基于网络药理学及外周血基因芯片技术探究温阳益气活血方治疗慢性心衰的作用机制

目的基于网络药理学与分子对接技术,预测名中医验方温阳益气活血方治疗慢性心衰的物质基础及作用机制,通过实验探讨温阳益气活血方对慢性心衰患者外周血基因表达谱的影响,为中医药治疗慢性心衰的后续研究提供基础与方向。方法通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)筛选温阳益气活血方中潜在活性成分;GEO数据库获得潜在活性成分的作用靶点;Venny在线平台获得慢性心衰的主要致病靶标。利用STRING数据库和Cytoscape软件构建"方药-成分-靶点-疾病"网络模型及蛋白相互作用(protein-proteininteraction,PPI)网络图,分析方药中主要活性成分及作用靶点蛋白;使用R语言的Cluster Profiler工具包对方药作用核心靶点进行基因本体论(genetic ontology,GO)及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析。借助Autodock进行分子对接。随机选取30例健康志愿者作为对照组。60例慢性心衰患者入选试验组,按随机分为化学药组和中西药组,各组30例。化学药组采用盐酸贝那普利片(10 mg/d)、氢氯噻嗪片(50 mg/d)、螺内酯片(40 mg/d)、琥珀酸美托洛尔片(23.75 mg/d)及地高辛片(0.125 mg/d)联合用药,1次/d;中西药组在常规化学药物口服治疗的基础上联合温阳益气活血方颗粒剂,6 g/次,2次/d,2组疗程均为15 d。对照组于清晨空腹安静状态下,抗凝管采集前臂静脉血,后随机抽取10例外周血用于基因芯片的差异检测;试验组于入院次日清晨空腹状态下采集,最后随机抽取2组中各5例药物干预前后的外周血用于基因芯片的差异检测。采用Affymetrix公司的Prime View TM Human Gene Expression Array基因芯片检测,结合生物信息学的转录组学及RNA技术分析温阳益气活血方的差异表达基因。结果筛选出方药潜在活性成分6个和236个药物靶点;得到方药治疗慢性心衰的潜在作用靶点17个;通过GO分析得出519个生物过程、5个细胞组分、14个分子功能;KEGG通路富集分析得出89条信号通路。2组慢性心衰患者给予不同药物干预后,中西药组外周血基因表达谱中共检测出42640个基因,化学药组为37081个基因,2种干预方法均能影响慢性心衰外周血的基因表达,单纯化学药较中西药联合干预改变慢性心衰的差异基因数目少。相关检测指标血清脑钠肽前体(brain natriuretic peptide,BNP)、中医症状积分及心功能疗效也具有统计学差异(P0.05)。结论初步揭示了温阳益气活血方干预慢性心衰可能是通过多成分、多靶点、多途径发挥防治作用,其作用机制与ZNF331、TRAPPC10、SMAD7、MYC、RORA、PCNA基因相关,涉及Th17细胞分化、B细胞受体信号通路、腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK)通路。     

沙棘对血糖影响的实验研究

目的观察沙棘对实验小鼠血糖水平的影响。方法采用给血糖正常小鼠及注射肾上腺素、葡萄糖引起的高血糖小鼠和过量服用优降糖所致的低血糖小鼠口服沙棘,观察对其血糖水平的影响。结果沙棘对正常小鼠和葡萄糖所致高血糖小鼠有升高血糖的作用,但没有统计学意义(P>0.05),对肾上腺素所引起的高血糖小鼠和优降糖所致低血糖小鼠具有明显升高血糖的作用(P<0.05或P<0.01)。结论沙棘对低血糖小鼠和肾上腺素所致高血糖小鼠有升高血糖的作用。     

益肾定喘胶囊对中医虚喘证动物模型的实验性防治作用

目的观察益肾定喘胶囊对小鼠虚喘证疾病模型的防治作用。方法采用给虚喘证小鼠服用不同剂量的益肾定喘胶囊,观察各组小鼠的一般情况,耐力变化,御寒能力,胸腺重量以及肺组织中MDA的含量及SOD的活性。结果益肾定喘胶囊可有效地延长虚喘证小鼠的负重游泳时间,提高抗寒能力和肺组织中SOD的活力,降低MDA的含量,增加胸腺的重量。结论益肾定喘胶囊对虚喘证小鼠疾病模型有较好的防治作用。     

参蛤纳气口服液对实验性肺气肿的防治作用

参蛤纳气口服液(党参、蛤蚧、陈皮)具有益气培元、纳气归根之功效,临床用于治疗慢性支气管炎、肺气肿、肺心病等呼吸系统疾病。本研究采用木瓜蛋白酶吸入法复制小鼠肺气肿疾病模型,并同时灌服参蛤纳气口服液予以防治,结果显示,该药具有良好防治肺气肿发生的作用,并可提高小鼠耐力,御寒能力和防止胸腺萎缩的作用。     

藏药复方对动物耐缺氧和急性心肌缺血的保护作用

藏药复方是在吸取藏医治疗心血管疾病的经验基础上,结合近年来对部分单味药的药理研究成果而组成。经临床初步观察对冠心病心绞痛有较好疗效。本文报道该复方对动物耐缺氧实验的影响及对实验性心肌缺血的保护作用。实验材料藏药复方含深红红景天、广枣、短管兔耳草等药物,由本所植化室制成干浸膏,每克相当于生药8.8克。实验时灌胃(ig)用蒸馏水稀释成     

藏药复方对犬实验性心肌缺血时心肌氧代谢的影响

本研究选用健康杂种犬35只,随机分为正常组(n=15),缺血组(n=15),给药组(n=15),在左冠状动脉前降支第2～3分支间结扎冠脉,造成心肌缺血模型,观察藏药复方对实验性心肌缺血时心肌氧代谢的影响,结果表明:心肌缺血后冠脉流量下降,心肌氧耗有所减少,给药后冠脉流量有所增加,并在使心脏泵血功能增加的同时,心肌氧耗反而呈下降趋势,提示心肌利用氧的效率得到了一定的提高。     

虫草酒对大鼠血气、酸碱度影响的观察

给大鼠一次性肌注0.47g（生药，0.5ml／100g体重）虫草酒药液后，能明显降低动一静脉血的PH，明显升高PaO2、SaO2，显著增加PaO2－PaCO2的差值与动一静脉血的氧分压差，其组织氧利用系数亦呈升高的趋势，提示虫草酒可能具有纠正某些疾病所致的低氧血症和预防高山反应的功效。     

参蛤纳气口服液对肺肾虚喘小鼠肺组织中SOD、MDA的影响

采用木瓜蛋白酶吸入和腹腔注射氢化可的松造成肺肾虚喘的小鼠疾病模型,灌服参蛤纳气口服液予以治疗。结果显示：该药能够提高小鼠肺组织中ＳＯＤ的活力,降低ＭＤＭ的含量,提高机体清除氧自由基的能力,调节和改善机体氧自由基代谢失衡的作用。     

参蛤纳气口服液对肺肾虚喘小鼠防治作用的研究

参蛤纳气口服液具有益气培元、纳气归根之功效,临床用于治疗肺肾两虚所致的咳喘。本研究采用木瓜蛋白酶吸入和腹腔注射氢化可的松造成肺肾虚喘小鼠疾病模型,并同时灌服参蛤纳气口服液予以治疗。结果显示：该药具有良好的防治肺气肿发生的作用,并可提高小鼠流亡耐力,提高小鼠御寒能力和防治胸腺萎缩的作用,并可提高小鼠肺组织ＳＯＤ的活力,降低ＭＤＡ的含量。