HPLC-TOF/MS鉴别大鼠给药重楼提取物后尿液中甾体皂苷类成分

目的采用高效液相-飞行时间质谱(HPLC-TOF/MS)联用技术快速分离并鉴别大鼠灌胃给予重楼提取物后尿液中甾体皂苷类成分,以探索重楼皂苷在大鼠体内的代谢途径。方法选用SD大鼠,按照1.6g/kg体质量灌胃给予重楼提取物,收集给药后24h内的尿液。样品分析采用MG-C18柱(3.0mm×100mm,3.0μm),乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱,在TOF/MS电喷雾离子源下采集正、负离子模式下的数据。利用TOF/MS得到的精确相对分子质量,对照化学成分数据库,对尿液中的甾体皂苷类成分进行鉴别。结果共鉴别出尿液中20个甾体皂苷原型成分,通过碎片离子以及与对照品相比较鉴别出2对同分异构体:重楼皂苷Ⅶ和偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)-α-L-鼠李吡喃糖基(1→3)[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷,纤细薯蓣皂苷和偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)[α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)]-β-D-葡萄吡喃糖苷。结论该方法准确、可靠,可成功用于重楼体内成分的鉴别,可为药动学和药效学研究提供参考。     

五味子甲素4℃条件下血浆蛋白结合率的测定北大核心CSCD

目的:建立HPLC测定五味子甲素与大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法:采用HPLC法测定大鼠血浆中五味子甲素的总浓度及游离药物浓度,色谱分离采用Agilent Zorbax SB-C18(3.0 mm×100 mm,3.5μm)色谱柱,以水-乙腈(40∶60)为流动相,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,检测波长225 nm,进样量5μL;应用平衡透析法测定4℃条件下五味子甲素与大鼠血浆蛋白的结合率。结果:低、中、高3种浓度下,五味子甲素的血浆蛋白结合率分别为(76.0±4.7)%、(87.1±3.2)%、(89.1±1.7)%。结论:在体外,五味子甲素与大鼠血浆蛋白结合率较高,不存在浓度依赖性。     

LC-MS/MS测定阿齐沙坦及其盐在大鼠血浆中的药动学研究

目的 建立液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度并研究其药动学。方法 大鼠血浆样本以乙腈沉淀蛋白后,采用Eclipse Plus C₁₈色谱柱（50 mm×3.0 mm,1.8 μm）;流动相（乙腈：水=60：40）,流速为0.35 mL·min^-1,柱温为40℃;采用Agilent 6430三重四极杆串联质谱仪,离子化方式：电喷雾-正离子（API-ES）;监测方式：MRM;阿齐沙坦监测离子对457.3/233.1,缬沙坦监测离子对436.2/291.4,用作内标。SD大鼠灌胃给予阿齐沙坦1.0 mg·kg^-1及阿齐沙坦盐1.2 mg·kg^-1。结果 阿齐沙坦在5~30 000 ng·mL^-1内线性关系良好;回收率为85%~115%,精密度RSD在±15%内。阿齐沙坦盐大鼠体内主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（12.9±3.2）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（14.2±4.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（3.8±0.3）μg·mL^-1,T_1/2为（13.4±0.5）h。阿齐沙坦的主要动力学参数如下：AUC_{（0-24 h）}为（8.1±2.6）μg·mL^-1·h^-1,AUC_（0-∞）为（9.7±3.1）μg·mL^-1·h^-1,C_max为（2.3±0.5）μg·mL^-1,T_1/2为（10.5±0.5）h。结论 本法经方法学验证,适用于大鼠血浆中阿齐沙坦及其盐的浓度测定,可用于阿齐沙坦及其盐大鼠体内药动学研究。     

HPLC法测定注射用卡非佐米的含量

目的 建立HPLC法测定注射用卡非佐米含量的方法.方法 采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),以水(含质量分数0.1%三氟乙酸)-乙腈(含质量分数0.1%三氟乙酸)(体积比50∶50)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为220 nm,柱温为35 ℃,进样量为20 μL.结果 卡非佐米质量浓度在25~75 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为99.7%,RSD为0.24%(n=9).结论 本法操作简便,结果准确、可靠,可作为注射用卡非佐米的含量测定方法.     

加速溶剂萃取-HPLC-TOF/MS法同时测定重楼中6种甾体皂苷类成分

目的引入加速溶剂萃取(accelerated solvent extraction, ASE)技术,并结合HPLC-TOF/MS法同时测定重楼中6种甾体皂苷类成分的含量。方法加速溶剂萃取仪在120℃、1.17 MPa (1 700 psi)压力下,用70%的乙醇静态萃取样品6 min;6种重楼皂苷的含量用HPLC-TOF/MS同时测定,色谱柱: MGC18柱(3.0 mm×100 mm,3.0 μm);流动相: 乙腈与0.1%(V/V)甲酸水,梯度洗脱;流速: 0.8 ml/min;柱温: 25℃;进样量: 3 μl;离子源: ESI正离子模式;雾化气压力: 275.85 kPa(40 psi);干燥气流速: 10 L/min;干燥气温度: 350℃。结果重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷的线性范围(μg/ml)分别为: 0.500 0~50.00(r=0.999 8)、0.422 3~42.23(r=0.999 7)、0.612 0~61.20(r=0.999 9)、0.714 0~71.40(r=0.999 5)、0.448 0~44.80(r=0.999 9)和0.436 0~43.60(r=0.999 7);各成分的平均回收率(n=6)分别为98.9%、98.0%、102.5%、101.9%、103.1%和97.9%。结论该法溶剂消耗少、耗时短、便于自动化,可实现高通量分析,可用于重楼中皂苷类成分的含量测定。