乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞活化的研究

目的 :探讨HBV感染不同的临床结果以及HBV -DNA的复制与其外周血中淋巴细胞活化状况的关系。方法 :应用流式细胞技术检测187例乙型肝炎患者及16例健康对照外周血中淋巴细胞的活化 ,同时利用实时荧光定量PCR测定其体内HBV -DNA载量。结果 :以HLA -DR作为各T淋巴细胞的活化指标 ,急性肝炎恢复期和慢性肝炎患者活化的CD3 、CD4 和CD8 淋巴细胞明显高于健康对照和慢性病携带者 (P<0.05或P<0.01)。而在慢性肝炎中。病程越严重 ,其外周血淋巴细胞的活化率亦越高。但乙型肝炎患者体内的病毒载量与其外周血淋巴细胞的活化无明显相关性 (P>0.5)。结论 :乙型肝炎患者所致的肝细胞损坏以及其体内病毒的清除与机体的免疫状况明显相关 ,但体内乙型肝炎病毒的复制与机体的免疫功能有关。     

血清蛋白质谱模型对肝癌诊断的应用

目的应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)从肝癌患者血清中筛选标志蛋白,找出最佳的标志蛋白组合模式作为临床诊断指标。方法蛋白组学图谱通过表面增强激光解吸电离飞行时间质谱产生。对20例肝癌患者和60例健康志愿者、20例肝硬化的血清蛋白质谱进行反复分析寻找合理运算规则以确定能区分肝癌和健康志愿者与肝硬化患者的蛋白组学图谱。结果发现肝癌患者和肝硬化患者、健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有5个标志蛋白在肝癌患者血清中高表达,1个标志蛋白在肝癌患者血清中低表达。分析系统筛选出4477Da、8943Da、13761Da、4097Da标志蛋白建立起一个肝癌的诊断模型。结论SELDI-TOF-MS技术的特异性及敏感度远远高于目前所采用的某一单独的标志物的血清学诊断,其结果对进一步研究肝癌的蛋白质组学改变及其临床应用可能具有重要意义。     

血清蛋白质谱模型在肝硬化诊断中的应用

肝硬化是我国常见的疾病之一，由肝硬化发展的肝癌的病死率在恶性肿瘤中居第三位，仅次于胃癌与食管癌，严重地威胁着人们的健康。肝硬化、肝癌的早期诊断较为困难，目前有关的研究显示肝病的发病和机体免疫应答功能以及宿主遗传基因的多态性特点有直接关系。但在发病的过程中，人体基因表达蛋白质谱及其发病过程中的变化仍然是一个新的领域。哪些蛋白质的变化可以直接反映肝硬化、肝癌等病情，是本领域中最为关键的问题。通过分析和监视相应蛋白质的变化、作用，能够及时掌握患者病程的特点和进展的趋势，有利于病情的诊断和个体化治疗方案。     

微粒子酶免法检测HBV感染雾血清学标志物的结果分析

目的 探讨不同年龄组HBV感染者的感染情况及雅倍微粒子酶免法（MEIA法）试剂同国产ELISA法试剂的评价。方法 MEIA法、ELISA法。结果 HBV感染者各年龄组HBsAg与CORE含量无显著性差异（P＞0.05），而HBeAg的含量有显著性差异（P＜0.01或P＜0.05）。ELISA法试剂检测乙肝标志物同MEIA法试剂相比的结果符合率以HBsAg、Anti-HBs为最佳，而CORE、Anti-HBe符合率偏低。结论 HBV感染者不同年龄组HBeAg含量有显著性差异，HBeAg与CORE最无显著差异；MEIA法试剂检测乙肝标志物优于ELISA法试剂。     

SELDI-TOF-MS技术在临床诊断中的应用

表面增强激光解析电离飞行时间质谱（surface-enhanced laserdesorption/inionation-time of flightmass spectra,SELDI-TOF-MS）为蛋白质组学研究提供了最为有效的技术平台。它将芯片技术和飞行时间质谱技术相结合,整合样品分离、纯化及检测分析为一体,实现了快速、高效、高通量检测,是在分子水平上诊断疾病的非常重要的工具。     

大肠埃希菌的耐药性及耐消毒剂基因研究

目的 了解大肠埃希菌的耐药性,同时了解产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1的流行情况,揭示大肠埃希菌的耐药机制.方法 2007年1月-2011年11月医院分离的3688株大肠埃希菌用VITEK-32GNI+鉴定,GNS-448检测对氨基糖苷类、(p-)内酰胺类、喹诺酮类等15种抗菌药物的耐药性,并对其中36株产ESBLs大肠埃希菌用PCR法检测耐消毒剂基因qacE△1-sul1的流行状况.结果 3688株大肠埃希菌中共检出1660株产ESBLs菌株,检出率为45.0％;大肠埃希菌除对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低外,对其他抗菌药物均产生了一定的耐药性,36株产ESBLs大肠埃希菌对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、庆大霉素全耐药,未检出亚胺培南、美罗培南耐药株;36株产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1检测结果22株阳性,检出率为61.1％.结论 大肠埃希菌耐药性严重,但近几年基本稳定,产ESBLs大肠埃希菌存在多药耐药性;产ESBLs大肠埃希菌耐消毒剂基因qacE△1-sul1检出率较高,且与多药耐药关系密切.     

应用SELDI-TOF-MS技术分析少精子症患者精浆中的差异表达蛋白

目的:用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析少精子症患者和正常对照组精浆蛋白质指纹图谱的变化,建立能鉴别少精子症患者和正常对照组精浆标志物的诊断模型。方法:收集33例少精子症和31例正常对照的精浆,用CM10(弱阳离子交换芯片)蛋白质芯片和SELDI-TOF-MS检测蛋白质指纹图谱的表达。用Biomarker Patterns Software分析软件进行数据处理,建立区分少精子症患者与正常对照组精浆中蛋白质指纹图谱差异表达模型,并用此模型对33例少精子症患者及31例正常对照组进行盲法交叉验证。结果:在相对分子质量2000~20000范围内,共检测到185种有差异的蛋白峰,其中23种有统计学意义(P<0.05)。建立了由3种差异蛋白质组成的少精子症诊断模型,其敏感性为90.9%(30/33),特异性为93.5%(29/31),双盲法验证结果其敏感性为87.9%(29/33),特异性为90.3%(28/31)。结论:用SELDI-TOF-MS技术初步建立的区分少精子症与正常对照精浆蛋白质差异表达模型可以区别少精子症和正常对照。     

应用SELDI技术检测反义寡核苷酸作用前后胃癌细胞培养液中的差异蛋白

目的：利用针对人端粒酶RNA（hTR）的反义寡核苷酸（ASODN）和正义寡核苷酸（NODN）作用于人胃癌细胞SGC7901,比较ASODN和NODN作用后细胞培养液蛋白的变化。方法：利用SELDI技术检测差异蛋白的表达变化。对照组为未加任何处理因素的SGC7901细胞。结果：SELDI技术检测发现,ASODN作用组有31个差异蛋白分子低表达,10个差异蛋白分子高表达。NODN作用组有25个差异蛋白分子低表达,16个差异蛋白分子高表达。所有差异蛋白分子量均〈10000KDa。ASODN作用组中有6个低表达蛋白在NODN作用组高表达,分子量分别为4180.7KDa、4825KDa、7925.2KDa、8138KDa、8605.1KDa、8935.3KDa。结论：ASODN和NODN作用SGC7901细胞后细胞培养液中所表达的差异蛋白十分相似。     

应用激光解吸电离飞行时间质谱技术筛选无精子症患者精浆差异蛋白

目的：用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）分析无精子症和正常人精浆蛋白指纹图谱的变化，建立能鉴别无精子症和正常人精浆标志物的诊断模型。方法：收集33例无精子症和31例正常人的精浆，用H50（疏水芯片）蛋白质芯片和SELDI-TOF-MS检测蛋白质质谱的表达。用Biomarker Patterns Software分析软件进行数据处理，建立区分无精子症和正常人精浆中蛋白质谱差异表达模型。结果：在分子量2000～20000范围内，共检测到78个有差异的蛋白峰，其中12个差异有显著性（P〈0.01），建立了由3个差异蛋白组成的无精子症诊断模型，其诊断灵敏度为96．9％（32／33），特异性为96．7％（30／31）。结论：用SELDI-TOF-MS技术初步建立的区分无精子症和正常人的精浆蛋白差异表达模型可以区别无精子症和正常人，可能为无精子症的诊断提供新的手段。     

SELDI-TOF-MS技术对胃炎诊断的应用

目的采用蛋白质剖析技术同时解析和分析多种蛋白质，从而找出更好的生物标记物，用于检测胃炎。方法用SELDI—TOF—MS技术及配套蛋白质芯片检测30例慢性胃炎和64例非胃炎疾病患者的血清蛋白质指纹图谱，建立诊断模型。结果2个蛋白质峰[5084和8691质荷比（m／z））组合构建的诊断模型鉴别慢性胃炎和健康志愿者，灵敏度为96．66％（29／30），特异性为93．55％（29／31）。2个蛋白质峰（5910和6440m/z合的诊断模型鉴别胃炎和胃癌患者的灵敏度为96．6％（29／30），特异性为90．9％（30／33）。结论SELDI—TOF—MS在慢性胃炎的诊断尤其是早期诊断及候选标志物筛选等方面具有一定价值，值得进一步深入研究。