消可宁颗粒剂对高糖环境下内皮细胞的保护作用

目的 观察消可宁颗粒剂对高糖条件下培养的人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304)的保护作用.方法 苏木精-伊红染色观察体外培养的不同消可宁浓度下的ECV-304细胞形态学改变和四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定ECV-304细胞增殖活性.结果 ①高糖对照组ECV-304细胞生长抑制,变小变圆,出现不同程度的空泡变性.各消可宁组ECV-304细胞出现不同程度的细胞恢复.②80 g/L和100 g/L消可宁组可减轻高糖对ECV-304细胞的生长抑制,与高糖对照组比较具有显著性差异(P＜0.05).结论 高糖引起ECV-304细胞损伤,对其生长增殖具有明显的抑制作用.消可宁可有效减轻高糖对ECV-304细胞的损伤和生长抑制,从而保护内皮细胞.     

复方消可宁颗粒剂对高糖诱导的内皮细胞氧化应激的保护作用

目的：观察消可宁颗粒剂对高糖培养的人脐静脉血管内皮细胞（ECV-304）黄嘌呤氧化酶（XOD）、超氧化物岐化酶（SOD）及超氧阴离子（O2^-.）的影响。方法：体外培养ECV-304细胞,分空白对照组（Ⅰ）、高糖对照组（Ⅱ）和5个消可宁浓度递增组（Ⅲ～Ⅶ）。药物干预后,检测XOD、O2^-.和SOD的吸光度,计算出活力。结果：各消可宁组XOD含量较高糖对照组显著下降,SOD活力明显增加及O2^-.生成减少,两组比较有统计学差异（P〈0.05）。结论：消可宁可能通过降低内皮细胞XOD、减少O2^-.生成,增加SOD活力,从而抗御氧化应激,保护血管内皮。     

CX3CR1参与NF-κB在脊髓水平调控大鼠癌痛的研究

目的 研究鞘内注射核因子-κB（NF-κB）抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（pyrrolidine dithiocar-bamate,PDTC）对骨癌痛大鼠痛觉过敏、脊髓NF-κB和CX3CR1表达的影响.方法 雌性SD大鼠40只,随机分为5组（n=8）：对照组（naive组）、假手术组（sham组）、骨癌痛组（BCP组）、骨癌痛＋生理盐水组（BCP＋ saline组）、骨癌痛＋ PDTC 100 pmol·d-组（BCP＋PDTC组）.术后7～ 14天,BCP＋PDTC组将100pmol·d-1PDTC溶于10μl生理盐水鞘内注射;sham组、BCP＋ saline组给予等容积的生理盐水.分别测定0、1、3、5、7、9、11、14天的大鼠机械性痛觉过敏（PMWT）及自发性疼痛评分;Western blot法测定脊髓NF-κB和CX3CR1蛋白的表达水平.结果 与sham组比,术后第3天开始,BCP组大鼠PMWT减少,自发性疼痛评分增加（P＜0.05或P＜0.01）.与BCP＋ saline组比,BCP＋ PDTC组大鼠PMWT增加,自发性疼痛评分减少（P＜0.05或P＜0.01）.NF-κB和CX3CR1表达下调（P＜0.01）.结论 PDTC可以减轻骨癌痛大鼠的痛觉过敏,其机制可能与降低脊髓NF-κB和CX3CR1表达有关.     

胃粘膜传入信息和一氧化氮在大鼠胃粘膜适应性保护中的作用

采用氢气清除法测定胃粘膜血流量（ＧＭＢＦ），以１％利多卡因消除胃粘膜传入信息，以Ｌ－ｎｉｔｒｏ－ａｒｇｉｎｉｎｅｍｅｔｈｙｌ－ｅｓｔｅｒ（Ｌ－ＮＡＭＥ）阻断内源性一氧化氮生笺合成，研究大鼠胃内灌注低浓度盐酸乙醇后，灌注高浓度盐酸乙醇引起的胃粘膜血流适应性增多反应中，是否有胃粘膜传入信息和ＮＯ参与。     

流体切应力对年轻和老年大鼠肠系膜微动脉eNOS表达和NO释放量的影响

目的观察流体切应力引起的年轻和老年大鼠肠系膜微动脉内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达和一氧化氮（NO）释放量改变对血管老化的作用。方法采用选择性结扎年轻（6月龄）和老年（24月龄）大鼠肠系膜微动脉产生不同的流体切应力,制备正常和高流体切应力（NF和HF）微动脉灌流模型,术后3周分离血管测定年轻和老年大鼠NF和HF肠系膜微动脉NO的释放量及其限速酶eNOSmRNA和总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果增加流体切应力后,血管eNOSmRNA和蛋白质表达水平增加,NO释放量增多。结论流体切应力可以改变eNOS的表达及NO的释放量,从而改善老年大鼠微动脉的功能。     

H_2S对缺血再灌注引发胃黏膜损伤的作用研究

目的研究H_2S对大鼠胃缺血再灌注(gastric ischemia-reperfusion,GI-R)引发氧化应激的影响及可能机制.方法实验采用夹闭腹主动脉30 min再灌注1 h的方法建立大鼠GI-R损伤模型.在此基础上,提前给予大鼠不同浓度NaHS腹腔注射14 d预处理后,Image J分析胃黏膜损伤大体面积,采用HE染色测定胃黏膜损伤深度.分别通过试剂盒和Western blot方法检测胃黏膜组织中氧化应激相关指标.结果不同浓度的NaHS对GI-R后胃黏膜损伤的影响不同,其中10μmol/L NaHS预处理尽管不影响大鼠血浆中H_2S浓度,但显著减少GI-R诱发的胃黏膜面积和损伤深度.与GI-R组相比,NaHS预处理组中丙二醛,H_2O_2水平以及XOD,gp91~(phox),p67~(phox)表达明显降低,同时,还原性谷胱甘肽水平和SOD活性显著增加.结论外源性H_2S通过减少GI-R引起的氧化应激,对胃黏膜起保护作用.     

NO合酶抑制剂在多巴胺抑制小鼠胃肠推进运动中的作用

目的 研究一氧化氮（ＮＯ）合酶抑制剂Ｌ－ＮＧ－硝基粗氨酸甲酯（Ｌ－ＮＡＭＥ）在多巴胺对小鼠胃肠运动影响中的作用。方法 将３２只小鼠随机分为３组;姐,静脉注生理盐水：Ａ组静脉注射多巴胺;Ｂ组静脉分别注射不同剂量的Ｌ－ＮＡＭＥ,１０ｍｉｎ后分别静脉注射多巴胺。采用含１２％活性炭和４％黄芪胶的炭末胶液灌胃,计算２０ｍｉｎ炭末胶液在小肠内推进距离占小肠全长的百分比,以此作为小肠推进速度的指标,同时测定灌胃     

IL-1β抗醋氨酚引起的小鼠肝细胞损伤作用及其与超氧化物歧化酶的关系

目的从组织学上进一步观察白细胞介素１β（ＩＬ－１β）对醋氨酚（ＡＡＰ）引起的肝细胞损伤是否具有保护作用，研究ＩＬ－１β抗肝损伤的可能机制。方法在予醋氨酚前１２ｈ给小鼠腹腔注射ＩＬ－１β，注射醋氨酚后２４ｈ，取肝组织做组织学切片，并检测肝组织中总超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、铜－锌ＳＯＤ及锰ＳＯＤ的活性。结果光镜下可见预先注射ＩＬ－１β可减轻醋氨酚引起的肝细胞损伤，且可使正常及醋氨酚损伤的肝细胞内总超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和锰ＳＯＤ较正常对照组升高。结论ＩＬ－１β可抗醋氨酚引起的小鼠肝细胞损伤，并且这种作用可能是通过锰ＳＯＤ实现的。     

硫化氢对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 观察硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）对内皮细胞凋亡的影响,并从抗氧化的角度初步探讨其作用机制.方法 以硫氢化钠（sodium hydrosulfide,NaHS）作H2S的供体,人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）经10 μmol/L NaHS预孵育24 h后加入33 mmol/L葡萄糖（高糖）作用48 h,以正常对照组、高糖损伤组和10 μmol/L NaHS预处理组作为对照,DAPI荧光染色观察细胞核形态的变化并检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞黄嘌呤氧化酶（XOD）和超氧化物歧化酶（SOD）蛋白质的表达.结果 DAPI染色荧光显微镜观察发现,与正常对照组相比,高糖损伤组HUVECs中出现大量的核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞,NaHS预处理的HUVECs中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀的低强度荧光.Western Blot结果显示,33 mmol/L葡萄糖孵育HUVECs 48 h后,与正常对照组相比,SOD蛋白表达降低37.17%,XOD蛋白的表达增加47.06%;10 μmol /L NaHS 预处理组与高糖损伤组相比,HUVECs SOD蛋白的表达增加27.52%,XOD 蛋白表达降低 31.20%.结论 H2S对高糖诱导的HUVECs凋亡具有拮抗作用,并与其抑制高糖引起的细胞内SOD水平的降低、XOD升高有关.     

间歇性压力刺激通过NO途径改善糖尿病大鼠微血管功能

目的 观察间歇性压力处理对糖尿病大鼠骨骼肌微血管功能的影响.方法 链脲霉素(60 mg/kg)诱导大鼠Ⅰ型糖尿病模型成功后,给予大鼠一侧后肢骨骼肌120 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)的压力,按5 s/15 s的压力/释放模式循环处理30 min/d,持续3周.体视显微镜下分离后肢骨骼肌微动脉,采用微血管离体灌流方法观察微动脉对乙酰胆碱(Ach)引起的舒张反应.应用免疫印迹方法测定微动脉中内皮依赖性的一氧化氮合酶(eNOS)的蛋白表达.结果 与未给予压力处理侧微动脉相比,压力处理使微动脉eNOS的表达增加,同时增强骨骼肌微动脉对Ach引起的舒张反应.结论 骨骼肌间歇性压力处理可以通过增加eNOS表达,改善糖尿病大鼠骨骼肌微血管功能.