RNAi在白血病相关基因功能研究与基因治疗中的应用

白血病是血液系统最主要的恶性肿瘤之一,估计我国白血病的发病率每年2.71/10万,每年死于白血病患者近4万人,5年无病生存率仅达20%左右。RNA干扰(RNAi)是一种特异有效的阻断靶基因表达的新技术。目前,广泛地应用于人类白血病相关基因功能研究以及白血病基因治疗实验研究中。现就最近应用RANi研究白血病的成果进行综述。     

长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在成人急性 Ｔ 淋巴细胞白血病 中的表达特征及预后相关性

摘要：目的 探讨长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在成人急性 Ｔ 淋巴细胞白血病中的表达及其临床意义。方法 采用实时定量荧光 ＰＣＲ 检测长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在 ２５ 例健康人对照组、３４ 例初治 Ｔ ＡＬＬ 组和 １９ 例 Ｔ ＡＬＬ 治疗缓解后复发患者组骨髓内淋 巴细胞中的表达水平；采用流式细胞术（Ａｎｎｅｘｉｎ Ｖ／ ＰＩ 双染法）检测经过柔红霉素分别处理且 ＬＵＮＡＲ１ 基因呈高、低表达的 ２ 例复发 Ｔ ＡＬＬ 患者的肿瘤细胞凋亡情况；通过 ＮＣＢＩ 数据库获取 Ｔ ＡＬＬ 患者中预后资料与 ＬＵＮＡＲ１ 基因表达数据，ＣＯＸ 回归 分析高表达 ＬＵＮＡＲ１ 基因与临床预后不良的相关性。结果 与健康人对照组相比，ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 在初治 Ｔ ＡＬＬ 组患者骨 髓内淋巴细胞中高表达（５．６１±２．７５ ｖｓ ０．３５±０．２７，ｔ ＝ ６．９３，Ｐ＜０．００１），且复发患者骨髓内淋巴细胞中的 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因的 表达水平显著高于初发患者（２３．９５±９．７９ ｖｓ ５．６１±２．７５，ｔ ＝ ７．５２，Ｐ＜０．００１）；使用柔红霉素处理复发 Ｔ ＡＬＬ 患者肿瘤细胞后，高 表达 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因的 Ｔ ＡＬＬ 细胞凋亡情况显著低于 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因低表达的细胞（４． ０６％ ｖｓ １０． ７０％，Ｐ＜ ０．０５）。Ｃｏｘ 比例风险模型显示，Ｔ ＡＬＬ 患者 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因高表达与临床预后不良相关（ＨＲ＝ １．８６，Ｐ＝ ０．００２）。结论 成人 Ｔ ＡＬＬ 中异常高表达的长非编码 ＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１ 基因与 Ｔ ＡＬＬ 的发病及复发密切相关，可预示疾病的预后及转归。 ＬｎｃＲＮＡ ＬＵＮＡＲ１有望成为潜在检测的 Ｔ ＡＬＬ 发病及复发的分子靶标。     

血浆同型半胱氨酸与急性心肌梗死患者预后的相关性研究

目的 探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与急性心肌梗死(AMI)患者远期发生主要心血管不良事件(MACE)的相关性.方法 连续纳入2012年3月至2014年12月该院心血管内科住院治疗的AMI患者共326例,Hcy等实验室生化指标均由医院医学检验科按标准流程进行检测.对Hcy水平与MACE发生率进行ROC曲线分析,按Cut-off值11.69 μmol/L将研究对象分为Hcy(L)组及Hcy(H)组,收集研究对象的临床基线资料,并定期随访,记录MACE.结果 Hcy(L)组血浆N端B型脑钠钛前体(NT-pro BNP)水平明显低于Hcy(H)组[(501.46±118.35)pg/mL vs.(1 324.11±523.13) pg/mL,P=0.02],而左心室射血分数(LVEF)则明显高于Hcy(H)组[(55.23±9.48)％ vs.(50.79±10.68)％,P=0.03].随访1年后Hcy(H)组LVEF与基线相比明显降低[(45.32±10.18)％vs.(50.79±10.68)％,P＜0.05],且Hcy(H)组MACE发生风险明显高于Hcy(L)组,校正相关混杂因素后仍差异有统计学意义(P=0.048),而Hcy(L)组LVEF、左心室短轴缩短率(FS)与基线资料相比无明显差异[(54.43±10.68)％vs.(55.23±9.48)％、(28.56±6.21)％vs.(29.22-±-5.30)％,P＞0.05].结论 AMI合并高血浆Hcy水平患者发生远期MACE风险较低血浆Hcy水平者明显增加,预后较差,提示血浆高Hcy水平是AMI患者预后不良可能的独立预测因子之一,但其在AMI发生、发展中的作用机制及Hcy干预治疗能否改善AMI患者预后仍有待进一步研究.     

白介素-10基因多态性与广西壮族人群冠心病发病风险的关联性研究

目的探讨白介素-10(interleukin-10,IL-10)基因多态性与广西壮族人群冠心病发病风险的关联性。方法该病例对照研究共纳入研究对象1 202例,其中冠心病患者564例(冠心病组),同期对照者638例(对照组),使用Sequenom MassArray系统对IL-10单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms,SNPs)进行基因分型,采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆IL-10水平,其余相关生化指标均由广西壮族自治区人民医院检验科按标准流程进行检测。使用Logistic回归模型对IL-10 SNPs与广西壮族人群冠心病发病风险进行探讨。结果与对照组相比,该研究并未发现IL-10所研究位点rs3021094、rs3790622、rs1800871与广西壮族人群冠心病发病风险存在关联性,进一步对相关危险因素进行校正后,结果仍无统计学差异。同时,该研究并未发现不同基因型间IL-10水平存在统计学差异。结论 IL-10 rs3021094、rs3790622、rs1800871基因位点多态性与广西壮族人群冠心病的发病可能无关。     

硼替佐米联合GDP方案治疗难治性或复发性非霍奇金淋巴瘤13例疗效观察

目的 观察硼替佐米联合GDP方案（吉西他滨＋顺铂十地塞米松）治疗难治性或复发性非霍奇金淋巴瘤（NHL）的效果.方法 收集13例难治性或复发性NHL,给予硼替佐米1.6 mg/m2,第1天和第8天;吉西他滨1 000 mg/m2,第1和第8天;顺铂25 mg/m2,第1～3天;地塞米松20 mg/m2,第1～5天.21d为1个周期.结果 13例患者中,完全缓解5例,部分缓解5例,总有效率76.92％.不良反应主要为血液学毒性、消化道反应及周围神经炎.结论 硼替佐米联合GDP方案是治疗难治性或复发性NHL较为安全有效的化疗方案.     

干扰素联合高三尖杉酯碱或羟基脲治疗原发性血小板增多症

原发性血小板增多症（ET）病因不明,可能与JAK2基因V617F突变有关［1,2］。EF临床特点是外周血血小板持续显著增多,且伴有功能异常,骨髓巨核细胞增生显著,可无临床症状,有的出现四肢麻木及疼痛,有的以出血及血栓形成表现为主,40%左右患者B超显示脾脏增大。治疗药物以羟基脲（HU）为主,但长期应用可增加白血病的发生率,寻求新的替代药是迫切所需。本科应用干扰素加高三尖杉酯碱和干扰素加羟基脲取得较好疗效。     

抗幽门螺杆菌治疗用于难治性特发性血小板减少性紫癜的疗效观察

目的 探讨根除幽门螺旋杆菌(Hp)在难治性特发性血小板减少性紫癜(ITP)治疗中的作用.方法 72例符合难治性ITP诊断标准且经C14呼气试验Hp阳性的患者纳入试验.在根除Hp治疗前及结束后,定期复查血小板计数,并在治疗结束后进行评估.结果 72例患者治疗后2周、4周、3个月血小板计数均呈递增趋势.基本治愈23例,缓解19例,进步16例,无效14例,总有效率80.6％.结论 根治Hp可以作为治疗合并Hp感染的难治性ITP患者行之有效的非免疫抑制治疗方法之一.     

头晕乏力白细胞明显升高

病历摘要 患者男,78岁.12年前因"头昏、乏力5个月"就诊于丽水市人民医院,查血常规:WBC 14.0×109/L,Hb 220g/L,PLT426×109/L.体检:面色红紫,血氧饱和度95%,肝肋下未及,脾肋下4 cm.肝功能、肾功能、心肌酶、胸片、心电图、心脏彩超、腹部B超、肺功能检查等均未见明显异常.无慢性支气管炎、肺气肿、心脏病、肾病等病史.     

丹参注射液通过抑制JAK2基因突变及其蛋白磷酸化对人红白血病细胞产生抑制增殖及促进凋亡作用

Objective:To explore the effects of Danshen Injection(丹参注射液)on inhibition proliferation,inducing apoptosis and its possible mechanisms on human erythroid leukemic(HEL)cells.Methods:The commercial Chinese patent medicine of Danshen Injection was extracted and isolated from Chinese herb of Salvia miltiorrhiza bung.The inhibition effects of proliferation were assayed by 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide(MTT)method in HEL cells treated by Danshen Injection at various concentrations for 48 h.The cellular apoptosis was observed in morphology,analyzed by flow cytometry with annexin V and propidium iodide(PI)staining,and examined by DNA degradation ladder on agarose gel electrophoresis.Meanwhile,the expression levels of mutant Janus kinasez(JAK2)gene and phosphorylation-JAK2(P-JAK2)protein were detected by allele specific-polymerase chain reaction and Western blot.Results:The proliferation of HEL cells was effectively inhibited by Danshen Injection in a dose-dependent manner,with suppression rates from 19.46±2.31%to 50.20±5.21%.Typical apoptosis cells was observed in Danshen Injection treated HEL cells,the rates of annexin V positive cells increased obviously in a dose-dependent manner,as well as the DNA degradation ladder of apoptosis revealed on gel electrophoresis.The expression levels of mutant JAK2 gene and P-JAK2 protein reduced gradually with increasing dosage of Danshen injection.Conclusion:Danshen Injection could not only significantly inhibit the proliferation,but also induce apoptosis in HEL cells;down-regulation of the mutant JAK2 gene and P-JAK2 protein expressions are probably one of its molecular mechanisms.