靶向ATP6L的RNA干扰抑制乳腺癌细胞的体外侵袭能力

目的:通过靶向ATP6L的RNA干扰抑制质子泵的功能,检测MCF-7/ADR乳腺癌细胞的体外侵袭情况.方法:采用有效ATP6L干扰片段及干扰对照分别转染MCF-7/ADR细胞,通过荧光分光光度计检测BCECF与细胞分泌上清孵育后在不同激发光激发后发射的荧光量;用实时荧光定量PCR检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达情况;用明胶酶谱方法检测细胞分泌上清中的MMP-2活性;用细胞侵袭实验(Transwell) 检测细胞体外侵袭能力.结果:在MCF-7/ADR细胞中,下调ATP6L基因的表达可以使细胞的泌H+能力减弱;细胞中MMP-2表达水平无变化;细胞分泌上清中的MMP-2活性减弱;细胞的体外侵袭能力下降.结论:靶向ATP6L的RNA干扰可抑制质子泵的功能,从而抑制MCF-7/ADR乳腺癌细胞的体外侵袭能力.     

Dickkopf-1基因在宫颈鳞癌组织中的甲基化研究

目的检测Dickkopf-1(DKK1)基因在宫颈鳞癌组织中的甲基化状态,分析其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测28例宫颈炎、20例CINⅠ、31例CINⅡ~Ⅲ及36例宫颈鳞癌组织中DKK1基因启动子区甲基化情况,并分析宫颈鳞癌组织中DKK1基因甲基化水平与临床病理特征之间的相关性。结果宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ和宫颈鳞癌组中DKK1基因甲基化阳性率分别为10.7%、10%、32.3%和44.4%。宫颈鳞癌组织的甲基化阳性率明显高于宫颈炎和CINⅠ组,DKK1基因启动子甲基化与肿瘤分化程度以及肿瘤的直径相关。结论 DKK1基因启动子区甲基化检测可能为宫颈鳞癌的诊断以及鉴别诊断提供一个新的检查方法。     

减数下颌第二磨牙矫治恒牙期骨性Ⅲ类错[牙合]畸形的效果分析

目的探讨拔除下颌第二磨牙联合固定矫正技术矫治恒牙期骨性Ⅲ类错[牙合]畸形的效果,为此类患者寻找更好的治疗方案。方法选择2008年1月～2010年1月入我科治疗的恒牙期骨性Ⅲ类错[牙合]畸形患者18例,其中男8例、女10例。年龄14．1。18．2岁,平均（16．2±1．5）岁。治疗方法为所有患者拔除下颌第二磨牙后,用矫治器矫正畸形。对治疗前后以头颅X线侧位片为基础的头影方法测得的评价矫正治疗效果的指标如角度、线距、比例进行比较分析。结果与矫治畸形前比较,18例患者矫治后上颌第一磨牙至腭平面的垂直距离、下颌平面角、前上面高无明显改变,前后差异无统计学意义（P〉0．05）;但[牙合]平面角、腭平面角、前下面高、前面高与治疗前比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论恒牙期骨性Ⅲ类[牙合]畸形在拔除下颌第二磨牙并用矫形器矫正后因上颌第一磨牙位置保持不变而使上下磨牙的关系得到基本改善,但下颌第一磨牙移动距离较大,且糟平面逆时针旋转移位,腭平面顺时针旋转移位从而说明治疗效果有限。因此,在矫治恒牙期骨性Ⅲ类错[牙合]畸形时应遵循的原则是尽量使上磨牙高度稳定、避免前面高的增加,增加矫正的美观程度。     

人源DKK1真核悬浮分泌表达系统的建立及其特异性抗体的制备和鉴定

目的:利用哺乳动物细胞悬浮培养表达系统分泌表达人源Dickkopf-1(DKK1)蛋白,纯化蛋白并制备特异性抗体。方法:构建DKK1真核表达载体pCMVcStrep-DKK1,并借助脂质体将载体瞬时转染入Free-Style293-F细胞(无血清培养),ELISA和蛋白印迹法检测DKK1蛋白表达量。利用亲和层析法纯化DKK1蛋白,Wnt信号通路荧光素酶报告系统检测其生理活性。以纯化的DKK1蛋白免疫BALB/c小鼠获得相应抗体,并初步鉴定其抗原特异性。结果:DKK1蛋白分泌表达在Free-Style293-F细胞培养液中,蛋白浓度在转染后第5天达最高(20mg/L)。所纯化的DKK1蛋白能够抑制Wnt3a蛋白诱导的报告基因的表达。抗DKK1小鼠抗体能特异性识别细胞内源性DKK1蛋白。结论:建立了在哺乳动物细胞悬浮培养系统中高效分泌表达人源DKK1重组蛋白的表达系统,并获得相应的特异性抗体,为其下一步结构与功能研究及在肿瘤中的应用奠定了实验基础。     

DKK1可作为肝癌早查早诊的血清蛋白标志物

上海交通大学医学院附属仁济医院上海市肿瘤研究所"癌基因及相关基因国家重点实验室"覃文新研究组,今年8月在国际著名的医学杂志《柳叶刀.肿瘤学》TheLancetOncology发表了题为"血清DKK1蛋白作为肝癌诊断标志物的大规模临床多中心研究"的论文,证明DKK1蛋白可作为肿瘤标志物用于肝细胞癌的血清     

微型种植体作为支抗在矫正错[牙合]畸形中的临床应用

目的：探讨微型种植体作为支抗在矫正错[牙合]畸形中的临床应用价值。方法：本文采用钛合金微螺钉种植体作为种植支抗对后牙锁患者畸形进行矫正,并对矫正前后X线投影测量结果进行比较分析;结果：所有患者均在规定的治疗时间内良好地耐受了微型种植体,微型种植体保持了良好的稳定性。矫治后,所有患者均出现微型种植体周围软组织轻度水肿,但是未出现感染现象。矫治前后,锁牙齿未伸长,相反还有轻度压低作用;对所有患者矫治前后的X线投影测量结果进行比较分析发现,矫治前后SNA、SNB、ANB、FH-MP等均无明显差异,且差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：本文所用钛合金微螺钉种植体作为种植支抗未导致下颌的旋转,值得临床推广使用。