重组Rab8截短体蛋白的原核表达、纯化和抗体制备

目的 获得Rab8纯化蛋白,制备多克隆抗体,为深入研究Rab8在病毒感染宿主细胞过程中的作用奠定基础.方法 首先从HepG2细胞中克隆Rab基因,然后从Rab8质粒中亚克隆Rab8 C端编码122个氨基酸的基因片段,构建Rab8与6His的融合蛋白原核表达质粒.原核表达与蛋白纯化后,免疫动物,制备Rab8多克隆抗体.采用ELISA法检测其效价.Western检验抗体特异性,间接免疫荧光染色法验证其免疫组化特性.结果 克隆了人Rab8编码基因,构建了表达Rab8 C端编码122个氨基酸的原核表达质粒pQE31-Rab8-122,经过大肠杆菌表达、镍亲和层析柱纯化,获得相对分子量约15 000的融合蛋白,免疫Balb/c小鼠后收获抗血清.ELISA显示抗体效价达1/20 000.Western blot和免疫荧光染色结果显示此多克隆抗体能够与原核表达的Rab8蛋白发生特异性反应,并能够识别HepG2细胞中内源性Rab8蛋白.结论 本研究获得原核表达的Rab8纯化蛋白,成功的制备了Rab8多克隆抗体,为进一步研究Rab8参与病毒感染宿主细胞提供了重要的实验材料.     

加强高校科研诚信建设的几点思考

近些年,国内外高校出现一些学术不端行为,主要有论文抄袭、成果剽窃、数据伪造、不实挂名等多种形式,高校科研诚信建设面临较多新问题和挑战,对科学的公信力和社会资源造成了巨大的危害和浪费.总体看来,科研评价体系、科研资源分配体系、社会大环境等存在的一些问题,以及个人科研诚信道德问题都导致了学术不端行为.政府、社会、高校等皆有责任改善不良、鼓励优秀,营造公平纯洁的学术环境.     

登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达载体的构建及鉴定

目的 构建登革2型病毒NS1-NS2a基因真核表达质粒.方法 RT-PCR扩增NSI-NS2a基因片段后,将其克隆人真核表达载体pReceiver-M01a;过PCR、酶切、测序和间接免疫荧光染色鉴定重组质粒.结果 经PCR扩增、酶切和测序验证,重组质粒构建正确,命名为pRe-NS1-NS2a;重组质粒转染Vero细胞后,间接免疫荧光染色显示细胞质中有登革2型病毒特异性蛋白的表达.结论 成功构建了真核表达质粒pRe·NS1-NS2a.     

芳香化酶在脑中的分布及其细胞定位

大脑的芳香化酶(aromatase,ARO)能催化雄激素如:睾酮(T)和雄烯二酮并使之分别转化为17β-雌二醇(E2)和雌酮的关键酶之一。ARO是由基因CTP19所编码的细胞色素P450家族中的一员。目前,该基因已在人和一些种属的动物被克隆出来,其转录的密码区域从第二个外显子开始延伸有九个外显子[1]。远在19世纪70年代,即已有学者提出在大脑中存在着从T向E2转变的途径的假说,以后在哺乳动物大脑中被证实其确实存在。睾酮在大脑中的许多功能需转变为雌激素时方能起作用。后来的研究确定了在脊椎动物的下丘脑、边缘系统和视交叉前区的特殊部分是出现最多…     

基于弗兰德斯互动分析法在《健康管理》课程说课比赛中师生语言互动行为效果研究

目的 采用弗兰德斯互动分析法,研究在健康管理课程说课比赛中师生语言互动行为对教学质量的影响。方法 通过对健康管理课程说课比赛中3名参赛教师用弗兰德斯互动分析法模型进行统计收集和分析比赛中师生互动数据,探讨3名教师在课堂互动中的行为、学生的反应以及互动模式的特点。结果 说课比赛中发现FIAS矩阵图中,区域E为积极整合格,3名参赛教师的积极整合格与缺陷格频次比远远大于1,3名老师的教学方式都能够缓解课堂紧张气氛,增强师生之间的互动,提高学生的学习效果。C教师与S教师的言语行为分别为91.87%和81.48%,均大于常模;Y教师为52.63%,小于常模,整合教学方式更优于CBL和PBL教学,能更好地帮助学生掌握健康知识和技能,培养健康的生活方式,促进身心健康,并提高健康素养。结论 通过使用弗兰德斯互动分析法,教师可以观察和分析与学生之间的互动,评估教学效果,并针对性地提供反馈和改进建议,以提高教学质量和学生学习效果。同时,教师和学生也可以通过观察和分析互动方式,了解自己的优势和不足,并进行相应的授课方式及内容改进,以鼓励学生积极参与课堂互动,提高学习效果和学生满意度。     

转化医学模式下的医学科研管理

转化医学是生物医药研究领域出现的新理念,新模式,转化医学科研模式下如何认识和加强科研管理是重要课题。本文分析了转化医学概念、内涵、发展现状和趋势,提出了其重要特征和重大现实意义,并根据转化医学的管理学特征,提出了如何开展转化医学科研管理、构建转化医学发展模式的对策。     

高校科技综合评价体系的构建与应用

科技评价是高校科研管理的重要环节,在现阶段我国科技发展及科研管理的条件下,探索构建科技综合评价体系具有重要意义。高校科技综合评价体系的构建要点应从提高评价的权威性、公正性、准确性人手,营造良好的评价大环境,充分注重科研实际成效和科技成果转化,并进行合理的分层分类评价,从而多维度反映真实科技创新能力。通过科技综合评价体系的应用进一步激发高校原始创新活力、提升科技自主创新效能。     

miR-20a对NSCLC细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及与血清肿瘤标志物联合检测的诊断效能

目的探讨miR-20a对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及血清肿瘤标志物联合miR-20a检测在NSCLC诊断中的价值。方法选取该院2013年1月至2015年1月收治的NSCLC患者112例,肺部良性疾病患者94例,采用电化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、糖类抗原(CA)125的表达水平;采用实时荧光定量PCR法检测患者血浆miR-20a的表达水平;对血清肿瘤标志物和miR-20a单独及联合检测在NSCLC诊断中的效能进行分析。结果miR-20a高表达于NSCLC组织,且A594细胞中过表达miR-20a可显著促进细胞增殖、迁移与侵袭(P<0.05)。NSCLC患者血清CEA、NSE、CA125及血浆miR-20a的表达水平明显高于肺部良性疾病患者(P<0.05)。CEA、NSE、CA125及miR-20a联合检测诊断NSCLC的特异度和灵敏度明显高于各肿瘤标志物及miR-20a单独检测(P<0.05)。结论血清肿瘤标志物与miR-20a联合检测对NSCLC具有较高的诊断效能,有较高的临床应用价值。     

针灸联合心理干预治疗肝肾亏虚型类风湿关节炎及对患者负性情绪的影响

目的:探讨针灸联合心理干预治疗肝肾亏虚型类风湿关节炎及对患者负性情绪的影响。方法:选取2016年10月至2018年2月陆军军医大学第一附属医院收治的RA患者120例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组60例。对照组给予来氟米特片和甲氨蝶呤片治疗,观察组同时联合针灸治疗,2组患者均给予心理干预,连续治疗4周。观察并记录2组患者治疗前后临床体征变化;检测血清RA相关指标及炎性因子水平;评估患者焦虑、抑郁状况改善情况。结果:治疗后2组晨僵时间较治疗前缩短,且观察组较对照组缩短更为显著(P 0. 01); 2组压痛关节数目和肿胀关节数目较治疗前减少,且观察组少于对照组(P 0. 01); 2组握力较治疗前明显增强,且观察组高于对照组(P 0. 05或P 0. 01)。治疗后2组血清RF、CCP抗体、CRP、ESR、TNF-α水平较治疗前降低,且观察组低于对照组(P 0. 01); 2组血清TGF-β1水平较治疗前升高,且观察组高于对照组(P 0. 01)。治疗后2组HAMA及HAMD评分均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P 0. 01)。结论:针灸联合心理干预治疗肝肾亏虚型类风湿关节炎可有效改善患者临床症状,降低RA相关指标及炎性因子水平,且改善了患者焦虑、抑郁等不良情绪。     

老年骨质疏松人群血清25（OH）D、跌倒风险及肌力与维生素D缺乏的相关性分析

目的 探讨老年骨质疏松人群血清25（OH）D、跌倒风险及肌力等与维生素D缺乏的相关性。方法 选取2016年2月～2018年3月陆军军医大学第一附属医院骨科门诊收治的126例老年骨质疏松人群为研究对象,测定患者血清25（OH）D、血钙等指标,同时采用站起实验（CRT）、日常步速（NGV）、站起步行实验（TGUG）进行跌倒风险评估、手握式测力仪(HHD)等进行肌力水平测试,并分析老年骨质疏松人群血清25（OH）D、跌倒风险以及肌力等与维生素D缺乏的相关性。 结果 按年龄分组,25（OH）D水平随着年龄越大,水平越低,差异亦有统计学意义（P＜0.05）;患者年龄越大,肌力越小、跌倒风险越高,差异有统计学意义（P＜0.05）。根据25（OH）D检测水平分组,三组患者中,年龄越大,25（OH）D缺乏越严重（P＜0.05）。年龄矫正后,患者25（OH）D水平由低到高,肌力水平逐渐升高,跌倒风险逐渐降低（P＜0.05）。采用pearson相关性分析结果显示,肌力水平与TGVG、NGV、CRT成负相关,且差异有统计学意义（P＜0.05）。线性回归分析发现,25（OH）D水平与TGVG、NGV、CRT呈负相关,相关系数为 0.53、 0.44、 0.46( 均P＜0.05);与肌力呈正相关,相关系数为0.54（P＜0.05）。结论〓老年骨质疏松人群中维生素D缺乏会导致患者跌倒风险明显增加,25（OH）D与得到评分呈负相关,握力减退与维生素D缺乏独立相关。