RUNX3 基因启动子甲基化与膀胱移行细胞癌发生的关系

目的 检测抑癌基因RUNX3 启动子区CpG 岛甲基化状态及其在 BTCC 中 mRNA 和蛋白表达水平.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation - specific PCR,MSP)技术检测 BTCC 中RUNX3 基因启动子区域甲基化状态,RT - PCR 和 Western blot 法分别检测其 mRNA 和蛋白表达水平.结果 RUNX3基因在正常膀胱组织中未发生甲基化,而在 BTCC 组织中甲基化频率占46.9%(15/32),并且随着肿瘤分级、分期的增加,其甲基化水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.01).在15例启动子异常甲基化的癌组织标本中,14 例同时伴有 RUNX3 基因表达缺失或下调,二者存在明显的相关性(r=0.6472,P=0.012).RUNX3 mRNA 和蛋白表达在正常膀胱组织和 BTCC 组织分别为93.8%(30/32)、34.4%(11/32),二组间表达差异有统计学意义(P相似文献   

胃肠疾病患者唾液中幽门螺杆菌的检测

目的研究唾液中幽门螺杆菌（helicobacter pylori,Hp）与胃肠疾病的关联性,探讨幽门螺杆菌唾液检测的意义。方法采用细菌培养法,分别对163例胃肠疾病患者的唾液（实验组）和27例非胃肠疾病患者的唾液（对照组）进行检测,并测定阳性样本的Hp分离菌株尿素酶活性及菌液pH值。结果 163例胃肠疾病患者的唾液中有24例（14.72%）检测出Hp,27例非胃肠疾病患者的唾液中有18例（66.67%）检测出Hp。实验组24例Hp分离菌株尿素酶活性高于对照组18例Hp分离菌株,pH值低于对照组,差别具有统计学意义（P〈0.05）。结论唾液中幽门螺杆菌致病性可能存在差异,唾液中尿素酶活性较高、菌液pH值较低的幽门螺杆菌可能与部分胃肠疾病的发生发展相关。Hp的唾液检测作为一种无创,无痛,安全的检测方法值得深入研究。     

HIF-1α、PTEN和P53在大肠癌中的表达和意义及其相关性的研究

目的 探讨HIF-1 α在大肠癌发生、发展中的作用以及抑癌基因PTEN、P53与HIF-1 α的相关性.方法 采用RT-PCR技术检测42例大肠癌组织标本和相应的癌旁正常黏膜组织中HIF-1αmRNA,PTENmRNA,P53mRNA的表达,并分析其相互关系.结果 HIF-1αmRNA在大肠癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织中的表达水平（t=12.47,P=0.00）;HIF-1αmRNA的表达水平与肿瘤部位（t=0.05,P=0.96）性别无关（t=-0.37,P=0.72）;而与Dukes分期呈正相关（t=6.43,P=0.00）;PTENmRNA,P53mRNA在大肠癌组织中的表达水平低于癌旁正常组织;HIF-1α和抑癌基因PTEN、P53之间表现出一定程度的负相关.结论 HIF-1α的过表达在大肠癌的发生发展及浸润转移过程中起着重要作用,大肠癌中抑癌基因PTEN、P53的缺失突变可致HIF-1 α表达水平增高.     

用SSH方法构建BTCC患者尿脱落细胞差异表达基因的cDNA消减文库

目的:应用抑制性消减杂交(SSH)方法构建膀胱移行细胞癌(BTCC)患者与正常人尿脱落细胞差异表达基因cDNA消减文库。方法:分别从BTCC患者与正常人尿液中提取总mRNA,用SMART技术反转录成cDNA,经过HaeⅢ酶切后将BTCC尿脱落细胞cDNA分为两组并接上接头,再与过量正常膀胱尿脱落细胞cD-NA进行两轮消减杂交及两轮抑制性聚合酶链反应(PCR),使得差异表达的DNA片段得以富集。PCR产物与T/A载体连接并转化大肠杆菌JM109构建成差异表达基因的cDNA消减文库。文库扩增后,随机挑取克隆进行酶切、测序及同源性分析。结果:PCR鉴定有317个克隆载有主要在200～900bp之间呈随机分布的插入片段,片段插入率达82.6%,证实建库成功。对20个质粒测序结果经同源性比对分析,其中20个片段源于17个已知基因,1个克隆在GenBank中未检索到与其有相似性的基因序列,表明它们可能为BTCC差异表达的新基因。结论:该消减杂交文库质量可靠,其成功构建为进一步筛选、克隆BTCC差异表达基因提供了依据。     

PBRM1和P53与肾癌的相关性研究

目的 探讨PBRM1和P53蛋白在肾癌中的表达和临床意义.方法 应用免疫组化方法对66例肾癌组织进行PBRM1和P53蛋白检测.结果 在肾癌组织中PBRM1和P53蛋白表达阳性率分别为62.1％和39.4％.PBRM1表达与肾细胞癌分级、分期相关(P＜0.05),与肾癌的病理类型无关(P＞0.05).P53表达与肾癌的病理类型、分级、分期无关(P＞0.05).结论 PBRM1表达水平随着肾癌组织的病理分级和临床分期的增高而增高,可能与肿瘤的生物学行为有一定关系.P53表达在肾癌生物学行为不具有重要意义.     

实时荧光定量PCR快速检测妇科白假丝酵母菌

目的 建立一种快速、灵敏、特异的鉴定白假丝酵母菌实时荧光定量PCR方法.方法 利用实时荧光定量PCR反应体系对妇科白假丝酵母菌进行检测.鉴定结果与临床常规鉴定方法对照,评价其敏感度、特异度及重复性.结果 通过对50例样品的检测,结果显示实时荧光定量PCR法检测标本的鉴定结果与常规鉴定方法的结果对照,特异度为100％,敏感度为100％;最小能检测到10个拷贝数的重组质粒;批内重复实验和批间重复实验结果均与常规鉴定方法结果相符.结论 实时荧光定量PCR法鉴妇科白假丝酵母菌,特异度和敏感度高,重复性好,且快速、简便,该方法将有助于妇科白假丝酵母菌病的早期诊断和针对性治疗.     

EDA-A1基因突变体对人脐静脉内皮细胞 ECV304增殖及细胞周期的影响

目的：研究少汗型外胚层发育不良症 EDA‐A1基因突变体对人脐静脉内皮细胞（ECV ）周期和增殖活性的影响。方法构建 EDA‐A1基因编码序列（CDS）突变体和野生型的真核表达载体 pcDNA3．1（‐）‐EDA‐A1‐M /W ,转染人脐静脉内皮细胞,逆转录 PCR（RT‐PCR）扩增 EDA‐A1基因,蛋白免疫印迹法（Western blot）法检测 EDA‐A1蛋白表达,M TT 法、流式细胞术检测EDA‐A1基因突变体对 ECV 细胞增殖和细胞周期的影响。结果 RT‐PCR 、Western blot 结果显示,野生型组和突变体组 ECV细胞表达 EDA‐A1基因及其蛋白,而空质粒转染组[pcDNA3．1（‐）]和空白对照组细胞无表达。与对照组（空质粒租）相比,突变体组 ECV 细胞增殖活性下降,生长抑制率为45．70％（P＜0．01）,野生型细胞增殖活性无明显改变（P＞0．05）。突变体组中有更多细胞进入 G0/G1期、S 期;野生型组 S 期细胞增多,G2/M 期细胞明显减少（P＜0．05）。结论突变体和野生型 EDA‐A1基因对 ECV 细胞增殖和细胞周期有不同的生物学功能。     

放射治疗后血清YKL-40变化对乳腺癌患者预后判断的价值

目的探讨放射治疗后血清YKL-40变化对乳腺癌患者预后判断的价值。方法采用抽签法随机选取2011年6月至2012年12月在甘肃省肿瘤医院乳腺科门诊进行乳腺癌筛查确诊为健康者30例(健康对照组),以及就诊于放射治疗科的100例乳腺癌患者进行前瞻性研究。采用ELISA法检测健康对照组及乳腺癌患者放射治疗前后血清YKL-40水平。采用独立样本t检验比较健康对照组与抽签法随机抽取的30例乳腺癌患者之间,以及100例乳腺癌患者放射治疗前或放射治疗后CEA、CA153阳性与阴性患者之间YKL-40水平的差异;采用配对t检验比较CEA、CA153阳性或阴性乳腺癌患者放射治疗前与放射治疗后血清YKL-40水平的差异。并且,放射治疗后血清YKL-40升高者与降低者局部复发率及远处转移率的比较采用χ~2检验,生存曲线绘制采用Kaplan-Meier法,生存率比较采用Log-rank检验。结果(1)30例乳腺癌患者放射治疗前后血清YKL-40水平分别为(104.21±22.07)ng/ml和(90.14±23.85)ng/ml,均高于健康对照组的(49.04±9.61)ng/ml(t=12.491、8.673,P均0.001)。100例乳腺癌患者放射治疗前后血清YKL-40水平分别为(102.17±22.04)ng/ml和(91.67±29.18)ng/ml,放射治疗后血清YKL-40水平逐步下降(t=4.002,P0.001)。(2)CEA和CA153阳性患者血清YKL-40水平在放射治疗后较放射治疗前均明显降低[CEA:(87.26±30.28)ng/ml比(107.23±25.54)ng/ml,CA153:(77.52±31.01)ng/ml比(108.12±19.95)ng/ml,t=5.443、4.750,P均0.001]。(3)无论是放射治疗前,还是放射治疗后,CEA阳性患者与阴性患者血清YKL-40水平均接近(t=1.414、-0.992,P=0.164、0.523);而在放射治疗后,CA153阳性患者血清YKL-40水平却明显低于CA153阴性者[(77.52±31.01)ng/ml比(95.90±27.42)ng/ml,t=-2.559,P=0.015]。(4)在100例乳腺癌患者中,88例患者放射治疗后血清YKL-40水平较放射治疗前降低,12例患者放射治疗后血清YKL-40水平较放射治疗前升高。中位随访36个月(24~48个月),血清YKL-40降低者局部复发率、远处转移率分别为18.6%(16/88)和13.6%(12/88),均明显低于血清YKL-40升高者的66.7%(8/12)和50%(6/12)(χ~2=11.081、7.157,P=0.001、0.007)。放射治疗后血清YKL-40升高者1、2、3年OS率分别为91.7%、83.3%、66.7%,而血清YKL-40降低者1、2、3年OS率分别为97.7%、93.2%、86.4%。血清YKL-40升高者OS率明显低于血清YKL-40降低者(χ~2=4.050,P=0.044)。结论 YKL-40在乳腺癌患者血清中具有较高的表达水平,放射治疗期间联合检测血清YKL-40、CEA和CA153,对患者预后的评判具有一定价值。     

HIF-1α的生物活性及其在肿瘤诊治中的应用

肿瘤缺氧是实体瘤常见现象,缺氧可触发机体产生一系列应急性保护反应,使得肿瘤细胞适应缺氧微环境.缺氧诱导因子1α（Hypoxia inducible factor,HIF-1α）是一个在人类大多数实体瘤中呈过度表达的转录因子,在肿瘤细胞适应缺氧、能量代谢、肿瘤血管生成、侵袭转移和耐药性的产生中起重要作用.本文就HIF-1α的结构,生物活性和其在肿瘤诊治中的应用前景作一综述.     

子宫内膜癌预后相关基因的研究进展

子宫内膜癌是女性中高发的恶性肿瘤,有效治疗的关键在于早期筛查与预后监控.子宫内膜癌预后相关的生物标志物对于疾病的预后分析、制定个体化的治疗具有重要意义.随着免疫学和分子生物学的发展,基因在子宫内膜癌发生、发展、预后中的作用成为学者们关注的热点,已经筛选和鉴定了一些与子宫内膜癌预后相关的生物标志物,包括PTEN、凋亡抑制蛋白( Survivin)、ERR、CFTR等,本文就这方面的研究进展进行综述.