究深入,发现体内硒水平与肿瘤发生率有密切关系。从实验动物获得的绝大多数资料支持硒是肿瘤细胞抑制剂的论点,特别是对上皮细胞。流行病学调查也提示硒缺乏与某些疾病产生有关。近年来报道用硒治疗消化道肿瘤,有一定成效。但从细胞水平研究硒对消化系     

一种新型超微量恶性肿瘤标志酶——M_2型丙酮酸激酶(摘要)

丙酮酸激酶(PyK,E、C、2、7、1、40)是糖酵解中关键酶之一。它有四型同功酶,即L、R、M_1、M_2型,其中L型分布于肝,肾、小肠,R型存在于红细胞,M_1型存在于肌肉、大脑,M_2型则广泛分布于除肌肉、大脑外的身体各组织。M_1与M_2有交叉免疫但与L、R无交叉免疫。 动物实验证明,不论低恶性高分化的小鼠H_(615)或高恶性低分化的HepA腹水型肝癌,不但有PyK总活力升高,基因同功酶谱均有L型活力降低,M_2型活力升高,恶性程度愈高变化愈明显。免疫沉淀法发现亚硝     

醛糖还原酶ELISA测定及意义

从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶(AR),皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶(HRP)标记制备抗体-HRP交联物,利用夹心ELISA(抗体-抗原-酶标抗体)测定了22例糖尿病人及10例正常对照的红细胞AR水平.结果①糖尿病AR水平显著高于正常人;②AR水平病人约有5倍、正常人约有3倍的变异;③病人AR水平与空腹血糖水平明显相关,正常人无相关;④AR水平与性别、年龄、糖尿病病程无关.结论ELISA测定红细胞AR水平方法简便、特异,为研究AR提供了一个有用的方法.