多囊卵巢综合征临床试验受试者筛查分析

目的 通过对多囊卵巢综合征(PCOS)临床试验受试者的筛查,了解患者对PCOS及其临床试验的认知程度,探究筛查环节在临床试验中的作用及PCOS发病的相关因素和临床特点.方法 研究助手向PCOS患者宣讲PCOS及其临床试验的相关内容,同意接受筛查者,填写纸质版PCOS筛查-纳入情况记录表、门诊病历表及中医证候分级量化表,保留患者的必要检查结果,以作统计分析.结果 1)筛查患者对PCOS及其临床试验的认知程度较低;2)筛查后入组失败的原因主要是:距离远、不感兴趣等;3)受筛查的PCOS患者中医证型分布由高到低依次为:脾虚痰湿证、痰瘀互结证、肾虚肝郁证、肾虚血瘀证;4)基线资料:初潮后月经周期一直不规律者占72.04％;曾有规律的月经周期,后不规律者占27.96％;月经稀发或闭经者占95.70％,子宫异常出血者占4.30％;饮食方式不良者占52.78％,无运动习惯者占81.94％;有家族病史者占57.90％;多毛、痤疮、黑棘皮分别占32.47％、35.07％、41.56％;肥胖者占57.61％,其中向心性肥胖占68.00％;84例受筛查患者中,促黄体生成素(LH)/促卵泡生成素(FSH)比值异常33例,高雄激素血症58例,非酒精性脂肪肝48例,血脂异常24例,胰岛素抵抗(IR)51例,糖耐量异常16例.结论 PCOS患者多无良好的饮食、运动及生活习惯,有明显的家族疾病史,除典型的临床特征外,常表现为向心性肥胖,伴糖脂代谢异常.大多数PCOS患者对该疾病及其临床试验的认知程度低,试验前的筛查环节有助于PCOS知识的普及及早诊早治.     

苯磺顺阿曲库铵细菌内毒素检查法研究

目的：建立苯磺顺阿曲库铵细菌内毒素的常规检测方法。方法：按《中国药典》2015版通则1143细菌内毒素检查法进行,采用不同厂家的鲎试剂对不同批号的苯磺顺阿曲库铵分别进行干扰试验。结果：在验证条件下,供试品用稀释剂Ι溶解制备成5mg?ml-1,并用稀释剂Ι稀释40倍至0.125 mg?ml-1后再用BET水稀释2倍至0.0625 mg?ml-1,对细菌内毒素检查法无干扰作用。结论：建立的方法用于检查苯磺顺阿曲库铵的细菌内毒素可行。     

金银花、忍冬藤药材质量标准研究进展

金银花、忍冬藤来源于忍冬科植物忍冬的不同部位,该文对金银花、忍冬藤历版国家标准、地方标准进行整理概括,寻找演变规律;以及对近年来金银花、忍冬藤药材质量影响因素进行综合概述,为下一步此两种药材的质量控制的研究方向提供参考。     

人肺成纤维母细胞表达骨髓间充质干细胞特性的研究

目的研究原代培养的人肺成纤维母细胞体外分化特性。方法于2006年3月至2006年10月在清华大学第一附属医院中心实验室,将原代培养的人肺成纤维母细胞分别在成骨细胞培养基(含地塞米松,维生素C和β-磷酸甘油)和成脂肪细胞培养基(含马血清,地塞米松和胰岛素)作用下进行分化诱导。组织化学方法行碱性磷酸酶和钙化斑块染色,Westernblotting法测定骨桥蛋白表达,油红染色鉴定脂肪细胞形成。结果在成骨细胞培养基诱导下,细胞内碱性磷酸酶表达增加,于第14天可见大量钙盐沉积和骨桥蛋白表达增加。在成脂肪细胞培养基作用第14天,部分细胞内出现脂肪小滴聚集。结论人肺成纤维母细胞具有多分化潜能,能够在一定条件下向成骨细胞和脂肪细胞分化,表现出骨髓间充质干细胞的特性。     

多囊卵巢综合征“辨病、辨体、辨证”诊疗思路

多囊卵巢综合征是一种病因复杂、病机多端、病情较顽固的多系统、多环节、多靶点的临床表现高度异质性的女性生殖内分泌疾病,多发病于青春期和育龄期妇女。导师侯丽辉教授从事中医临床、教学、科研三十余载,长期潜心于本病的研究,创新性提出了多囊卵巢综合征中医病因病机为"痰瘀胞宫"新理论,并应用"辨病-辨体-辨证"相结合的诊疗模式进行辨证论治取得了显著疗效,为中医临床系统全面地辨治PCOS提供科学的理论依据并指导临床实践。     

血管内皮生长因子基因在人胚胎胰岛干细胞中的表达

目的 构建含血管内皮生长因子(VEGF)基因的慢病毒载体,转染人胚胎来源的胰岛干细胞(hPSC),探讨VEGF在胰岛干细胞中的体外表达水平及其影响因素.方法 将VEGF基因克隆入慢病毒载体,利用293T细胞包装出病毒,按拷贝数分别为2、5、10转染胰岛干细胞,测定不同转染组VEGF的分泌水平.结果 含VEGF的病毒上清可以在体外培养条件下成功转染胰岛干细胞,经潮霉素筛选3 d后,对照组及拷贝数分别为2、5、10的转染组每1×106个细胞每小时VEGF的分泌量分别为(60.3±13.4)、(1622.0±302.0)、(2270.0±340.0)、(3090.0±465.0)ng/L.对照组与转染组间(P＜0.05)以及各转染组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 含VEGF的慢病毒载体可以成功转染人胚胎来源的胰岛干细胞,使其持续高表达VEGF,通过改变转染拷贝数可在一定水平上控制VEGF的分泌水平.

Abstract：

Objective To transfect vascular endothelial growth factor (VEGF) gene into human pancreatic stem cells (hPSC) by lentiviral vectors. Methods VEGF gene was sub-cloned into the lentiviral transfer vectors which also encoded hygromycin gene. The recombinant lentiviral vectors were packaged by 293T cells through three plasmids transient co-transfection method using standard lipofectamine reagent.The viral titers were tested by transfecting 293T cells. hPSC were transducted under different multiplicity of infection (MOI). VEGF secretion level was tested by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Results Lentiviral vectors encoding VEGF and hygromycin resistance gene were constructed. Using lentiviral vectors encoding VEGF, we successfully transfected hPSC, and the transfected hPSC expressed VEGF continuously. On the day 3 after screening by hygromycin, the content of VEGF secreted by 1 × 106 cells per h was (60. 3 ± 13.4), ( 1622.0 ±302. 0), (2270. 0 ±340. 0), (3090. 0 ±465. 0) ng/L respectively when MOI was 0, 2, 5 and 10. The results indicated that VEGF expression was influenced by MOI ( P ＜ 0. 05 ).Conclusion Lentiviral vectors encoding VEGF and hygromycin resistance gene were constructed and could be used to transfect human pancreatic stem cells successfully.     

用于心肌保护的中华小型猪体外循环模型

猪的心血管系统解剖结构、生理功能,尤其是冠状动脉系统接近人类,是研究心肌保护的理想实验模型[1]。我们2007年1月至2008年3月,完成小型猪体外循环下心内直视手术20例,探讨小型猪体外循环模型的麻醉管理、心脏解剖特点及体外循环特点。一、材料和方法1.实验动物:中华小型猪20头,体质量(25.2±2.3)kg。术前禁食12 h,禁饮8h。     

动态浊度法定量检测依地酸二钠中细菌内毒素的含量

目的 建立依地酸二钠细菌内毒素的常规检测方法。方法 根据2015年版《中国药典》四部通则1143细菌内毒素检查法,采用动态浊度法对依地酸二钠进行干扰预试验和正式干扰试验,确定依地酸二钠的不干扰稀释倍数或不干扰稀释浓度。结果 用BET水溶解配制成初始浓度为50 mg?mL-1的供试品溶液,采用钙离子缓冲液稀释50倍,再用BET水稀释2倍进行定量检测。结果无干扰因素影响,内毒素回收率在50%-200%范围内。 结论 动态浊度法可用于检测依地酸二钠中的细菌内毒素含量。     

胰蛋白酶与糖皮质激素影响肺成纤维细胞增殖与骨架蛋白的表达

背景：肺成纤维细胞不但是肺组织的结构支持细胞,还能够通过增殖、收缩、趋化及分泌细胞外基质等多种功能在肺组织的炎症损伤-修复过程中发挥关键作用。目的：观察原代培养的人肺成纤维细胞在胰蛋白酶或糖皮质激素作用下增殖特性与骨架蛋白表达的变化。方法：采用人肺成纤维细胞体外培养,胰酶处理24h,终浓度分别为0,0．5,1．0,5,10mg／L胰酶;地塞米松处理72h,在有血清培养条件下进行,浓度范围10^-9-10^-8 mol／L。MTT法测定成纤维细胞增殖情况;免疫印迹方法测定细胞波形蛋白和肌动蛋白的表达。结果与结论：胰蛋白酶在低浓度（0．1-0．5mg／L）时刺激肺成纤维细胞增殖;而较高浓度（1-10mg／L）明显抑制细胞生长。地塞米松对肺成纤维细胞增殖作用的影响不明显。胰蛋白酶显著上调肺成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白的表达,但对波形蛋白的表达无明显影响;地塞米松（10^-9-10^-6mol／L）显著抑制波形蛋白的表达。结果表明在慢性阻塞性肺病等支气管肺慢炎症性疾病的发病过程中,胰蛋白酶和糖皮质激素可以通过参与成纤维细胞增殖和骨架蛋白的表达发挥作用。