荧光定量PCR在医学诊断中的应用

实时荧光定量PCR(Real time fluorescent quantitative PCR)是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。该技术通过荧光信号的积累来实时监测整个PCR进程,使PCR扩增和终产物检测全部处在封闭的条件下进行,从而具有实时监测、无污染、快速、灵敏、精确、特异等特点,极大地克服了原有PCR技术的不足。目前该技术已经广泛应用于肿瘤学、遗传学、免疫学、微生物学、寄生虫学和基因治疗等领域。     

乳腺癌及癌旁组织中VEGF及survivin-2B mRNA的表达意义

目的：观察乳腺癌及癌旁组织中VEGF及survivin-2B mRNA表达情况，并探讨其与临床病理学指标的关系．方法：以逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测60例乳腺癌及癌旁5cm正常乳腺组织标本VEGF及凋亡抑制因子sur-vivin剪接体survivin-2B mRNA表达，半定量分析电泳结果．结果：在60例乳腺癌标本中VEGF及survivin剪接体survivin-2B mRNA均高表达，与癌旁正常乳腺组织中差异有统计学意义（P〈0．01），VEGF mRNA及survivin-2B在乳腺癌组织中的高表达呈正相关（r=0．576，P〈0．05），同时VEGF及survivin-2B mRNA的表达与淋巴结转移有关（r=0．482，P〈0．05）．结论：VEGF及survivin-2B因子为乳腺癌发生、发展过程中的重要因子，可对患者的治疗及预后作预测．     

荧光定量PCR在医学诊断中的应用

实时荧光定量PCR(Real time fluorescent quantitative PCR)是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。该技术通过荧光信号的积累来实时监测整个PCR进程,使PCR扩增和终产物检测全部处在封闭的条件下进行,从而具有实时监测、无污染、快速、灵敏、精确、特异等特点,极大地克服了原有PCR技术的不足。目前该技术已经广泛应用于肿瘤学、遗传学、免疫学、微生物学、寄生虫学和基因治疗等领域。     

宁夏回族人群TCF7L2基因rs290487位点多态性与2型糖尿病的关联性分析

目的:探讨宁夏地区回族人群中转录因子7类似物2(TCF7L2)基因rs290487位点多态性与2型糖尿病(T2DM)的关联性,阐明TCF7L2基因是否为T2DM的易感基因。方法:选择宁夏回族自治区111例T2DM患者(T2DM组)和109名健康对照者(对照组),采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测2组研究对象的TCF7L2基因rs290487位点的基因型和等位基因频数分布;2组研究对象基因型频数、等位基因频数分布的差异分析采用χ²检验。结果:TCF7L2基因rs290487位点共检测到3种基因型TT、CT和CC;2组研究对象TCF7L2基因rs290487位点的基因型频数分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);2组研究对象基因型频数的分布比较差异无统计学意义(χ²=5.370,P>0.05);2组研究对象等位基因频数分布比较差异亦无统计学意义(χ²=0.034,P>0.05)。结论:在宁夏回族人群中,TCF7L2基因rs290487位点多态性与T2DM的发生无关联,TCF7L2基因可能不是T2DM的易感基因。     

甘草酸单克隆抗体的制备与ELISA方法的建立

目的 制备特异性的甘草酸单克隆抗体.方法 通过活性酯法分别制备了甘草酸免疫抗原GA-KLH和包被抗原GA-OVA;用免疫抗原免疫Balb/c小鼠,采用间接竞争ELISA法筛选后,成功获得了能稳定分泌甘草酸单克隆抗体的杂交细胞株3D6;用阳性细胞株刺激小鼠,获得了高效价的、特异性很高的甘草酸单克隆抗体.结果 经检测与甘草酸主要结构类似物甘草次酸的交叉反应率低于0.5％,与熊果酸、齐墩果酸等甘草酸结构类似物无交叉反应;将该方法应用于甘草样品实测,采用HPCL法验证,结果表明:所采用的ELISA分析方法测定的数据与HPLC分析方法有很好的相关性(r2=0.9977).结论 为甘草酸ELISA快速检测试剂盒的开发奠定了良好的基础.