白细胞介素-1对大鼠离体胰岛B细胞分泌功能的影响

目的 :观察白细胞介素 1(IL 1)对大鼠胰岛B细胞分泌功能的影响并探讨其机制。方法 :采用胰岛细胞培养的方法 ,观察IL 1对胰岛素分泌和MTT还原的影响 ;通过分子杂交检测c fosmRNA并分析蛋白质合成的变化。结果 :IL 1作用后胰岛素分泌和MTT还原量明显减少 ,且有时间依赖性 ;IL 1诱导c fosmRNA ,从而使细胞蛋白质表达发生变化。结论 :IL 1可能通过改变胰岛细胞内基因表达 ,抑制细胞代谢 ,从而使胰岛素分泌减少     

I型糖尿病患者单个核细胞对大鼠胰岛素分泌的影响

目的：探讨Ⅰ型糖尿病患者发病过程中的细胞免疫变化。方法：采集新发病及病程较长的Ⅰ型糖尿病患者和Ⅱ型糖尿病患者的外周血单个核细胞(PBMCs)与新生大鼠的胰岛细胞共同培养24 h,观察PBMCs对胰岛素分泌的影响。用正常人的PBMCs作对照。结果：只有初发病的Ⅰ型糖尿病患者的PBMCs对大鼠胰岛素的分泌有抑制作用,表现为刺激后胰岛素分泌减少((127.4±26.3)mU／L(n=12)Vs(209.6±41.8)mU／L(空白对照n=6)及(200.9±41.7)mU／L(健康对照n=5),P＜0.05)。结论：初发病的Ⅰ型糖尿病患者存在细胞免疫的异常;且这种异常主要存在于发病前后的较短的时间内;这种异常可能是机体胰岛功能减退的原因之一。     

Ⅰ型糖尿病患者单个核细胞对大鼠胰岛素分泌的影响

目的 :探讨Ⅰ型糖尿病患者发病过程中的细胞免疫变化。方法 :采集新发病及病程较长的Ⅰ型糖尿病患者和Ⅱ型糖尿病患者的外周血单个核细胞 (PBMCs)与新生大鼠的胰岛细胞共同培养 2 4h ,观察PBMCs对胰岛素分泌的影响。用正常人的PBMCs作对照。结果 :只有初发病的Ⅰ型糖尿病患者的PBMCs对大鼠胰岛素的分泌有抑制作用 ,表现为刺激后胰岛素分泌减少 ((12 7 4± 2 6 .3)mU/L(n =12 )Vs(2 0 9.6± 41.8)mU/L(空白对照n =6 )及(2 0 0 9± 41 7)mU/L(健康对照n =5 ) ,P <0 .0 5 )。结论 :初发病的Ⅰ型糖尿病患者存在细胞免疫的异常 ;且这种异常主要存在于发病前后的较短的时间内 ;这种异常可能是机体胰岛功能减退的原因之一。     

神经生长因子对白细胞介素-1β抑制的胰岛B细胞功能的影响

目的：观察神经生长因子（NGF）对白细胞介素－β（IL－1β）作用后的胰岛B细胞分泌功能的影响。方法：实验分为正常对照组，IL－1β作用组，不同浓度NGF对IL-1β处理后胰岛作用组，采用胰岛细胞培养的方法，观察NGF对IL－1β作用后的胰细胞胰岛素基础分泌量、葡萄糖刺激分泌量和对MTT还原的影响，通过斑点印迹检测c-fos mRNA。结果：（1）IL－1β作用的胰岛B细胞胰岛素基础分泌量和葡萄糖刺激分泌量明显低于对照组，不同浓度NGF对IL－1β处理后胰岛作用组的胰岛细胞胰岛素基础分泌量和葡萄糖刺激分泌量明显高于IL－1β作用组；（2）IL－1β抑制胰岛细胞还原MTT，NGF能使MTT还原得到恢复；（3）NGF和IL－1β均诱导c-fos mRNA。结论：NGF具有促进IL－1β抑制的胰岛B细胞功能恢复作用，其机制可能是通过促进细胞代谢，调节基因表达影响细胞内蛋白质的合成。     

超极化激活环核苷酸门控的超极化阳离子通道在神经系统中的分布与功能

对超极化激活环核苷酸门控的超极化阳离子通道(hyperpolarization-activated cyclic nucleotide-gated cation channel,HCN)的研究起源于Ih的发现,1976年Noma首次报道在家兔心脏窦房结组织记录到一种超极化激活的内向电流,称为If.随后在感光细胞和海马CA1区的锥体细胞也记录到这种超极化激活的内向电流,称为Iq.在神经系统,这种超极化激活电流称为Ih.1997年发现介导Ih的离子通道HCN,此后2年间陆续克隆出多种HCN通道,其中在哺乳动物有4种,分别为HCN1、HCN2、HCN3、HCN4.这4种HCN亚型在异源细胞表达中都表现出同源聚合、超极化激活、cAMP调节的非选择性阳离子电流,但其动力学、稳态电压依赖性和cAMP对它们的调节表现不同.随着HCN的成功克隆,从90年代末开始,对HCN分子结构、特征、分布和功能进入了全面的研究.     

蛛网膜下腔注射ZD7288对神经病理痛大鼠机械性痛敏的影响

目的：观察蛛网膜下腔注射（i．t．）ZD7288对模型大鼠痛行为的影响。方法：采用L5／L6脊神经紧结扎的方法制备大鼠神经病理痛模型，通过蛛网膜下腔插管给药。结果：ZD728830g明显升高50％缩足阈值（P〈0．05），表现出明显的镇痛作用，而更低剂量的15μg和7．5μg的镇痛效果不明显。在神经损伤后的5d和14d给予ZD7288，其镇痛效果明显好于损伤后第28d给药（P〈0．05）。这三个剂量的ZD7288并不影响大鼠的运动功能。结论：ZD7288对脊神经结扎大鼠的机械性痛敏有缓解作用，这种作用在结扎后早期比晚期更强。从行为药理学的角度证明脊髓背角超极化激活环核苷酸门控阳离子通道（HCN）可能参与了神经病理痛的形成。     

生理学实验教学体会

生理学是医学院校不可缺少的一门基础学科,是一门实验性科学.生理实验在本科教学中有着十分重要的作用,它可以"补言教之不足,辅思索之未迨,习格物之技艺,明知识之由来."也就是说生理实验课能够加深和巩固课堂所学知识,训练学生科学的思维方法和一些基本的操作技能,还能培养他们的科学精神和职业道德.     

脊神经结扎后慢性病理痛大鼠异位放电的特点分析

目的:研究L5脊神经结扎模型大鼠的L5背根异位放电的特点及其时程变化.方法:以L5脊神经结扎制备大鼠神经病理性痛模型,利用分离背根单纤维细胞外电生理记录异位放电.结果:(1)记录到三类典型的异位放电,即紧张型、簇状及不规律型放电;(2)放电频率随着时间的推移而发生变化,术后24 h达峰值随后逐渐降低;(3)不同类型的异位放电所占比例也随时间而改变,20 h内以紧张型及簇状放电为主,后期则以不规律型放电占绝对多数,术后14 d只记录到不规律型放电;(4)记录到一类高频呈周期性的放电,此类放电很罕见,且仅出现在术后3 d之内.结论:脊神经结扎后,其对应的神经纤维产生大量的不同类型的异位放电,这种放电可能在慢性神经病理性痛的发生发展的早期起着重要作用.     

肌内注射质粒DNA对蟾蜍骨骼肌收缩能力的影响

目的：应用蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本，观察肌内注射质粒DNA后不同时间对肌肉收缩功能的影响。方法：重组DNA制备pcDNA3/ANP。分别将任氏液、pcDNA3／ANP及载体pcDNA3注入对照组、pcDNA3／ANP及组pcDNA3组蟾蜍腓肠肌，间隔1h,2h,4h,8h,24h及48h后，处死动物，制备坐骨神经腓肠肌样本，利用BL－410计算机生物机能实验系统测肌肉的单收缩力和强直收缩力。结果：质粒pcDNA3及pcDNA3／ANP肌内注射后，肌肉的单收缩力及强直收缩力与对照组相比均呈现先降氏后升高的趋势（P均＜0．01）；而pcDNA3和pcDNA3／ANP2者对肌肉的作用差异无统计学意义（P＞0．05）。结论：质粒DNA注射入骨骼肌细胞之后除目的基因的表达之外，还可以影响肌肉的收缩功能。     

白细胞介素—1对大鼠离体胰岛B细胞分泌功能的影响

目的：观察白细胞介素－1（IL-1）对大鼠胰岛B细胞分泌功能的影响并探讨其机制。方法：采用胰岛细胞培养的方法，观察IL－1对胰岛素分泌和MTT还原的影响；通过分子杂交检测c-fos mRNA并分析蛋白质合成的变化。结果：IL－1作用后胰岛素分泌和MTT还原量明显减少，且有时间依赖性；IL－1诱导c-fos mRNA，从而使细胞蛋白质表达发生变化。结论：IL－1可能通过改变胰岛细胞内基因表达，抑制细胞代谢，从而使胰岛素分泌减少。